【摘要】：研究背景和目的EPSH蛋白是新發(fā)現(xiàn)的一類膜內(nèi)吞轉(zhuǎn)運(yùn)調(diào)控蛋白,在其N端含有G-domain,里面包含了一個(gè)ATP酶結(jié)構(gòu)域,可與ATP結(jié)合釋放能量;在其C端含有EH-domain,是其工作的主要場(chǎng)所,可以參與多種細(xì)胞膜蛋白的內(nèi)吞轉(zhuǎn)運(yùn)調(diào)控。EPSH作為EH蛋白家族的一員,除了在細(xì)胞膜參與膜蛋白內(nèi)吞轉(zhuǎn)運(yùn)調(diào)控外,還具有核質(zhì)穿梭、轉(zhuǎn)錄調(diào)控的功能。而乳腺癌是女性最常見的惡性腫瘤,目前已經(jīng)發(fā)展成為世界上女性發(fā)病率最高的惡性腫瘤,嚴(yán)重的威脅著女性健康。在我國(guó),乳腺癌發(fā)病率不斷上升,發(fā)病年齡也更加年輕化。目前乳腺癌手術(shù)、放化療、內(nèi)分泌治療以及靶向治療是治療乳腺癌行之有效的方法,但乳腺癌的異質(zhì)性很高,不少乳腺癌患者在治療過(guò)程中會(huì)出現(xiàn)耐藥,尤其是在三陰性乳腺癌中,缺乏有效的內(nèi)分泌和靶向藥物的治療。因此尋找乳腺癌中切實(shí)有效的治療靶點(diǎn),仍然是目前研究的難點(diǎn)。而EPSH作為重要的膜轉(zhuǎn)運(yùn)調(diào)控蛋白,其在乳腺癌中的作用還不完全明確,本課題將主要研究EPSH在乳腺癌細(xì)胞增殖、遷移侵襲、腫瘤干性等方面的作用,并探討其對(duì)乳腺癌患者生存預(yù)后的影響。研究方法:1.通過(guò)Western Blot驗(yàn)證內(nèi)源性EPSH、EGFR、E-Cad在多種乳腺癌細(xì)胞中的表達(dá)情況。2.構(gòu)建EPSH不同膜功能突變體的慢病毒表達(dá)質(zhì)粒,感染HCC-1806、BT-549細(xì)胞。3.通過(guò)克隆形成、高內(nèi)涵實(shí)時(shí)遷移及Transwell實(shí)驗(yàn),探討EPSH不同膜功能突變體對(duì)乳腺癌細(xì)胞增殖及遷移運(yùn)動(dòng)能力影響。4.進(jìn)行干細(xì)胞微球培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)來(lái)探討EPSH不同膜功能突變體對(duì)乳腺癌干細(xì)胞微球形成能力的影響。5.裸鼠體內(nèi)成瘤實(shí)驗(yàn),檢測(cè)EPSH不同膜功能突變體對(duì)HCC-1806細(xì)胞在裸鼠體內(nèi)成瘤能力的影響。6.Western Blot檢測(cè)EPSH蛋白在乳腺癌組織及癌旁乳腺組織中的表達(dá)情況,比較其表達(dá)水平的差異。7.免疫組化檢測(cè)EPSH蛋白在乳腺癌組織及癌旁組織中的表達(dá)定位的情況。8.分析EPSH核表達(dá)、漿膜表達(dá)情況與乳腺癌臨床病理參數(shù)的關(guān)系,并進(jìn)一步分析EPSH與乳腺癌患者生存預(yù)后的關(guān)系,明確EPSH對(duì)乳腺癌患者無(wú)病生存期及總生存期的影響。結(jié)果:1.Western Blot對(duì)乳腺癌細(xì)胞系進(jìn)行檢測(cè)發(fā)現(xiàn),在非三陰性乳腺癌細(xì)胞系中EPSH幾乎無(wú)表達(dá),在三陰性乳腺癌細(xì)胞系BT-549、HCC-1806中呈中等表達(dá)。2.構(gòu)建EPSH不同膜功能突變體細(xì)胞系,結(jié)果表明EPSH不同膜功能突變體可以影響乳腺癌細(xì)胞的增殖,遷移,侵襲能力以及干性表型。3.動(dòng)物實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證EPSH不同膜功能突變體可以影響細(xì)胞的裸鼠成瘤能力。4.Western Blot檢測(cè)發(fā)現(xiàn),相比正常乳腺組織,EPSH在乳腺癌組織中表達(dá)降低。5.免疫組化結(jié)果發(fā)現(xiàn),EPSH在正常乳腺組織中呈現(xiàn)核高表達(dá)、漿膜低表達(dá)現(xiàn)象,在乳腺癌組織中呈現(xiàn)核表達(dá)降低、漿膜表達(dá)升高的異位表達(dá)現(xiàn)象,且在三陰性乳腺癌中此現(xiàn)象更顯著。6.生存分析顯示,EPSH核高表達(dá)組5年DFS和OS均優(yōu)于核低表達(dá)組(P=0.009,P=0.036),漿膜低表達(dá)組5年DFS優(yōu)于漿膜高表達(dá)組(P=0.039)。結(jié)論:1.膜表達(dá)的EPSH可以影響乳腺腫瘤細(xì)胞增殖、侵襲遷移、干性形成和裸鼠體內(nèi)成瘤能力。2.與正常乳腺組織相比,EPSH在乳腺癌組織中表達(dá)降低,并且出現(xiàn)核表達(dá)減少、漿膜表達(dá)增加的“異位”表達(dá)現(xiàn)象;EPSH異位表達(dá)影響乳腺癌患者的復(fù)發(fā)生存。
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R737.9
【圖文】：

各細(xì)胞系中EPSH、E-Cad、EGFR表達(dá)水平

HCC-1806、BT-549細(xì)胞系中EPSH-HA表達(dá)水平

HCC-1806細(xì)胞中EPSH不同膜功能突變體對(duì)細(xì)胞增殖的影響（*P<0.05，**P<0.01）

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5 朱蕓 中國(guó)青年報(bào)·中國(guó)青年網(wǎng)記者 胡春艷;精準(zhǔn)治療“加減法”提高乳腺癌患者生存質(zhì)量[N];中國(guó)青年報(bào);2019年

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7 記者 陳青 通訊員 王懿輝 陳力;推動(dòng)乳腺癌“精準(zhǔn)診療”實(shí)施[N];文匯報(bào);2018年

8 中國(guó)婦女報(bào)·中華女性網(wǎng)記者 彭蕓;“乳腺癌體質(zhì)”并不可怕[N];中國(guó)婦女報(bào);2017年

9 上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬龍華醫(yī)院 胡婧伊 劉勝;乳腺癌術(shù)后患者潮熱怎么辦？[N];上海中醫(yī)藥報(bào);2017年

10 本報(bào)記者 劉霞;可上九天觀星 可入體內(nèi)探病[N];科技日?qǐng)?bào);2017年

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本文編號(hào)：2749796