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EPO對SD大鼠心臟移植術(shù)后血清炎性細胞因子IL-10、TGF-β、IL-2、IL-8水平的影響

發(fā)布時間:2020-09-21 11:00
   目的:課題組前期研究發(fā)現(xiàn)SD大鼠心臟移植術(shù)后心肌組織間出現(xiàn)了大量的炎性細胞浸潤現(xiàn)象,嚴重影響了心臟移植術(shù)后的心功能,因此本次實驗擬以SD大鼠為研究對象,通過檢測心臟移植后血清IL-10、TGF-β、IL-2、IL-8炎性細胞因子表達水平及炎性細胞的浸潤情況,探討EPO能否對心臟移植術(shù)后IL-10、TGF-β、IL-2、IL-8表達產(chǎn)生影響,從而減輕心臟移植術(shù)后炎性細胞浸潤程度,發(fā)揮一定的心肌保護作用。方法:1.健康的雄性SD大鼠(n=90),采用隨機數(shù)字表法分為假手術(shù)組(A組,n=18)、單純心臟移植組(B組,n=36,供體18只,受體18只)、心臟移植+EPO組(C組,n=36,供體18只,受體18只),假手術(shù)組僅做開腹手術(shù),單純心臟移植組單純行腹部異位心臟移植,心臟移植+EPO組行腹部行異位心臟移植并予以EPO干預,各組分術(shù)前1d、術(shù)后第1d、術(shù)后第5d三個批次,各組每批次6只大鼠(注:B組及C組供體、受體各6只/批次),獲取各組各批次的血液及供心組織標本,血液標本離心獲取上層血清檢測心肌酶,檢測IL-10、TGF-β、IL-2、IL-8等炎性細胞因子指標,心肌組織進行HE染色觀察炎性細胞浸潤、分布情況。2.模型簡述:供體異氟醚氣體麻醉后平臥于恒溫手術(shù)床,開腹后于腔靜脈注射肝素鹽水0.5ml(濃度20IU/ml)使大鼠全身肝素化!剪開胸腔暴露心臟,分別游離并剪斷胸主動脈和肺動脈(盡量留長),束扎其余血管并剪斷,取出心臟置于冰鹽水中備用;受體麻醉滿意后取腹部正中切口,充分暴露游離腹主動脈及下腔靜脈至少4mm,微血管夾阻斷后,各剪出適當大小吻合口,取出供體心臟,其主動脈與受體腹主動脈、肺動脈與下腔靜脈分別做端側(cè)連續(xù)吻合,完成后慢慢恢復血供,數(shù)分鐘后移植心恢復跳動,手術(shù)成功后關(guān)腹,放入籠中常規(guī)給水及食物,恒溫保暖直至蘇醒。結(jié)果:1.模型建立:(1)建立模型過程中有兩例因腹部切口縫合原因?qū)е履c梗阻死亡,有一例因麻醉意外死亡,在建模過程中各組、各時間點存活情況比較無差異(P0.05)。(2)心臟搏動情況:因A組腹部未行心臟移植,故無法觸及心臟搏動;心臟移植術(shù)后第1d,B組與C組移植心搏動強度無明顯變化;術(shù)后第5d,B組較C組移植心搏動強度明顯減弱。(3)心肌酶情況:心臟移植術(shù)后第1d、第5d,B組與A組相比,B組血清磷酸肌酸激酶、乳酸脫氫酶明顯升高(P0.05);心臟移植術(shù)后第1d、第5d,B組與C組相比,B組血清磷酸肌酸激酶、乳酸脫氫酶明顯升高(P0.05)。2.HE染色情況:A組、B組、C組各組術(shù)前第1d的HE染色圖片心肌細胞的結(jié)構(gòu)均完整,心肌纖維排列規(guī)則,細胞間少量炎性細胞浸潤,無局部出血、壞死;B組術(shù)后1d心肌細胞腫脹、破壞嚴重,肌纖維排列極為不規(guī)則,炎性細胞浸潤增多,C組術(shù)后第1d出現(xiàn)少量炎性細胞浸潤;B組術(shù)后第5d炎性細胞浸潤進一步增加,心肌細胞壞死嚴重程度增加,心肌纖維結(jié)構(gòu)排列紊亂,C組術(shù)后第5d炎性細胞浸潤有少量增多,但心肌結(jié)構(gòu)排列仍然較為規(guī)則。3.IL-10、TGF-β、IL-2、IL-8炎性細胞因子指標變化情況:心臟移植術(shù)后第1d、第5d,B組與C組相比,B組血清IL-2、IL-8水平明顯升高,C組IL-10、TGF-β水平升高明顯(P0.05)。結(jié)論:EPO對血清抑炎性細胞因子IL-10、TGF-β及促炎性細胞因子IL-2、IL-8的水平起調(diào)節(jié)作用,通過減輕心臟移植術(shù)后血清致炎性細胞因子的水平,發(fā)揮心肌保護作用。
【學位單位】:遵義醫(yī)學院
【學位級別】:碩士
【學位年份】:2018
【中圖分類】:R654.2
【部分圖文】:

實驗流程


遵義醫(yī)學院碩士學位論文 陳福暉121.3 主要實驗流程:圖 1 主要實驗流程圖1.4 統(tǒng)計學處理研究結(jié)果的具體數(shù)據(jù)采用SPSS18.0軟件系統(tǒng)分析處理,以均數(shù)±標準差(x ±s)表示計量數(shù)據(jù),多組間比較用單因素方差分析,組間兩兩比較用LDS檢驗,方差不齊時用Brown-Forsythe或Welch校正,同一組內(nèi)不同時間點用重復測量方差分析,χ2檢驗分析計數(shù)資料百分率,以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

血清磷,水平變化,血清乳酸脫氫酶,表達水平


注:與 B 組術(shù)后第 1d 比較,▲P<0.05;與 B 組術(shù)后第 5d 比較,#P<0.05(2)心臟移植術(shù)后第 1d,A 組與 B 組相比,B 組血清乳酸脫氫酶的倍(P<0.05);心臟移植術(shù)后第 5d,A 組與 B 組相比,B 組血清水平升高 6.5 倍(P<0.05);心臟移植術(shù)后第 1d,C 組與 B 組相比氫酶的表達水平升高 1.8 倍(P<0.05);心臟移植術(shù)后第 5d,C 組血清乳酸脫氫酶的表達水平升高 1.8 倍(P<0.05)(見表 5 及圖 3表 5 各組不同時間點血清乳酸脫氫酶水平變化( x ±s,n=6)(濃度 I組別 術(shù)前 1d 術(shù)后第 1d A 組(假手術(shù)組) 135.73±13.76 144.26±20.15▲1B 組(心臟移植組) 142.63±16.45 1025.15±13.49 ▲圖 2 不同時間點各組血清磷酸肌酸激酶水平變化(n=6)

血清乳酸脫氫酶,水平變化,觀察時間


注:與 B 組術(shù)后第 1d 比較,▲P<0.05;與 B 組術(shù)后第 5d 比較,#P<0.05觀察時間(d)圖 3 不同時間點各組血清乳酸脫氫酶水平變化(n=6)

【參考文獻】

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本文編號:2823404

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