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A型肉毒毒素對皮膚擴張速度及擴張皮瓣成活率影響的初步研究

發(fā)布時間:2020-08-06 07:20
【摘要】:目前皮膚軟組織擴張術(shù)在整形外科領(lǐng)域臨床上已獲廣泛應(yīng)用,其主要通過在皮下置入擴張囊并定期向囊內(nèi)注水使擴張區(qū)域的皮膚在擴張囊的機械壓力下不斷產(chǎn)生與鄰近組織顏色、質(zhì)地等類似的“額外”皮膚用于組織缺損的修復(fù)。但其目前仍然存在諸多不足,如擴張周期長、組織新生慢、擴張過快容易造成皮瓣血運障礙、皮瓣即時回縮率高影響皮瓣修復(fù)效果等,并且擴張皮瓣成活的長寬比極限值有時仍不能滿足修復(fù)要求,如何進行安全、有效、快速的皮膚擴張一直是人們關(guān)注的重點問題,也是當前基礎(chǔ)和臨床重要的研究方向。本文第一部分利用大鼠背部皮膚擴張模型進行皮膚擴張,比較A型肉毒毒素組與對照組擴張速度、擴張過程中皮膚血運、擴張皮瓣即時回縮率的差異,并通過測量擴張皮膚表皮、真皮及包膜厚度,結(jié)合Masson染色、α-SMA免疫組織化學(xué)染色、CD34免疫組織化學(xué)染色結(jié)果等對兩組擴張速度、即時回縮率差異原因及擴張過程中擴張皮膚血運的安全性進行探討,旨在探索安全、有效地加快皮膚擴張的新方法;本文第二部分利用第一部分的方法擴張出的皮膚形成一定長寬比例的擴張皮瓣,觀察記錄術(shù)后每日皮瓣血運情況及術(shù)后7天時皮瓣的成活率,同時結(jié)合皮瓣末端組織的HE染色結(jié)果來探討在A型肉毒毒素干預(yù)下擴張出的皮膚用于創(chuàng)面修復(fù)的安全性和可靠性。第一部分應(yīng)用大鼠背部皮膚擴張模型探索A型肉毒毒素對皮膚擴張速度的影響目的:通過A型肉毒毒素干預(yù)大鼠背部皮膚的擴張過程,觀察A型肉毒毒素對大鼠皮膚擴張速度、血運、即時回縮率及組織學(xué)的影響,總結(jié)A型肉毒毒素對皮膚擴張的作用。方法:將18只SD大鼠隨機分為實驗組及對照組,按擬埋置擴張器大小于大鼠背部文身并于文身區(qū)域皮內(nèi)注射A型肉毒毒素或生理鹽水,然后埋置擴張器,術(shù)后1周開始注水,每周2次,每次注水至囊內(nèi)壓8Kpa,記錄擴張容量、皮膚血運情況并定期測量文身區(qū)域面積,擴張4周后取材測量擴張皮膚回縮率,HE染色觀察表皮、真皮、纖維包膜厚度,Masson染色觀察纖維包膜膠原蛋白沉積情況,α-SMA免疫組織化學(xué)染色評估纖維包膜內(nèi)肌成纖維細胞含量,CD34免疫組織化學(xué)染色觀察擴張皮膚內(nèi)血管直徑及密度,在光學(xué)顯微鏡下觀察并拍照,用Image Pro Plus、Image J軟件進行測量,SPSS 13.0軟件進行統(tǒng)計分析。結(jié)果:自第一次注水至擴張結(jié)束,與對照組比較,A型肉毒毒素組擴張容量、文身區(qū)域面積更大,擴張皮膚血運更好,擴張4周后,A型肉毒毒素組皮膚纖維包膜薄,即時回縮率低,肌成纖維細胞含量少,皮膚血管管徑大、密度高,A型肉毒毒素組纖維包膜內(nèi)膠原纖維較稀疏,排列散亂,對照組纖維包膜內(nèi)膠原纖維排列較為致密、規(guī)則,兩組擴張皮膚表皮及真皮厚度未見顯著差異。結(jié)論:A型肉毒毒素能增加皮膚擴張容量,提高皮膚擴張速度,降低擴張皮膚即時回縮率,這可能與其抑制纖維包膜形成、減少包膜中膠原蛋白的沉積及成纖維細胞向肌成纖維細胞轉(zhuǎn)化有關(guān),A型肉毒毒素對擴張過程中皮膚的血運有保護作用,可能與A型肉毒毒素擴張皮膚內(nèi)血管并促進血管生成有關(guān)。第二部分A型肉毒毒素對擴張的任意皮瓣血運及成活率的影響目的:利用第一部分的方法擴張大鼠背部皮膚后,分別形成一定長度及寬度的皮瓣并轉(zhuǎn)移縫合,觀察兩組皮瓣的血運及成活情況,比較A型肉毒毒素干預(yù)組與對照組擴張皮瓣成活率的差異。方法:解剖大鼠背部皮膚,將皮膚自肌層淺面掀起,觀察大鼠背部皮膚血管分布情況,為擴張后形成任意皮瓣提供解剖支持,按第一部分的方法擴張大鼠背部皮膚,在擴張4周末利用擴張后的皮膚形成一蒂在尾側(cè)的任意皮瓣,每日以組織血流灌注成像評價系統(tǒng)測量皮瓣血運并拍照記錄皮瓣成活情況,利用Image J軟件測量術(shù)后第7天皮瓣成活率,并于術(shù)后第7天取材行HE染色觀察皮瓣末端炎癥細胞浸潤及組織壞死情況。結(jié)果:A型肉毒毒素組自皮瓣轉(zhuǎn)移術(shù)后即刻至術(shù)后7天皮瓣血運均較好于對照組,術(shù)后7天皮瓣成活率較對照組高,HE染色顯示皮瓣主要為表皮壞死,腫脹程度較輕,層次結(jié)構(gòu)較清晰,炎癥細胞浸潤程度輕,對照組皮瓣腫脹明顯,皮膚結(jié)構(gòu)崩解嚴重,層次不清,大量炎癥細胞浸潤。結(jié)論:A型肉毒毒素改善了擴張皮瓣轉(zhuǎn)移術(shù)后的皮瓣血運,提高了皮瓣成活率。
【學(xué)位授予單位】:中國人民解放軍空軍軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2018
【分類號】:R622
【圖文】:

