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3D打印膠原—殼聚糖仿生支架治療脊髓損傷的實驗研究

發(fā)布時間:2020-06-16 08:38
【摘要】:【目的】利用三維打印技術聯合真空冷凍干燥技術構建同時具有良好生物相容性和力學性能的仿生脊髓支架;探究3D打印的膠原-殼聚糖支架在脊髓損傷后的修復作用!静牧虾头椒ā1.脊髓仿生支架的制備:膠原-殼聚糖材料在低溫條件下進行混合;取出一部分直接在真空冷凍機中冷凍干燥;另一部分復合物利用三維打印技術制成多孔結構支架,-80℃低溫保存過夜,真空冷凍機干燥后得到3D打印的膠原-殼聚糖支架。觀察成型后的支架成絲和自身的孔徑等表觀特征;采用重量法測定支架孔隙率及吸水率;支架浸泡24h后,力學試驗機檢測支架的彈性模量。2.脊髓損傷模型的手術分組:選取成年雌性SD大鼠40只,體重250-300g,利用掛線法制備T8脊髓全橫斷損傷模型,待完全止血后,即刻植入膠原-殼聚糖支架。根據支架種類的不同分為4組:暴露脊髓后直接縫合肌肉皮膚空白對照組(sham)、無支架植入單純損傷組(SCI)、移植直接冷凍干燥支架組(SCI+S)、移植3D打印支架組(SCI+3D-S)。3.檢測脊髓仿生支架的修復作用:術后8周,采集各組大鼠脊髓的MRI和DTI數據評價脊髓損傷后微觀結構形態(tài)的變化;術后8周,采集各組大鼠雙后肢的電生理活動;術后每周,采用雙盲法通過BBB評分和傾斜爬壁試驗評價各組大鼠后肢運動功能的恢復;取材后觀察脊髓大體修復情況;切片做HE染色、鍍銀染色及NF免疫熒光染色觀察支架修復損傷空洞及促進神經再生的效果!窘Y果】1.3D打印的仿生脊髓支架(3D-S)吸水率為804.65±16.3%、孔隙率為86.36±2.9%、彈性模量為26.68±1.89kPa;而直接冷凍干燥的支架(S)吸水率為1025.54±20.5%、孔隙率為64.74±1.5、彈性模量為14.38±1.36kPa。提示3D打印脊髓仿生支架具有良好的力學性能,更適合作為脊髓移植物。2.掛線法保證離斷脊髓的徹底性。離斷瞬間大鼠后肢劇烈抽搐后肌肉松弛無力,痛覺刺激后肢無回縮反應,提示全橫斷大鼠模型造模成功。3.術后8周,SCI+3D-S組大鼠的MRI和DTI檢測、電生理活動、BBB評分和斜板實驗結果均明顯優(yōu)于SCI組和SCI+S組。支架組的HE染色結果發(fā)現損傷后形成的空洞明顯少于單純損傷組的大鼠,鍍銀染色和NF免疫熒光結果發(fā)現支架組促進脊髓損傷后的神經再生,其中3D支架組最有利于脊髓損傷后大鼠神經再生和修復!窘Y論】3D打印的多孔膠原-殼聚糖仿生支架改善脊髓微觀結構,填補脊髓損傷空洞并促進神經纖維及軸突再生及后肢感覺及運動功能恢復,是一種具有良好應用前景的治療脊髓損傷的支架。
【學位授予單位】:天津醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2018
【分類號】:R651.2
【圖文】:

支架,膠原,殼聚糖


圖 1 為膠原殼聚糖支架。A 為 3D 打印過程,B 為 3D 打印成型的膠原-殼聚糖支架,C 為 3D 打印機,D 為直接冷凍干燥的膠原-殼聚糖支架,E 為裁剪消毒后的兩種脊髓支架。1.2.2 物理及力學測定物理學測定:支架浸泡 PBS 后變軟,具有延展性,3D 打印仿生脊髓支架(3D-S)吸水率為 804.65±16.3%、孔隙率為 86.36±2.9%、彈性模量為 26.68±3.89kPa;而直接冷凍干燥的支架(S)吸水率為 1025.54±20.5%、孔隙率為64.74±1.5、彈性模量為 14.38±3.36kPa。力學測定:3D-S 支架壓縮位移為 10.26±0.46mm,壓縮應力為 0.06±0.008MPa,彈性模量為 26.68±3.89kPa;S 支架壓縮位移為 9.89±0.85mm,壓縮應力為 0.04±0.002MPa,彈性模量為 14.38±3.36kPa。

曲線圖,支架,壓縮應力,應變關系


天津醫(yī)科大學碩士學位論文 一、3D 打印技術制備脊髓仿生支架表 1:不同制備方法的支架的吸水率、孔隙率和彈性模量材料吸水率 孔隙率 彈性模量(%) (%) (kPa)冷凍干燥膠原-殼聚糖支架1025.54±20.5 64.74±1.5 14.38±3.353D 打印膠原-殼聚糖支架804.65±15.3 86.36±2.9 26.68±3.89

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