【摘要】：[目的]:運(yùn)用經(jīng)后路全脊椎切除術(shù)(Posterior vertebral column resection,PVCR)建立比格犬L3全脊椎切除脊柱短縮模型。在動(dòng)物模型上應(yīng)用激光多普勒血流監(jiān)測(cè)儀(Laser Dopple Flowmetry,LDF)測(cè)定手術(shù)操作過(guò)程中暴露段脊髓血流(Spinal cord blood flow,SCBF)流量變化�；诓煌潭裙�(jié)段血管結(jié)扎、不同程度脊髓短縮實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分別應(yīng)用放免法測(cè)定暴露段脊髓組織內(nèi)一氧化氮(Nitric Oxide,NO)、內(nèi)皮素-1(Endothelin-1,ET-1)含量,應(yīng)用免疫組化法評(píng)價(jià)暴露段脊髓組織內(nèi)血紅素氧合酶-1(Heme Oxygenase-1,HO-1)表達(dá)變化。初步對(duì)結(jié)扎節(jié)段血管及脊髓短縮的安全范圍及不同手術(shù)操作對(duì)脊髓血流的影響進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究,為臨床工作中行PVCR術(shù)提供一定的參考。[方法]:選用由昆明醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物科提供的比格犬(平均體重:10.36kg)作為試驗(yàn)動(dòng)物。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中共有2只實(shí)驗(yàn)用比格犬造模失敗(1例麻醉意外死亡,1例術(shù)中出血過(guò)量死亡),均予以剔除,剔除動(dòng)物均補(bǔ)齊,最終完成實(shí)驗(yàn)的動(dòng)物犬為48例。將48只健康比格犬(編號(hào)1-48號(hào))按結(jié)扎節(jié)段血管對(duì)數(shù)隨機(jī)分為A、B、C、D、E、F、G、H八組,每組各6只比格犬(分別記錄各實(shí)驗(yàn)犬體重、體長(zhǎng)、體溫、術(shù)前血壓、術(shù)前心率、手術(shù)時(shí)間、失血量、尿量、補(bǔ)液量)。A組為L(zhǎng)3雙側(cè)O×O節(jié)段血管結(jié)扎(結(jié)扎O×O對(duì))(假手術(shù)組),B組為L(zhǎng)3雙側(cè)節(jié)段血管結(jié)扎(結(jié)扎1×1對(duì)),C組為L(zhǎng)2/L3雙側(cè)節(jié)段血管結(jié)扎(結(jié)扎2×2對(duì)),D組為L(zhǎng)2/L3/L4雙側(cè)節(jié)段血管結(jié)扎(結(jié)扎3×3對(duì)),E組為一側(cè)L2/L3節(jié)段血管及對(duì)側(cè)L1/L2/L3/L4節(jié)段血管結(jié)扎(結(jié)扎2×4對(duì))(L2/L3節(jié)段血管結(jié)扎側(cè)測(cè)量),F組為一側(cè)L2/L3節(jié)段血管及對(duì)側(cè)L1/L2/L3/L4節(jié)段血管結(jié)扎(結(jié)扎4×2對(duì))(L1/L2/L3/L4節(jié)段血管結(jié)扎側(cè)測(cè)量),G組為L(zhǎng)1/L2/L3/L4雙側(cè)節(jié)段血管結(jié)扎(結(jié)扎4×4對(duì)),H組為L(zhǎng)1/L2/L3/L4/L5雙側(cè)節(jié)段血管結(jié)扎(結(jié)扎5×5對(duì))。隨后將各組在結(jié)扎節(jié)段血管的基礎(chǔ)上按照不同脊髓短縮程度將6只試驗(yàn)動(dòng)物隨機(jī)分為脊髓無(wú)短縮組(依次為A0、B0、C0、D0、E0、F0、G0、H0)、脊髓短縮1/3組(依次為A1、B1、C1、D1、E1、F1、G1、H1)和脊髓短縮2/3組(依次為A2、B2、C2、D2、E2、F2、G2、H2)。每亞組各2只比格犬。脊髓短縮的程度分別為椎體切除后形成的間隙的1/3和2/3,此間隙高度應(yīng)為L(zhǎng)3椎體高度加其上下椎間盤(pán)厚度。麻醉誘導(dǎo)后,氣管插管,待動(dòng)物麻醉后進(jìn)行全程體感誘發(fā)電位(Somatosensory evoked potential,SEP)監(jiān)測(cè)。采用經(jīng)后路顯露 L1-L5 脊椎后方結(jié)構(gòu),切除L3椎板,暴露L3脊髓背側(cè)并用激光多普勒血流儀測(cè)量脊髓血流PU值(激光多普勒血流儀探頭取暴露的脊髓后正中線的中點(diǎn)偏外2-3mm處測(cè)量脊髓血流的相對(duì)值。