【摘要】：背景和目的：部分肝切除是多種良惡性肝臟疾病的唯一治愈手段。但由于預(yù)留肝體積不足,很多患者無(wú)法耐受治愈性切除術(shù)。為了獲得可切除性,門(mén)脈結(jié)扎術(shù)(Portal vein ligation, PVL)早已被作為臨床應(yīng)對(duì)預(yù)留肝體積不足的常規(guī)手段。門(mén)脈結(jié)扎可以誘導(dǎo)結(jié)扎肝葉萎縮,未結(jié)扎肝臟增生肥大,故稱(chēng)為“增生萎縮復(fù)合征”,待增生肝臟達(dá)到肝切除安全限量后分期行二次肝切除術(shù)。然而,門(mén)脈結(jié)扎術(shù)后二次肝切除等候期較長(zhǎng),且部分患者增生反應(yīng)不良。目前臨床尚需要一種更高效的干預(yù)手段。近期研究表明,膽汁酸鹽既可通過(guò)活化FXR相關(guān)信號(hào)通路促進(jìn)或啟動(dòng)肝細(xì)胞增殖,同時(shí)具肝細(xì)胞毒性可以誘導(dǎo)和促進(jìn)肝細(xì)胞凋亡。體外實(shí)驗(yàn)證實(shí)膽汁酸鹽可以促進(jìn)肝細(xì)胞極化和膽小管網(wǎng)的建立和維持。據(jù)此我們假設(shè),將門(mén)脈結(jié)扎與膽管結(jié)扎相結(jié)合,可以加重肝臟膽汁酸鹽過(guò)載,促進(jìn)肝臟增生萎縮復(fù)合征,加速預(yù)留肝臟膽小管網(wǎng)重構(gòu),進(jìn)而提高預(yù)留肝臟的擴(kuò)大肝切除耐受性。方法：我們建立了90%門(mén)脈結(jié)扎和90%門(mén)脈膽管雙結(jié)扎模型(bile duct and portal vein double ligation, BPL)模型,以假手術(shù)組為對(duì)照。術(shù)后肝臟重量、血清學(xué)指標(biāo),western blot,實(shí)時(shí)定量PCR, HE染色,免疫染色等方法用于觀測(cè)增生萎縮復(fù)合征和膽小管網(wǎng)重構(gòu)過(guò)程。我們選擇假手術(shù)/BPL/PVL術(shù)后3天作為早期二次手術(shù)時(shí)間點(diǎn),術(shù)后5天作為晚期二次手術(shù)時(shí)間點(diǎn)。BPL/PVL術(shù)后的二次手術(shù)為僅保留后尾狀葉的肝切除,假手術(shù)后90%肝切除和95%肝切除被作為對(duì)照。我們檢測(cè)了術(shù)后生存率及二次手術(shù)后再生反應(yīng)。為了進(jìn)一步明確相關(guān)效應(yīng)的機(jī)制,我們通過(guò)喂食BPL大鼠含2%考來(lái)烯胺的鼠糧以降低膽汁淤滯,或喂食PVL大鼠0.2%�；悄懰岬氖蠹Z以提高肝內(nèi)膽汁酸鹽濃度以明確上述效應(yīng)是否有膽汁酸鹽淤滯引起。結(jié)果：我們發(fā)現(xiàn)BPL耐受性良好,且可顯著加速增生萎縮復(fù)合征。BPL組大鼠預(yù)留肝臟的肝重從術(shù)后第4天起顯著高于PVL組。較高的膽汁酸鹽淤滯促進(jìn)了增生側(cè)肝臟FXR相關(guān)信號(hào)通路的活化、加速了肝細(xì)胞再生,同時(shí)促進(jìn)了萎縮側(cè)肝臟Caspase-3-介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡。上調(diào)PVL組大鼠膽汁酸鹽可以誘導(dǎo)類(lèi)似效應(yīng),而下調(diào)BPL大鼠膽汁酸鹽可以抵消上述效應(yīng)。BPL術(shù)后5天行二次手術(shù)生存率為93.3%,PVL術(shù)后5天行二次手術(shù)為56.7%,假手術(shù)后5天行二次95%肝切除為0%,假手術(shù)后5天行二次90%肝切除為26.7%。BPL術(shù)后5天時(shí),大鼠預(yù)留肝體積顯著高于其他各組,肝切除術(shù)后再生反應(yīng)良好,可能是其生存率較高的主要原因。同時(shí),我們也發(fā)現(xiàn),相比PVL,BPL可以加速活化MEK-AMPK-LKB1信號(hào)通路而促進(jìn)肝細(xì)胞極化,膽小管網(wǎng)重構(gòu)速度至少快于PVL組一天。上調(diào)PVL組大鼠膽汁酸鹽可以誘導(dǎo)類(lèi)似效應(yīng),而下調(diào)BPL大鼠膽汁酸鹽可以抵消上述效應(yīng)。BPL術(shù)后3天行二次手術(shù)生存率為86.7%,PVL術(shù)后3天行二次手術(shù)為47.0%,假手術(shù)后3天行二次90%肝切除為23.3%。BPL術(shù)后3天預(yù)留肝臟肝細(xì)胞復(fù)極化程度高,信號(hào)通路活化,膽小管完整性好,二次手術(shù)后肝細(xì)胞極化迅速和膽小管網(wǎng)紊亂短暫,可能與較高的生存率有關(guān)。上調(diào)PVL組大鼠膽汁酸鹽可以顯著提高二次手術(shù)生存率,而下調(diào)BPL大鼠膽汁酸鹽可以顯著降低二次手術(shù)生存率。結(jié)論：BPL可以促進(jìn)增生萎縮復(fù)合征,加速肝細(xì)胞極化和膽小管網(wǎng)重構(gòu)。BPL術(shù)后,增生肝臟對(duì)早期、晚期二次手術(shù)切除耐受均顯著提高。BPL是一個(gè)安全有效的臨床路徑,其促進(jìn)肝臟增生、萎縮,和膽小管重建的效應(yīng)為膽汁酸鹽依賴(lài)性效應(yīng)。
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)人民解放軍醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類(lèi)號(hào)】：R657.3

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 ;Insulin promotes sinusoidal endothelial cell proliferation mediated by upregulation of vascular endothelial growth factor in regenerating rat liver after partial hepatectomy[J];World Journal of Gastroenterology;2005年38期

本文編號(hào)：2773751