【摘要】：目的:發(fā)育性髖脫位(developmental dysplasia of the hip,DDH)的發(fā)病機(jī)制眾多,目前難以明確,既往研究及觀察證實(shí)髖臼形態(tài)改變與其密切相關(guān)。該研究通過比較正常幼兒與DDH患兒髖臼軟骨組織中asporin(ASPN)在mRNA和蛋白水平上的表達(dá)差異,探索引起發(fā)育性髖脫位髖臼軟骨形態(tài)改變的原因。研究方法:收集2013年05月至2016年11月在中國醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院小兒骨科住院的發(fā)育性髖脫位患者,行髖關(guān)節(jié)切開復(fù)位治療時(shí)清除的少許髖臼窩邊緣軟骨組織作為研究對(duì)象(共計(jì)26例,30髖,其中男性3例,女性23例,年齡6月至6歲,平均2.42±1.51歲)。收集惡性腫瘤截肢的兒童、引產(chǎn)胎兒以及因其它疾病死亡的非骨關(guān)節(jié)畸形新生兒的髖臼軟骨組織作為正常對(duì)照(共計(jì)10例,15髖,其中男性4例,女性6例,年齡0天至5歲,平均0.33±1.25歲)。上述標(biāo)本組織均于液氮或-80℃條件下保存,應(yīng)用iTRAQ(isobaric tags for relative and absolute quantitation,同位素標(biāo)記相對(duì)與絕對(duì)定量)和Western-blot實(shí)驗(yàn)方法檢測ASPN蛋白質(zhì)表達(dá)水平,以及應(yīng)用RT-PCR技術(shù)檢測其mRNA表達(dá)水平。采用SPSS軟件(21.0版本,美國)對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,數(shù)據(jù)資料均采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)方式表示,采用兩樣本的t檢驗(yàn)方法進(jìn)行組間比較分析,采用多元線性回歸方法評(píng)估變量之間的相關(guān)性,P0.05視為統(tǒng)計(jì)學(xué)差異顯著。結(jié)果:1.iTRAQ實(shí)驗(yàn)結(jié)果:ASPN表達(dá)量在髖脫位組較正常組出現(xiàn)上調(diào)(1.10±0.04(髖脫位組)vs.0.93±0.03(正常組),P0.05),統(tǒng)計(jì)學(xué)差異顯著。2.RT-PCR實(shí)驗(yàn)結(jié)果:ASPN在髖脫位組髖臼軟骨組織中mRNA水平上的表達(dá)量較正常組出現(xiàn)上調(diào)(2.69±0.52(髖脫位組)vs.1.00±0.44(正常組),p0.05),統(tǒng)計(jì)學(xué)差異顯著。3.Western-blot實(shí)驗(yàn)結(jié)果:ASPN表達(dá)量在髖脫位組較正常組出現(xiàn)上調(diào)(0.89±0.23(髖脫位組)vs.0.47±0.19(正常組),p0.05),統(tǒng)計(jì)學(xué)差異顯著。4.相關(guān)性分析結(jié)果:ASPN基因的表達(dá)與年齡和性別無明顯相關(guān)性(P=0.44,P=0.06),ASPN蛋白的表達(dá)與年齡和性別無明顯相關(guān)性(P=0.58,P=0.23)。結(jié)論:ASPN表達(dá)量在發(fā)育性髖脫位髖臼軟骨組織中出現(xiàn)上調(diào),ASPN表達(dá)上調(diào)可能與DDH髖臼形態(tài)發(fā)育異常有關(guān),即ASPN的異常表達(dá)可能是DDH致病因素之一。
【學(xué)位授予單位】：中國醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R726.8
【圖文】：

中國醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果iTRAQ 實(shí)驗(yàn)結(jié)果次研究共計(jì)鑒定出 1747 個(gè)蛋白質(zhì)組，對(duì)結(jié)果進(jìn)行 T-test 分析并計(jì)算其指數(shù)（p-Value），P<0.05 表示統(tǒng)計(jì)學(xué)差異顯著，共檢測出具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異質(zhì)組 1062 個(gè)。其中 ASPN 在髖脫位組髖臼軟骨組織中表達(dá)量較正常組上脫位組 vs. 正常組（1.10±0.04vs.0.93±0.03，P<0.05)（見圖 1a 和 b）。

圖 1bASPN 在髖脫位組和正常組中 iTRAQ 檢測結(jié)果RT-PCR 實(shí)驗(yàn)結(jié)果正常組和髖脫位組髖臼軟骨組織中均能檢測出 ASPN 表達(dá)，且 ASPN 在髖髖臼軟骨組織中的表達(dá)較正常組增高，以 2^（-△△CT）值計(jì)算, 髖脫位 正常組（2.69±0.52vs. 1.00±0.44，p<0.05）,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(圖 2)。

圖 1bASPN 在髖脫位組和正常組中 iTRAQ 檢測結(jié)果.2 RT-PCR 實(shí)驗(yàn)結(jié)果在正常組和髖脫位組髖臼軟骨組織中均能檢測出 ASPN 表達(dá)，且 ASPN 在位組髖臼軟骨組織中的表達(dá)較正常組增高，以 2^（-△△CT）值計(jì)算, 髖脫 vs. 正常組（2.69±0.52vs. 1.00±0.44，p<0.05）,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(圖

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 韋宜山;劉萬林;丁良甲;王炳海;白銳;李岱鶴;趙振群;;發(fā)育性髖脫位髖臼軟骨細(xì)胞凋亡的實(shí)驗(yàn)研究[J];臨床小兒外科雜志;2012年04期

本文編號(hào)：2798862