本文關(guān)鍵詞：丙戊茶堿抑制脊髓JNK信號(hào)通路活化對(duì)大鼠趾部切口痛緩解作用的實(shí)驗(yàn)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:探討JNK信號(hào)通路在大鼠趾部切口痛中的作用及丙戊茶堿(PPF)對(duì)該模型大鼠鎮(zhèn)痛效應(yīng)與JNK信號(hào)通路的相關(guān)關(guān)系。方法:成年雄性SD大鼠150只,體重200~250g,依照隨機(jī)數(shù)字表法分為5組(n=30):IP組(切口組),行趾部切口術(shù);DMSO組(10%DMSO組),術(shù)前30min鞘內(nèi)注射10%DMSO 10μl;NS組(生理鹽水組),術(shù)前30min鞘內(nèi)注射0.9%生理鹽水10μl;SP組(SP600125組),術(shù)前30min鞘內(nèi)注射SP600125 25μg/10μl;PPF組(丙戊茶堿組),術(shù)前30min鞘內(nèi)注射丙戊茶堿10μg/10μl。于趾部切口術(shù)前24h、術(shù)后2、6、24、48、72h行機(jī)械縮痛閾(MWT)、熱痛閾(TWL)測(cè)試;在術(shù)前24h、術(shù)后6、24、48、72h行為學(xué)測(cè)試后取大鼠腰膨大,應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA法)測(cè)TNF-α含量,免疫熒光標(biāo)記染色法觀察p-JNK分布及表達(dá),免疫熒光雙染色標(biāo)記法觀察p-JNK與腰膨大背角小膠質(zhì)細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞及神經(jīng)元的共表達(dá)情況;于術(shù)后72h進(jìn)行Western blot檢測(cè)腰膨大p-JNK的表達(dá)量;將所得結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果:1、行為學(xué)研究:與術(shù)前24h比較,各組術(shù)后各時(shí)間點(diǎn)MWT、TWL均降低(P0.05),SP組術(shù)后72h無明顯差異(P0.05);與IP組比較,SP組、PPF組術(shù)后各時(shí)間點(diǎn)MWT、TWL均升高(P0.05);與SP組比較,PPF組術(shù)后2h MWT較低(P0.05),術(shù)后6h TWL時(shí)長(zhǎng)較短(P0.05),但其他各時(shí)間點(diǎn)上二組變化相似。2、ELISA法腰膨大TNF-α水平檢測(cè):與術(shù)前24h比較,各組術(shù)后各時(shí)間點(diǎn)TNF-α均明顯升高,于術(shù)后6h達(dá)峰(P0.05);與IP組比較,SP組、PPF組在術(shù)后各時(shí)間點(diǎn)腰膨大TNF-α含量明顯降低(P0.05);與SP組比較,PPF組在術(shù)后各時(shí)間點(diǎn)腰膨大TNF-α含量稍高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。3、免疫熒光觀察腰膨大p-JNK的表達(dá)與分布:與術(shù)前24h比較,IP組、SP組術(shù)后6、24、48、72h脊髓p-JNK陽性細(xì)胞數(shù)均增加(P0.05);與IP組比較,SP組在術(shù)后6、24、48、72h脊髓p-JNK陽性細(xì)胞數(shù)均減少(P0.05)。免疫熒光染色顯示p-JNK術(shù)后6h即有表達(dá),至術(shù)后72h升至最高。免疫熒光雙染色共表達(dá)式結(jié)果顯示,切口痛模型大鼠脊髓腰膨大中p-JNK主要與小膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)記物(Iba-1)共表達(dá)。4、Western blot檢測(cè)術(shù)后72h腰膨大p-JNK的相對(duì)含量:與術(shù)前24h比較,術(shù)后72h IP組、PPF組脊髓p-JNK含量升高(P0.05),SP組含量減少(P0.05);與IP組比較,SP組和PPF組在術(shù)后72h脊髓p-JNK含量均減少(P0.05);與SP組比較,PPF組在術(shù)后72h腰膨大處p-JNK含量較多(P0.05)。結(jié)論:1、脊髓JNK信號(hào)通路活化對(duì)大鼠趾部切口痛的產(chǎn)生和維持有促進(jìn)作用,通過鞘內(nèi)注射JNK信號(hào)通路特異性抑制劑可翻轉(zhuǎn)手術(shù)切口誘發(fā)的痛覺過敏和痛覺超敏;2、抑制JNK信號(hào)通路活化可減少趾部切口術(shù)后大鼠腰膨大TNF-α的表達(dá);3、大鼠趾部切口術(shù)前鞘內(nèi)注射丙戊茶堿可通過抑制脊髓小膠質(zhì)細(xì)胞中JNK信號(hào)通路活化緩解術(shù)后疼痛,同時(shí)減少腰膨大TNF-α的含量。
【關(guān)鍵詞】：丙戊茶堿 趾部切口痛 c-Jun氨基末端蛋白激酶(JNK) 腫瘤壞死因子α(TNF-α) 膠質(zhì)細(xì)胞
【學(xué)位授予單位】：蘭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R614
【目錄】：