測(cè)量應(yīng)盡量取相同位置,并避開(kāi)肉眼可見(jiàn)脊髓內(nèi)粗大血管支)。按分組計(jì)劃分別以L3椎體為中心暴露并結(jié)扎L3椎體鄰近0對(duì)、1對(duì)、2對(duì)、3對(duì)、2×4對(duì)、4×2對(duì)、4對(duì)、5對(duì)節(jié)段血管,結(jié)扎完成后用激光多普勒血流儀測(cè)量脊髓血流PU值(測(cè)量方法同前)。應(yīng)用雙極電凝阻斷L3后方硬脊膜外血管并用激光多普勒血流儀測(cè)量脊髓血流PU值。行L3全脊椎切除后用激光多普勒血流儀測(cè)量脊髓血流PU值(注意:應(yīng)分別在每個(gè)實(shí)驗(yàn)步驟結(jié)束的Omin、5min、30min重復(fù)三次記錄脊髓血流PU值并取平均值)。繼續(xù)分別記錄A0-H2組在脊髓短縮操作后的脊髓血流PU值,并分別在5min、30min后重復(fù)測(cè)量(注意每一步操作完進(jìn)行脊髓血流監(jiān)測(cè)時(shí),同時(shí)對(duì)實(shí)驗(yàn)犬進(jìn)行SEP監(jiān)測(cè),設(shè)置波峰延遲大于等于10%,且波幅降低大于等于50%為警戒值,此時(shí)我們認(rèn)為實(shí)驗(yàn)犬脊髓功能受到損害)。將每個(gè)亞組中實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行脊髓灌注并取材固定,分別應(yīng)用放免法測(cè)定一氧化氮(NO)、內(nèi)皮素-1(ET-1)含量,免疫組化法評(píng)價(jià)血紅素氧合酶-1(HO-1)表達(dá)變化。[結(jié)果]:1.A、B、C、D、E、F、G、H八組間對(duì)比實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體重、體長(zhǎng)、體溫、手術(shù)時(shí)間、補(bǔ)液量、尿量、失血量、術(shù)前血壓、術(shù)前心率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。2.八組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物間椎板切除后脊髓血流PU值差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),神經(jīng)肌電監(jiān)測(cè)結(jié)果均未達(dá)警戒值;結(jié)扎0x0對(duì)、1x1對(duì)、2x2對(duì)、3x3對(duì)、2x4對(duì)(結(jié)扎2根側(cè)測(cè)量)節(jié)段血管各組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物脊髓血流均較椎板切除后脊髓血流稍降低,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),并且各組間血流信號(hào)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),神經(jīng)肌電監(jiān)測(cè)結(jié)果未達(dá)警戒值;但結(jié)扎2x4對(duì)(結(jié)扎4根側(cè)測(cè)量)、4x4對(duì)、5x5對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物脊髓血流較椎板切除后顯著降低(P0.01),神經(jīng)肌電監(jiān)測(cè)結(jié)果達(dá)警戒值,提示脊髓功能受到顯著損害。3.硬膜外血管阻斷后各組脊髓血流均較節(jié)段血管結(jié)扎后脊髓血流稍降,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。各組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物神經(jīng)肌電監(jiān)測(cè)提示結(jié)果同椎板切除后結(jié)果。4.腰3全脊椎切除后各組脊髓血流均較硬膜外血管阻斷后稍有回升,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。各組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物神經(jīng)肌電監(jiān)測(cè)提示結(jié)果同硬膜外血管阻斷后結(jié)果。5.