【摘要】：目的:探討miR-494在乳腺癌組織和乳腺癌細(xì)胞系中的表達(dá)及其與乳腺癌臨床分期、轉(zhuǎn)移和預(yù)后的關(guān)系。方法:回顧性研究。用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)檢測5種乳腺癌細(xì)胞系MDA-MB-231、MDA-MB-453、HCC-1937、MDA-MB-468、MCF-7和1株乳腺上皮細(xì)胞系HBL-100中miR-494的表達(dá)水平;同時(shí)用qRT-PCR方法檢測miR-494在54對乳腺癌組織和癌旁組織中的表達(dá)水平;用脂質(zhì)體將miR-494表達(dá)質(zhì)粒(pSIF-miR-494)和陰性對照組(pSIF空白載體)轉(zhuǎn)染入乳腺癌細(xì)胞系MDA-MB-231后用劃痕和侵襲實(shí)驗(yàn)Transwell)檢測mi R-494對細(xì)胞遷移和侵襲力的影響;利用生物信息學(xué)軟件預(yù)測miR-494的靶基因是VASH2,利用免疫印跡法(Western blot)檢測miR-494對靶基因VASH2的抑制作用。結(jié)果:乳腺癌組織中miR-494的表達(dá)量為0.16±0.26,癌旁組織中miR-494表達(dá)量0.53±0.66,乳腺癌組織中miR-494的表達(dá)量明顯低于癌旁組織(P0.01)。乳腺癌細(xì)胞系(MDA-MB-231、MDA-MB-453、HCC-1937、MDA-MB-468、MCF-7)中miR-494的表達(dá)量相對正常乳腺上皮細(xì)胞明顯降低(t值分別為212.9、37.73、27.53、10.61、19.46,P值均0.05)。在乳腺癌細(xì)胞系MDA-MB-231中過表達(dá)miR-494后,劃痕實(shí)驗(yàn)證明腫瘤細(xì)胞的遷移能力明顯受到抑制;Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)顯示上調(diào)miR-494后腫瘤細(xì)胞穿過基質(zhì)膠的平均數(shù)為(122±20)個(gè);對照組為(598±24)個(gè)(P0.01);驗(yàn)證了過表達(dá)miR-494能夠明顯減弱乳腺癌細(xì)胞的侵襲能力。同樣轉(zhuǎn)染了miR-494表達(dá)質(zhì)粒后能夠顯著抑制其靶基因VASH2的蛋白表達(dá),Western blot結(jié)果顯示陰性對照組蛋白相對灰度值為1.35±0.05,轉(zhuǎn)染miR-494表達(dá)質(zhì)粒組蛋白相對灰度值為0.64±0.07,過表達(dá)miR-494能夠明顯抑制VASH2蛋白表達(dá)(t=9.27,P0.05)。此外,miR-494在乳腺癌組織中的表達(dá)水平亦明顯低于癌旁組織(t=5.80,P0.01),且與臨床分期(χ2=17.41,P0.05)、組織病理分級(χ2=5.33,P0.05)、C-erbB-2表達(dá)情況(χ2=9.83,P0.05)、Ki-67陽性細(xì)胞百分比(χ2=6.13,P0.05)有關(guān)。結(jié)論:miR-494在乳腺癌組織和乳腺癌細(xì)胞系中低表達(dá),且與乳腺癌臨床分期和預(yù)后關(guān)系密切,可能成為乳腺癌輔助診斷和預(yù)后判斷的新的分子標(biāo)志。
【學(xué)位授予單位】：江漢大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R737.9
【圖文】：

江漢大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文第3 過表達(dá) miR-494 對乳腺癌細(xì)胞系遷移和侵襲能力的影響乳腺癌細(xì)胞系 MDA-MB-231 中轉(zhuǎn)染 pSIF-miR-494 質(zhì)粒劃痕 24h 后，細(xì)胞愈著低于陰性對照組（圖 1），劃痕實(shí)驗(yàn)證明腫瘤細(xì)胞的遷移能力明顯受到抑ell 侵襲實(shí)驗(yàn)顯示乳腺癌細(xì)胞系 MDA-MB-231 中轉(zhuǎn)染 pSIF-miR-494 質(zhì)粒后腫過基質(zhì)膠的平均數(shù)為（122±20）個(gè)；對照組為（598±24）個(gè)（P＜0.01）；驗(yàn)iR-494 表達(dá)后能夠顯著減弱乳腺癌細(xì)胞的侵襲能力（圖 2）。

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前6條

1 邢慶菲;郭戰(zhàn)軍;李常穎;孫光;王濱帥;王一;;代謝綜合征與膀胱癌分級和分期相關(guān)性的研究[J];中華泌尿外科雜志;2015年10期

2 許建林;黃穎;梁曉燕;南永剛;楊琪;施常備;;血清腫瘤標(biāo)志物和乳腺鉬靶在乳腺癌診斷中的應(yīng)用價(jià)值[J];標(biāo)記免疫分析與臨床;2015年09期

3 田W

本文編號：2712951