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糖皮質(zhì)激素引起的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激與內(nèi)皮細胞凋亡

發(fā)布時間:2020-07-17 20:19
【摘要】:為了了研究內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激是否是糖皮質(zhì)激素引起內(nèi)皮細胞凋亡因素,其引起股骨頭壞死的致病機制,同時為了研究對糖皮質(zhì)激素引起的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激進行特異性阻斷是否是對預防糖皮質(zhì)激素引起的內(nèi)皮細胞凋亡和股骨頭壞死可以有效預防而進行的此次研究。明確糖皮質(zhì)激素引起的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激是否對在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激中引起自噬,明確若引起自噬,自噬與細胞凋亡和增殖的相互關(guān)系。內(nèi)皮細胞凋亡隨激素刺激時間增加而增加,隨激素給與濃度增加而增加。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)蛋白在激素刺激后增加,隨刺激時間增加而增加,隨刺激濃度增加而增加。PERK抑制劑GSK2656157可有效減少激素引起的內(nèi)皮細胞凋亡。體內(nèi)動物實驗表明,糖皮質(zhì)激素在短時間激素刺激后可引起內(nèi)皮細胞凋亡,而在激素型股骨頭壞死模型中,PERK抑制劑GSK2656157保護了骨內(nèi)微血管,預防了股骨頭壞死的發(fā)生。首次證明了糖皮質(zhì)激素引起的內(nèi)皮細胞自噬,且肌醇需要酶-1α(IRE1α)-剪切的X盒結(jié)合蛋白1(XBP-1S)通路在其中扮演的重要作用,通過過表達剪切的X盒結(jié)合蛋白1(XBP-1S)可以有效的抑制蛋白激酶R樣內(nèi)質(zhì)網(wǎng)激酶(PERK)誘導的內(nèi)皮細胞凋亡。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激與激素引起的內(nèi)皮細胞凋亡密切相關(guān),與激素型股骨頭壞死的發(fā)生密切相關(guān),PERK信號通路參與了激素型骨壞死的發(fā)生,而對蛋白激酶R樣內(nèi)質(zhì)網(wǎng)激酶(PERK)的抑制可有效預防股骨頭壞死的發(fā)生,而肌醇需要酶-1α(IRE1α)-剪切的X盒結(jié)合蛋白1(XBP-1S)信號通路不僅可以引起細胞自噬,而且通過引起自噬,部分抑制了糖皮質(zhì)激素引起的凋亡,對內(nèi)皮細胞起到了凋亡保護的作用。
【學位授予單位】:上海交通大學
【學位級別】:博士
【學位授予年份】:2018
【分類號】:R681.8
【圖文】:

散點圖,地塞米松,凋亡,細胞


上海交通大學博士學位論文第三章 實驗結(jié)果.1 地塞米松對內(nèi)皮細胞的致凋亡作用我們針對不同的細胞,包括骨髓間充質(zhì)干細胞,成骨細胞系 MC3T3,和內(nèi)皮細胞A.hy926 給與了相同條件的地塞米松刺激,即 10uM 刺激 48 小時,膜聯(lián)蛋白 V/碘化丙錠流式細胞分析表達了面對相同條件的激素刺激,不同細胞系表現(xiàn)出了不同程度的凋亡,左側(cè)的散點圖被分為四個象限,右上代表晚期凋亡的細胞和壞死的細胞,右下代表早亡的細胞而左下代表著正常的細胞,結(jié)果顯示,面對地塞米松的持續(xù)刺激,內(nèi)皮細胞表更強烈的凋亡傾向,而骨髓間充質(zhì)干細胞和成骨細胞,相較內(nèi)皮細胞而言,對激素的刺不敏感。

地塞米松,凋亡,內(nèi)皮細胞凋亡


圖 2 不同濃度的地塞米松對內(nèi)皮細胞的凋亡的比較。The apoptotic effects of DEX in different concentration使用 Annexin V/PI 染色后,對內(nèi)皮細胞進行了流式細胞檢測,發(fā)現(xiàn)面對不同濃度的地塞米松刺激后, 內(nèi)皮細胞凋亡的程度隨地塞米松濃度增加而增加。同樣的,我們在給與 10uM 濃度地塞米松刺激條件下,給與內(nèi)皮細胞不同時間的地塞米松刺激分別是 12 小時,24 小時,36 小時和 48 小時。膜聯(lián)蛋白 V/碘化丙錠雙染流式細胞分析表達了面對不同地塞米松刺激時間的后的內(nèi)皮細胞凋亡情況,圖 2 中,根據(jù)左側(cè)數(shù)據(jù)統(tǒng)計得出的右側(cè)的直方圖顯示,不同時間的地塞米松刺激,引起了不同程度的內(nèi)皮細胞凋亡,地塞米松刺激時間越長,內(nèi)皮細胞凋亡越多,即內(nèi)皮細胞凋亡的程度隨地塞米松刺激時間增加而增加。

地塞米松,內(nèi)皮細胞凋亡,凋亡


圖 2 不同濃度的地塞米松對內(nèi)皮細胞的凋亡的比較。The apoptotic effects of DEX in different concentration使用 Annexin V/PI 染色后,對內(nèi)皮細胞進行了流式細胞檢測,發(fā)現(xiàn)面對不同濃度的地塞米松刺激后, 內(nèi)皮細胞凋亡的程度隨地塞米松濃度增加而增加。同樣的,我們在給與 10uM 濃度地塞米松刺激條件下,給與內(nèi)皮細胞不同時間的地塞米松刺激分別是 12 小時,24 小時,36 小時和 48 小時。膜聯(lián)蛋白 V/碘化丙錠雙染流式細胞分析表達了面對不同地塞米松刺激時間的后的內(nèi)皮細胞凋亡情況,圖 2 中,根據(jù)左側(cè)數(shù)據(jù)統(tǒng)計得出的右側(cè)的直方圖顯示,不同時間的地塞米松刺激,引起了不同程度的內(nèi)皮細胞凋亡,地塞米松刺激時間越長,內(nèi)皮細胞凋亡越多,即內(nèi)皮細胞凋亡的程度隨地塞米松刺激時間增加而增加。

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5 程軼U

本文編號:2759892


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