當(dāng)對(duì)脊髓進(jìn)行1/3或2/3的短縮后,可觀察到短縮1/3的亞組脊髓血流較脊髓無(wú)短縮組的脊髓血流PU值稍有回升,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);且隨著短縮時(shí)間的持續(xù)各亞組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物神經(jīng)肌電監(jiān)測(cè)結(jié)果提示結(jié)果同前;而短縮2/3的亞組的脊髓血流PU值則較脊髓無(wú)短縮組和脊髓短縮1/3組顯著減少,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01),且短縮2/3亞組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物神經(jīng)肌電監(jiān)測(cè)結(jié)果均達(dá)警戒值,提示脊髓功能受到損害。6.八組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物隨著結(jié)扎節(jié)段血管的增多,脊髓組織內(nèi)NO含量、ET-1含量和HO-1表達(dá)隨之增加。尤其當(dāng)結(jié)扎節(jié)段血管大于3對(duì)時(shí)增加尤為明顯(P0.05)。7.八組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中脊髓短縮1/3亞組較脊髓無(wú)短縮亞組脊髓組織內(nèi)NO含量、ET-1含量和HO-1表達(dá)稍有增加,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。然而,八組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中脊髓短縮2/3亞組較脊髓無(wú)短縮亞組和脊髓短縮1/3亞組脊髓組織內(nèi)NO含量、ET-1含量和HO-1表達(dá)顯著增加,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。[結(jié)論]:1.在構(gòu)建比格犬L3全脊椎切除并脊髓短縮模型時(shí),結(jié)扎節(jié)段血管會(huì)影響脊髓血流。當(dāng)結(jié)扎節(jié)段血管"f3對(duì)時(shí),脊髓的血供會(huì)有輕度減低,脊髓血流可代償;結(jié)扎3對(duì)節(jié)段動(dòng)脈時(shí),脊髓供血顯著減少,脊髓血流失代償。2.阻斷硬脊膜外血管網(wǎng)會(huì)影響到脊髓血流。在結(jié)扎"f3對(duì)節(jié)段血管犬模型中,阻斷硬脊膜表面血管網(wǎng)將會(huì)進(jìn)一步減少脊髓血供,但脊髓血流降低仍在脊髓可耐受范圍內(nèi)。3.犬L3全脊椎切除脊髓環(huán)周減壓后脊髓血流有所增加。在結(jié)扎"f 3對(duì)節(jié)段血管犬模型中,L3全脊椎切除脊髓環(huán)周減壓將一定程度增加脊髓血供,提高脊髓對(duì)缺血的耐受性,降低脊髓損傷的可能性。但結(jié)扎3對(duì)節(jié)段血管實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,即便行L3全脊椎切除脊髓環(huán)周減壓,脊髓缺血程度仍未得到顯著恢復(fù),脊髓發(fā)生缺血性損傷的可能大大增加。4.犬L3全脊椎切除并對(duì)切除椎體后所形成間隙(L3椎體高度加其上下椎間盤(pán)厚度)進(jìn)行短縮時(shí),脊髓短縮"f1/3時(shí),脊髓血流稍有增加,可增加脊髓對(duì)缺血的耐受性,降低脊髓損傷程度;不適當(dāng)?shù)亩炭s"g2/3時(shí),脊髓血流量明顯降低,脊髓損傷加重。5.隨著結(jié)扎節(jié)段血管的增多,暴露段脊髓組織內(nèi)參與脊髓損傷調(diào)控的相關(guān)因子(NO含量、ET-1含量和HO-1表達(dá))隨之增加,尤其當(dāng)結(jié)扎節(jié)段血管大于3對(duì)時(shí)增加尤為顯著,脊髓因缺血缺氧所致?lián)p傷程度顯著加重。6.適當(dāng)?shù)募顾瓒炭s("f1/3),暴露段脊髓組織內(nèi)參與脊髓損傷調(diào)控的相關(guān)因子(NO含量、ET-1含量和HO-1表達(dá))輕度增加,脊髓損傷程度未有明顯加重;然而過(guò)多的脊髓短縮時(shí)("g2/3),暴露段脊髓組織內(nèi)參與脊髓損傷調(diào)控的相關(guān)因子(NO含量、ET-1含量和HO-1表達(dá))顯著增加,脊髓損傷程度顯著加重。
