【摘要】：背景股骨頭壞死是一種常見的骨科疾病,在手術(shù)治療中常用到的一種手術(shù)方式是不帶血運的骨移植術(shù),是指將自體骨或骨替代材料填壓到壞死區(qū)域,從而促進(jìn)壞死骨組織的修復(fù)。作為骨替代材料的一種,磷酸鈣陶瓷因在化學(xué)成分上與天然骨質(zhì)的成分更為接近,所以具有不錯的前景。在該課題中我們致力于研制出一種性能優(yōu)秀的磷酸鈣材料,使其擁有令人滿意的骨修復(fù)能力。方法使用a/β-磷酸三鈣、聚乙二醇等為原料制備新型磷酸鈣顆粒。通過X射線衍射分析、掃描電子顯微鏡、Micro-CT等方法檢測顆粒的組成和性質(zhì)。構(gòu)建兔股骨頭壞死模型并行影像學(xué)檢測造模效果,再將顆粒植入造模后的兔股骨頭內(nèi),于術(shù)后1個月、2個月時,使用Micro-CT對兔股骨頭進(jìn)行影像學(xué)評價和骨定量評價,使用軟組織切片和HE染色法、天狼星紅染色法對股骨頭進(jìn)行組織學(xué)評價。將顆粒浸提液與小鼠前成骨細(xì)胞MC3T3-E1共培養(yǎng),使用CCK-8法檢測顆粒對MC3T3-E1增殖的影響。將顆粒浸提液與成人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞hMSC共培養(yǎng),使用ALP染色和茜素紅染色研究細(xì)胞ALP的活性和鈣沉積情況。結(jié)果1.X射線衍射分析得出顆粒的主要成分為羥基磷灰石(HA)和α/β-磷酸三鈣。掃描電鏡下可見顆粒表面凹凸不平,周圍沉積有HA結(jié)晶,顆粒表面與內(nèi)部存在互通的孔道。Micro-CT顯示大部分孔道的直徑為0.11mm。2.體內(nèi)實驗:股骨頭壞死的造模成功,影像學(xué)中可見清晰的鉆孔隧道直到股骨頭部位。Micro-CT結(jié)果顯示,實驗組壞死部位有骨小梁形成,對照組無明顯骨小梁再生。骨定量分析發(fā)現(xiàn)實驗組的骨密度明顯高于對照組(P0.05)。HE染色病理切片顯示,實驗組在孔道周圍可見新生骨小梁,內(nèi)含大量骨陷窩和骨細(xì)胞,對照組只可見少量骨小梁再生,內(nèi)見空骨陷窩。天狼星紅染色病理切片顯示,實驗組中存在大量的高亮橘紅色纖維,對照組中只有少量的高亮橘紅色纖維。3.體外實驗:CCK-8實驗結(jié)果顯示,實驗組和對照組的OD值在1、3、5天均具有統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05),對照組的OD值大于同期的實驗組。單獨對于實驗組來說,隨著時間的推移,實驗組細(xì)胞的OD值也在逐漸的增加(P0.05)。ALP染色結(jié)果顯示在培養(yǎng)14天后,實驗組ALP染色的陽性率顯著高于對照組。茜素紅染色結(jié)果顯示,在培養(yǎng)14天后,實驗組鈣結(jié)節(jié)的密度顯著高于對照組。結(jié)論新型磷酸鈣顆�？梢杂行Т龠M(jìn)hMSC的成骨分化,可有效治療兔股骨頭壞死,且具有較好的細(xì)胞相容性,具有作為人股骨頭壞死的治療方法的潛力。
【學(xué)位授予單位】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R681.8
【圖文】：

（圖１：克氏針的進(jìn)針方向與股骨干成４５°角。）逡逑酸鈣顆粒治療兔股骨頭壞死（實驗組）逡逑麻醉、備皮、消毒等術(shù)前準(zhǔn)備與３．邋３．邋２中相同。沿之前，找到上次手術(shù)所建立的孔道，將約１００顆多孔磷酸鈣遠(yuǎn)端，即股骨頭處，使顆粒充分填滿股骨頭缺損部位。畢肌肉注射青霉素３０萬單位，待兔子醒后帶回牢籠正物的飼養(yǎng)逡逑使用的新西蘭大白兔均飼養(yǎng)于北京協(xié)和醫(yī)院實驗動物中術(shù)后３天、１個月、２個月后，分別處死對應(yīng)組別的大研。逡逑

圖２．制備出的多孔磷酸鈣顆粒。逡逑２．多孔磷酸鈣顆粒相關(guān)性質(zhì)的檢測逡逑２．邋１多孔磷酸鈣顆粒的Ｘ射線衍射圖（ＸＲＤ）逡逑在制作多孔磷酸鈣顆粒的過程中，把２．邋５％磷酸氫二鈉溶液與顆粒相混合物逡逑混合后得到水泥狀混合物，之后還需要經(jīng)過塑形（ｍｏｌｄｉｎｇ）、濾去聚乙二醇并干燥逡逑（ｌｅａｃｈ邋ｏｆ邋ＰＥＧ邋ａｎｄ邋ｄｒｙ）、高壓滅菌（ａｕｔｏｃｌａｖｉｎｇ）等工序，才能得到最終的成逡逑品。我們把上述階段的材料通過Ｘ射線衍射儀進(jìn)行分析，得到了如圖所示的結(jié)果（圖逡逑３）。代表ａ－磷酸三鈣（ａ－ＴＣＰ）、羥基磷灰石（ＨＡ）、聚乙二醇（ＰＥＧ）的峰值均在逡逑圖中標(biāo)出。逡逑

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前6條

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本文編號：2716157