目的:通過探討中藥丹紅注射液(Danhong injection,DH)聯(lián)合人脂肪干細(xì)胞(human adipose-derived stem cells,hADSCs)對脂肪移植動(dòng)物模型移植脂肪顆粒(adipose granu1e,AG)成活率的影響,尋找提高自體脂肪移植(Autologous fat transplantation,AFT)成活率的新方法。方法:1處理脂肪組織,分離并體外培養(yǎng)hADSCs;對培養(yǎng)得的第三代hADSCs運(yùn)用流式細(xì)胞儀進(jìn)行相關(guān)抗原檢測,通過研究其相關(guān)抗原表達(dá)情況確定細(xì)胞性質(zhì)。2制作AG并據(jù)干預(yù)因素不同分成四組,A組為單純AG組、B組為AG+hADSCs組、C組為DH+AG組、D組為DH+hADSCs+AG組。實(shí)驗(yàn)裸鼠隨機(jī)分組,每組6只,運(yùn)用脂肪顆粒注射填充法構(gòu)建脂肪移植裸鼠動(dòng)物模型;后AB兩組每日腹腔注射生理鹽水,CD兩組每日注射等量DH。移植術(shù)后15 d、30 d每組分別處死3只裸鼠,測量移植物體積,顯微鏡下觀察移植物纖維增生情況和新生毛細(xì)血管數(shù)量、通過免疫組織化學(xué)切片法(Immunohistochemistry sections,IHC)檢測移植物血管的密度值。結(jié)果:1.hADSCs培養(yǎng)7-9 d后培養(yǎng)瓶中見到有大量梭形細(xì)胞,14 d左右見梭形細(xì)胞呈旋渦狀或束狀。原代細(xì)胞達(dá)到80%融合時(shí)進(jìn)行傳代。用流式細(xì)胞術(shù)對第三代hADSCs進(jìn)行相關(guān)抗原檢測:表明CD29、CD44、CD90的表達(dá)率均在92%以上;CD31、CD45、CD146陽性率均小于6%(Fig.5),是幾乎不表達(dá)的,證明該實(shí)驗(yàn)中所培養(yǎng)的細(xì)胞確實(shí)是h ADSCs。2.移植術(shù)后15 d,可見移植物表面含少量毛細(xì)血管的包膜形成,四組對比:D組移植物新生毛細(xì)血管最多,A組最少,B、C兩組介于A、D之間。移植術(shù)后30 d,對移植物的體積比較:A與B,A與C,A與D,B與D,C與D之間的差異均具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),B組與C組之間的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),即D組最大,A組最小,B、C兩組介于A、D之間。3.對移植術(shù)后15 d移植物血管密度值進(jìn)行兩兩比較,A與B,A與C,A與D,B與D,C與D之間的差異均具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);B與C之間的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),認(rèn)為D組最高,A組最低,B、C兩組組介于A、D組之間。結(jié)論:DH與h ADSCs雙因素聯(lián)合協(xié)同自體脂肪移植,優(yōu)于單因素干預(yù),動(dòng)物模型脂肪移植物成活率提高,且移植物周圍新生毛細(xì)血管的密度更大。
【學(xué)位單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：R622
【部分圖文】：

圖 1 原代 hADSCs 培養(yǎng) 24h 的形態(tài)(×100) The morphology of hADSCs cultured for 24 hours at passage (×100)

圖 2 原代 hADSCs 培養(yǎng) 7d 的形態(tài)(×100) The morphology of hADSCs cultured for 7 days at ppassage (×100)

圖 4 第 3 代 hADSCs 培養(yǎng) 48h 的形態(tài)(×100)morphology of hADSCs cultured for 5 days at 3rd pas

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 李鵬飛;鄭丹寧;周佳;王健;張波;朱昌;余力;;丹參、黃芪注射液對自體脂肪移植存活率的影響[J];組織工程與重建外科雜志;2015年03期

2 吳為民;溫立霞;吳磊;;自體脂肪移植在顳部凹陷填充中的應(yīng)用[J];組織工程與重建外科雜志;2015年01期

3 李營;陳福生;趙國錄;李軍;黃威;;自體脂肪移植在隆鼻術(shù)中的臨床應(yīng)用[J];中國美容整形外科雜志;2014年10期

4 李鵬超;;自體脂肪顆粒移植在修復(fù)淚溝中的應(yīng)用[J];中國美容醫(yī)學(xué);2014年15期

5 郭愛弟;張心霞;項(xiàng)艷;逯巖;;自體顆粒脂肪填充聯(lián)合面部提升在鼻淚溝凹陷矯治中的應(yīng)用[J];中國美容醫(yī)學(xué);2012年15期

6 楊文爽;王佳琦;郭鑫;王太玲;于浩;宋維銘;鄭行躍;侯典舉;;重瞼術(shù)聯(lián)合自體顆粒脂肪組織注射充填術(shù)在治療上瞼凹陷的臨床應(yīng)用[J];中國美容醫(yī)學(xué);2012年04期

7 趙德梅;譚謙;;提高自體脂肪移植成活率的研究進(jìn)展[J];中國美容醫(yī)學(xué);2011年12期

8 張暉;馮幼平;;純化自體脂肪顆粒在上瞼凹陷矯治中的應(yīng)用[J];中國美容醫(yī)學(xué);2011年11期

9 仝朋飛;楊大平;;脂肪來源干細(xì)胞在脂肪移植中的作用及其臨床應(yīng)用進(jìn)展[J];中國美容醫(yī)學(xué);2010年07期

10 謝蕓;鄭丹寧;劉凱;顧斌;李青峰;;自體脂肪移植綜合技術(shù)在面部輪廓整形中的應(yīng)用[J];中華整形外科雜志;2010年03期

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前1條

1 伍鋒;丹紅注射液聯(lián)合脂肪干細(xì)胞移植改善糖尿病裸鼠后肢缺血血管新生的研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2013年

本文編號：2813285