【學(xué)位授予單位】：昆明醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類(lèi)號(hào)】：R651.2
【圖文】：

扎４根側(cè)測(cè)量）（Ｆ組）、４ｘ４對(duì)（Ｇ組）、５ｘ５對(duì)（Ｈ組）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物脊髓血流逡逑較椎板切除后顯著降低（Ｐ＜0．0ｌ），神經(jīng)肌電監(jiān)測(cè)結(jié)果均達(dá)警戒值，提示脊髓功逡逑能受到顯著損害；【見(jiàn)表四、圖２．２】逡逑表四：節(jié)段血管結(jié)扎后脊毮白質(zhì)血流ＰＵ值（）逡逑Ａ組邐Ｂ組邐ｃｍ邐Ｄ組邐ＥＳＩ邐Ｆ組邐Ｇ組逡逑（ｎ＝６）邐（ｎ＝６）邐（ｎ＝６）邐（ｎ＝６）邐（ｎ＝６）邐（ｎ＝６）邐（ｎ＝６）邐（ｎ＝６）逡逑２９５．５８邐２８７．７３邐２８９．７

２．３硬膜外血管阻斷后對(duì)Ａ－Ｈ各組行脊髓血流監(jiān)測(cè)，結(jié)果如下：逡逑硬膜外血管阻斷后脊髓血流均較節(jié)段血管結(jié)扎后脊髓血流稍降，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意逡逑義（Ｐ＞０．０５）。各組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物神經(jīng)肌電監(jiān)測(cè)提示結(jié)果同前�！疽�(jiàn)表五、圖２．３】逡逑表五：硬膜外血管阻斷后脊髓白質(zhì)血流ＰＵ值逡逑Ａ組邐Ｂ組邐Ｃ組邐Ｄ組邐Ｅ組邐Ｆ組邐Ｇ組邐Ｈ組逡逑（ｎ＝６）邐（ｎ＝６）邐（ｎ＝６）邐（ｎ＝６）邐（ｎ＝６）邐（ｎ＝６）邐（ｎ＝６）邐（ｎ＝６）逡逑２７９．８８邐２５３．６１邐２５２．７６邐２４５．９４邐２５０．６６邐１４８．８邐８９．２邐７４．８９逡逑＾邋Ｕ，Ｌ＜Ｉ；邋±１９．０８邋土邋１１．２６邋土９．３５邋士邋１．３７邋±１５．５１邋±１８．邋１５邋士邋１３．６１邋士邋１０．４７逡逑硬膜外血管阻逡逑２６５．５７邋２３８．９＋邋２２９．邋９士邋２２６．邋７６士邋２３７．邋５７士邋１１１．０８士邋７５．邋８７士邋７３．邋８５土逡逑斷后（ＰＬ１值）逡逑±９．１９邐２１．０６邐１９．邋１１邐１１．３６邐１８．４１邐８．１５邐９．６１邐１０．７７逡逑Ｐ邐Ｐ＞０．０５邐Ｐ＞０．０５邐Ｐ＞０．０５邐Ｐ＞０．０５邐Ｐ＞０．０５邐Ｐ＞０．０５邐Ｐ＞０．０５邐Ｐ＞０．０５逡逑硬脊膜外血管阻斷后ＰＵ值逡逑Ｅ邋ＩＩＩ邋ＩＩＩ邋ＩＩＩ邋ＩＩＩ邋ＩＩＩ邋Ｉｎ邋Ｌ邋Ｌ逡逑＇９０邐＾邐＾邐彳．．Ｓ邋《逡逑，ｖｖｖ＇，／Ｖ＋Ｖ逡逑圖２．３：硬膜外血管阻斷后脊髓白質(zhì)血流趨勢(shì)圖逡逑２６逡逑

＃邋＃逡逑■椎板打開(kāi)后ＰＵ值■節(jié)段血管結(jié)扎后ＰＵ值逡逑圖２．２：節(jié)段血管結(jié)扎后脊髓白質(zhì)血流趨勢(shì)圖逡逑２．３硬膜外血管阻斷后對(duì)Ａ－Ｈ各組行脊髓血流監(jiān)測(cè)，結(jié)果如下：逡逑硬膜外血管阻斷后脊髓血流均較節(jié)段血管結(jié)扎后脊髓血流稍降，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意逡逑義（Ｐ＞０．０５）。各組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物神經(jīng)肌電監(jiān)測(cè)提示結(jié)果同前。【見(jiàn)表五、圖２．３】逡逑表五：硬膜外血管阻斷后脊髓白質(zhì)血流ＰＵ值逡逑Ａ組邐Ｂ組邐Ｃ組邐Ｄ組邐Ｅ組邐Ｆ組邐Ｇ組邐Ｈ組逡逑（ｎ＝６）邐（ｎ＝６）邐（ｎ＝６）邐（ｎ＝６）邐（ｎ＝６）邐（ｎ＝６）邐（ｎ＝６）邐（ｎ＝６）逡逑２７９．８８邐２５３．６１邐２５２．７６邐２４５．９４邐２５０．６６邐１４８．８邐８９．２邐７４．８９逡逑＾邋Ｕ，Ｌ＜Ｉ；邋±１９．０８邋土邋１１．２６邋土９．３５邋士邋１．３７邋±１５．５１邋±１８．邋１５邋士邋１３．６１邋士邋１０．４７逡逑硬膜外血管阻逡逑２６５．５７邋２３８．９＋邋２２９．邋９士邋２２６．邋７６士邋２３７．邋５７士邋１１１．０８士邋７５．邋８７士邋７３．邋８５土逡逑斷后（ＰＬ１值）逡逑±９．１９邐２１．０６邐１９．邋１１邐１１．３６邐１８．４１邐８．１５邐９．６１邐１０．７７逡逑Ｐ邐Ｐ＞０．０５邐Ｐ＞０．０５邐Ｐ＞０．０５邐Ｐ＞０．０５邐Ｐ＞０．０５邐Ｐ＞０．０５邐Ｐ＞０．０５邐Ｐ＞０．０５逡逑硬脊膜外血管阻斷后ＰＵ值逡逑Ｅ邋ＩＩＩ邋ＩＩＩ邋ＩＩＩ邋ＩＩＩ邋ＩＩＩ邋Ｉｎ邋Ｌ邋Ｌ逡逑＇９０邐＾邐＾邐彳．．Ｓ邋《逡逑，ｖｖｖ＇，／Ｖ＋Ｖ逡逑圖２．３：硬膜外血管阻斷后脊髓白質(zhì)血流趨勢(shì)圖逡逑２６逡逑

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2774843