發(fā)布時(shí)間：2020-08-05 22:15

【摘要】：目的:觀察透射電鏡下脊髓突觸體形態(tài),定性定量檢測(cè)突觸體不同處理?xiàng)l件下的氨基酸遞質(zhì),研究Percoll密度梯度離心法所得大鼠脊髓突觸體的形態(tài)是否完整及其生理活性。方法:將制得的大鼠脊髓突觸體混勻后分為三組,正常溫育組、氯化鉀刺激組、超聲細(xì)胞破碎儀破碎組;使用透射電鏡觀察三組不同處理下脊髓突觸體的形態(tài)學(xué)改變;使用高效液相色譜儀檢測(cè)在正常溫育組、氯化鉀刺激組和超聲細(xì)胞破碎儀組脊髓突觸體懸液上清液中氨基酸的類別和含量。結(jié)果:各組電鏡鼠脊髓突觸體圖像如文中注圖所示,我們得到了形態(tài)完整的大鼠脊髓突觸體;大鼠脊髓突觸體中含有的氨基酸遞質(zhì)有天冬氨酸、甘氨酸、谷氨酸、r-氨基丁酸,雖然在脊髓勻漿離心上清液中檢測(cè)到牛磺酸存在,但是突觸體中并未檢測(cè)到�；撬�;在氯化鉀刺激釋放和正常溫育條件下對(duì)比中,得出天門冬氨酸、谷氨酸釋放量明顯增加(P0.01),有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,甘氨酸、r-氨基丁酸呈現(xiàn)出增加趨勢(shì),但統(tǒng)計(jì)學(xué)無顯著性;另外,在大鼠脊髓突觸體中我們檢測(cè)到有天門冬酰胺的存在,且兩組之間有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;我們使用超聲波細(xì)胞破碎儀破碎突觸體,在同一蛋白濃度下檢測(cè)氨基酸遞質(zhì)明顯低于其他兩組,這一現(xiàn)象仍需進(jìn)一步研究。結(jié)論:大鼠脊髓突觸體中含有的氨基酸遞質(zhì)有天冬氨酸、甘氨酸、谷氨酸、r-氨基丁酸;Percoll密度梯度離心法所得大鼠脊髓突觸體具有生理活性。
【學(xué)位授予單位】：蘭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R651.2
【圖文】：

4.1 透射電鏡觀察各組突觸體形態(tài)學(xué)改變的結(jié)果正常脊髓突觸體的結(jié)構(gòu)如圖 1、2 中，單個(gè)的突觸體包含三個(gè)部分，突觸前較大，內(nèi)含數(shù)個(gè)染色較深的線粒體及大量的染色較淺的空泡狀的突觸囊泡（囊泡中含有神經(jīng)遞質(zhì)）；突觸后較小，內(nèi)不含線粒體等細(xì)胞器，在其與突觸前相對(duì)的部位膜上染色較深，為突觸后的標(biāo)志性特點(diǎn)，在腦突觸體中命名為致密部；兩部中間為突觸間隙的部分，其在正常突觸體上較為明顯清晰。整體的看一個(gè)正常完整的突觸體，似一條大魚欲張口吞入另一條小魚。圖 3、4 為氯化鉀處理組的突觸體電鏡圖，由圖 4 可見突觸體結(jié)構(gòu)完整，突觸前內(nèi)可見較圖 2 中體積略大的突觸囊泡，未見線粒體，但可見一體積更大、形態(tài)規(guī)整的類圓形染色較空泡結(jié)構(gòu)更深的結(jié)構(gòu)；突觸后染色較圖 2 中致密均勻且體積也略有增大，致密部存在；突觸間隙似有消失。整個(gè)突觸體似一個(gè)葫蘆。圖 5、6 為超聲細(xì)胞破碎儀破碎后的脊髓突觸體，圖 6 中整圖中完整的突觸體較少，突觸體膜與圖 2、4 相較連續(xù)完整性不明顯，突觸前中囊泡結(jié)構(gòu)不明顯，亦未見線粒體；突觸后致密部不明顯；似突觸體破裂多發(fā)生在突觸前部。

3氯化鉀處理組突觸體透射電鏡下形態(tài)，比例尺1:20000,1:50000

6超聲細(xì)胞破碎儀處理組突觸體透射電鏡下形態(tài)，比例尺1:20000,1:50000

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2781951