• 中文摘要3-5
• Abstract5-9
• 前言9-11
• 背景回顧11-18
• 1. JNK信號(hào)通路與病理性疼痛11-13
• 2. 活化膠質(zhì)細(xì)胞在病理性疼痛中的作用13-14
• 3. 膠質(zhì)細(xì)胞活化抑制藥物丙戊茶堿的研究進(jìn)展14-15
• 4. TNF-α 與病理性疼痛15-18
• 材料與方法18-26
• 1. 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物18
• 2. 主要試劑及配制方法18-20
• 3. 主要儀器和設(shè)備20
• 4. 實(shí)驗(yàn)分組20-21
• 5. 動(dòng)物模型的建立21
• 6. 鞘內(nèi)注射給藥術(shù)21
• 7. 行為學(xué)研究21-22
• 8. 灌注、固定及取材22-23
• 9. 免疫熒光染色觀察脊髓背角p-JNK的分布及表達(dá)23
• 10. ELISA檢測(cè)腰膨大中TNF-α 含量23-24
• 11. Western Blot定量檢測(cè)腰膨大處p-JNK的含量24
• 12. 免疫熒光雙染色觀察脊髓背角p-JNK共表達(dá)24-25
• 13. 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理25-26
• 實(shí)驗(yàn)結(jié)果26-39
• 1. 行為學(xué)測(cè)試結(jié)果26-32
• 1.1 第一部分實(shí)驗(yàn)結(jié)果26-29
• 1.2 第二部分實(shí)驗(yàn)結(jié)果29-32
• 2. ELISA檢測(cè)腰膨大TNF-α 含量結(jié)果32-34
• 2.1 第一部分實(shí)驗(yàn)結(jié)果32-33
• 2.2 第二部分實(shí)驗(yàn)結(jié)果33-34
• 3. 免疫熒光染色觀察結(jié)果34-36
• 4. Western blot檢測(cè)結(jié)果36-38
• 4.1 第一部分實(shí)驗(yàn)結(jié)果36-37
• 4.2 第二部分實(shí)驗(yàn)結(jié)果37-38
• 5. p-JNK的共表達(dá)結(jié)果38-39
• 討論39-43
• 1. 行為學(xué)測(cè)試結(jié)果討論39-40
• 2. ELISA檢測(cè)腰膨大TNF-α 含量結(jié)果討論40-41
• 3. 免疫熒光染色觀察和Western blot檢測(cè)結(jié)果討論41-42
• 4. p-JNK的共表達(dá)結(jié)果討論42-43
• 結(jié)論43-44
• 創(chuàng)新性分析44-45
• 研究的局限性及展望45-46
• 參考文獻(xiàn)46-54
• 附錄54-60
• 附錄一 技術(shù)路線圖54-55
• 附錄二 von Frey纖維絲行為學(xué)測(cè)量陽性/陰性反應(yīng)參數(shù)表55-56
• 附錄三 文中所述部分圖片56-58
• 附錄四 縮略語58-60
• 在學(xué)期間撰寫論文60-61
• 致謝61

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫 前7條

1 舒瑞友;丙戊茶堿的合成[J];齊魯藥事;2004年04期

2 張艷兵;王麗娜;成浩;姚明;侯永恒;楊建平;;丙戊茶堿預(yù)處理削弱大鼠關(guān)節(jié)炎痛覺過敏的脊髓機(jī)制[J];中國(guó)藥理學(xué)通報(bào);2007年10期

3 卜曉萱,范圣登,沈志忠;丙戊茶堿對(duì)嗎啡耐受大鼠脊髓星型膠質(zhì)細(xì)胞的影響[J];臨床麻醉學(xué)雜志;2005年02期

4 ;丙戊茶堿延緩癡呆病的發(fā)展[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).藥學(xué)分冊(cè);1995年05期

5 張進(jìn);劉春;郭云童;;丙戊茶堿對(duì)慢性前列腺炎疼痛大鼠的作用及機(jī)制[J];中華男科學(xué)雜志;2012年11期

6 ;丙戊茶堿對(duì)腦血管障礙患者的臨床療效[J];國(guó)外醫(yī)藥.合成藥.生化藥.制劑分冊(cè);1996年05期

7 ;[J];;年期

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 周海嬌;丙戊茶堿抑制脊髓JNK信號(hào)通路活化對(duì)大鼠趾部切口痛緩解作用的實(shí)驗(yàn)研究[D];蘭州大學(xué);2016年

2 張艷兵;大鼠鞘內(nèi)注射丙戊茶堿抗炎性熱痛覺過敏脊髓機(jī)制[D];蘇州大學(xué);2007年

3 張進(jìn);丙戊茶堿對(duì)慢性前列腺炎疼痛大鼠GFAP及TNF-α作用的機(jī)制研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2012年

  本文關(guān)鍵詞：丙戊茶堿抑制脊髓JNK信號(hào)通路活化對(duì)大鼠趾部切口痛緩解作用的實(shí)驗(yàn)研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：283471