植入物,宿主,異物反應(yīng),對植


圖 1.宿主對植入物的反應(yīng) A,在植入物與宿主體液接觸的一刻異物反應(yīng)即已開始;B,伴隨著細胞碎片和血小板聚集的產(chǎn)生,宿主蛋白在植入物表面出現(xiàn)自發(fā)的吸收;C,血小板因子識別蛋白覆蓋的植入物表面,刺激中性粒細胞巨噬細胞向該處梯度浸潤,這些細胞產(chǎn)生活性氧、酶、細胞因子和趨化因子;C 和 D,隨后的幾天是中性粒細胞對植入?yún)^(qū)的巨噬細胞和未分化單核細胞的募集,此過程與中性粒細胞的退出同時進行;D,巨噬細胞釋放信號分子吸引成纖維細胞與肌成纖維細胞,成纖維細胞及肌成纖維細胞分泌膠原蛋白包裹植入物,且肌成纖維細胞能收縮并對植入物產(chǎn)生壓力。[68]六.A 型肉毒毒素對血管及皮瓣血運的作用血管的舒縮由神經(jīng)因素及體液因素共同調(diào)節(jié),其中神經(jīng)因素占主要地位,且交感縮血管神經(jīng)纖維在血管的神經(jīng)支配中占據(jù)優(yōu)勢地位,甚至在絕大多數(shù)血管中交感縮血管神經(jīng)纖維是唯一的支配神經(jīng),血管平滑肌交感性收縮是由節(jié)后纖維末梢釋放

相鄰點,背部,大鼠,間距


于文身區(qū)域內(nèi)每間隔約2cm設(shè)計一注射點,共計兩排8個點(圖2),將 A 型肉毒毒素以生理鹽水配制稀釋(100u BTX-A+20ml 生理鹽水配制成 5u/ml溶液),再次將大鼠背部消毒后,BTX-A 組每點注射 1u(0.2ml)A 型肉毒毒素,對照組每點注射等量生理鹽水,注射層次均位于皮內(nèi)。圖 2 大鼠背部文身區(qū)域注射點設(shè)計,相鄰點間距 2cm2.3 手術(shù)過程及術(shù)后處理1) 消毒鋪單后,于大鼠項部垂直于脊柱方向設(shè)計約 2cm 擴張器埋置切口,切口深達肌層淺面,在該層次以剝離剪向大鼠尾側(cè)剝離,剝離范圍以文身區(qū)域為界,然后自切口向大鼠頭側(cè)剝離出適當腔隙用以放置內(nèi)置注射壺,剝離完成后,以擰干的生理鹽水紗布填塞腔隙壓迫止血,約 5 分鐘后取出;2) 觀察術(shù)區(qū)無活動性出血后,檢查擴張器有無漏氣、不張等情況,抽出擴張器內(nèi)氣體,將擴張器折疊后置入剝離腔隙,注射壺置于頭側(cè)剝離腔隙內(nèi),于切口部位基底縫合 1 針固定導(dǎo)水管

區(qū)域圖,埋置,箭頭,手術(shù)切口


圖 3 擴張器埋置術(shù)后即刻,紅色箭頭所示為內(nèi)置注射壺,黃色箭頭所示為手術(shù)切口,藍色箭頭所示為擴張囊埋置區(qū)域d 將兩組大鼠取出,腹腔麻醉、脫毛后,室溫下靜置約 15 分鐘,將區(qū)域分為前中后三部分,分別以激光多普勒血流監(jiān)測儀測量文身區(qū)分中央部位皮膚血運情況并記錄,每點重復(fù)測量 5 次,取其平均值血運情況(圖 4a-4c);

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

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本文編號:2782041

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