目的:建立一種簡(jiǎn)便易行的大鼠尾椎椎間盤退變模型,通過(guò)在同一大鼠尾椎建立不同機(jī)制(針刺以及異常機(jī)械應(yīng)力)的椎間盤退變模型以盡可能減少個(gè)體誤差,并以此模型為基礎(chǔ)探索以上兩種不同退變機(jī)制分別對(duì)纖維環(huán)單根膠原纖維納米級(jí)別生物力學(xué)特性的影響。方法:選用14只三月齡發(fā)育成熟的雄性清潔級(jí)SD大鼠,戊巴比妥麻醉后,手法定位大鼠尾椎間盤位置(Co5-Co10)。在自制限制器的協(xié)助下,使用20G穿刺針對(duì)Co6-Co7椎間盤行半程穿刺操作(穿深5mm)。之后在Co7-Co10之間加裝自行設(shè)計(jì)的外固定支架造模完成。4周后,麻醉全部14只大鼠尾椎行磁共振矢狀位T2加權(quán)像掃描,并通過(guò)磁共振指數(shù)對(duì)各目標(biāo)椎間盤退變程度加以評(píng)分。之后過(guò)量麻醉處死大鼠,隨機(jī)選擇七只大鼠行固定、脫水、染色(HE染色和番紅O-快綠染色)并以經(jīng)典的Masuda(增田)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)椎間盤退變程度加以評(píng)分(評(píng)價(jià)內(nèi)容包括髓核內(nèi)容物、纖維環(huán)形態(tài)以及髓核纖維環(huán)邊界);剩余七只大鼠采用手動(dòng)方式取出完整的尾椎間盤并作冰凍切片(橫截面),之后利用原子力顯微鏡(AFM)對(duì)纖維環(huán)內(nèi)、外層掃描從而獲得納米級(jí)膠原纖維圖像以及相應(yīng)區(qū)域的膠原纖維彈性模量數(shù)據(jù)。結(jié)果:異常壓應(yīng)力組以及針刺組大鼠尾椎間盤MRI信號(hào)明顯低于正常組及鄰近組大鼠尾椎間盤,組織切片染色發(fā)現(xiàn)針刺組與異常壓應(yīng)力組大鼠椎間盤也表現(xiàn)出明顯退變跡象。原子力顯微鏡掃描發(fā)現(xiàn)所有實(shí)驗(yàn)組外層纖維環(huán)膠原纖維彈性模量均大于內(nèi)層膠原纖維的彈性模量。與正常組相比,異常壓應(yīng)力組椎間盤纖維環(huán)外層膠原纖維彈性模量由142.89±17.15 MPa增長(zhǎng)到167.10±35.05MPa(P=0.0625),針刺組大鼠尾椎間盤纖維環(huán)外層彈性模量由142.89±17.15MPa增長(zhǎng)為225.73±25.39MPa(P=0.0004)。結(jié)論:在本實(shí)驗(yàn)中,自行設(shè)計(jì)的大鼠退變模型成功引起椎間盤退變,造模成功。針刺組纖維環(huán)膠原纖維彈性模量顯著大于異常壓應(yīng)力組,這表明針刺機(jī)制誘導(dǎo)的椎間盤退變與異常壓應(yīng)力誘導(dǎo)的退變不同,纖維環(huán)膠原纖維表現(xiàn)出明顯僵硬化現(xiàn)象,這種納米級(jí)別的特殊改變?yōu)槲覀兲峁┝艘粋�(gè)理解針刺對(duì)椎間盤退變影響的全新視野,同時(shí)也為未來(lái)開發(fā)椎間盤退變治療方法和選擇提供了一定的指導(dǎo)。
【學(xué)位單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：R681.5
【部分圖文】：

大鼠尾椎間盤退變模型完成圖

有與克氏針直徑相符針孔，針孔間隔依次為13mm、12mm、13mm，20G穿刺針（蘇大附一院提供），空心骨鉆（廣州華創(chuàng)醫(yī)療器械有限公司）。穿刺輔助模具及模型用具如圖2，共分上下兩部分，兩部分均對(duì)應(yīng)每隔12mm穿一孔洞，中央?yún)^(qū)域做一錐形孔洞以適應(yīng)大鼠尾巴直徑近端向遠(yuǎn)端逐漸變小的特點(diǎn)（近遠(yuǎn)端孔徑直徑根據(jù)適齡大鼠尾巴實(shí)際測(cè)量直徑制作）。最后實(shí)際大鼠模型如圖.1b。圖 1a 自制大鼠尾椎間盤退變模型示意。Co6-Co7 椎間盤為針刺組，Co8-Co9 為異常壓應(yīng)力組（兩側(cè)拉伸可以防止大鼠尾巴卷曲，干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果）13mm 11mm 13mmProximalDistalCo6-Co7Needle-puncturedCo8-Co9CompressedCo5-Co6NormalCo10-Co11Adjacent

實(shí)驗(yàn)結(jié)果手術(shù)良好，均存活過(guò) 4 周的實(shí)驗(yàn)期。g，外固定支架（約 5.0g）對(duì)大鼠日常架滑脫現(xiàn)象。狀面 T2 加權(quán)像尾椎圖像見圖 3a，依結(jié)果顯示，針刺組與壓縮組大鼠椎間 T2 加權(quán)像低信號(hào)，且磁共振指數(shù)顯示0.01）。臨近組 Co10-Co11 椎間盤含水。針刺組與壓縮組之間椎間盤髓核含水

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 Bao-Gan Peng;;Pathophysiology, diagnosis, and treatment of discogenic low back pain[J];World Journal of Orthopedics;2013年02期

本文編號(hào)：2815640