【摘要】：背景:創(chuàng)傷性腦損傷(traumatic brain injure,TBI)是指頭部受到直接或間接性的物理或非物理性的撞擊或顱骨穿刺傷引起,死亡率和致殘率較高,造成沉重的社會(huì)和家庭負(fù)擔(dān)。TBI可以不同程度的損傷腦血管自動(dòng)調(diào)節(jié)系統(tǒng)中的組織和細(xì)胞等,導(dǎo)致腦血管自動(dòng)調(diào)節(jié)功能(Cerebrovascular autoregulation,CA)障礙,引起繼發(fā)性腦損傷。TBI引起的腦組織原發(fā)性損傷難以逆轉(zhuǎn),但對(duì)于TBI后的腦血管損傷和腦血流改變等繼發(fā)性損傷是可以進(jìn)行干預(yù)的。因此通過對(duì)TBI后腦血管自動(dòng)調(diào)節(jié)功能障礙的機(jī)制研究,可以為腦外傷的治療提供新的理論依據(jù)。目的:(1)用功能核磁共振(functional magnetic resonance imaging,fMRI)評(píng)價(jià)不同程度TBI大鼠全腦及局部感興趣區(qū)(Regionofinterests,ROIs)腦血管自動(dòng)調(diào)節(jié)功能。(2)探討AT1R及下游信號(hào)通路在TBI后腦血管調(diào)節(jié)障礙中的作用及機(jī)制,為TBI的治療提供新的理論依據(jù)。方法:(1)用功能核磁共振評(píng)價(jià)不同程度TBI大鼠腦血管自動(dòng)調(diào)節(jié)功能:利用feeney自由落體打擊原理制備創(chuàng)傷性腦外傷動(dòng)物模型:40只雄性SD大鼠(250-300g)隨機(jī)分為 4 組:假手術(shù)組(Sham,n=10),輕度 TBI 組(Mild,.n=10),中度 TBI 組(Moderate,n=10),重度 TBI 組(Severe,n=10)。在 TBI 后 24 小時(shí)行改良的神經(jīng)功能評(píng)分、水迷宮,隨后在腹主動(dòng)脈瞬間阻斷造成血壓瞬時(shí)變化的狀態(tài)下,行功能核磁共振檢測腦血管自動(dòng)調(diào)節(jié)功能,評(píng)價(jià)不同程度TBI大鼠全腦和局部感興趣區(qū)域腦血管自動(dòng)調(diào)節(jié)功能,檢測完畢后進(jìn)行組織學(xué)評(píng)估(HE染色、尼氏染色、TUNEL)。(2)探討Notch信號(hào)通路抑制劑DAPT對(duì)重度TBI大鼠腦血管自動(dòng)調(diào)節(jié)的保護(hù)作用及機(jī)制:60只雄性SD大鼠(250-300g)隨機(jī)分為6組:輕度TBI組(Mild,n = 10),中度 TBI 組(Moderate,n = 10),重度 TBI 組(Severe,n=10),重度 TBI+vehicle 組(Severe+ vehicle,n= 10),重度 TBI+ DAPT 組(Severe+ DAPT,n=1 0)。①評(píng)價(jià)不同損傷程度TBI大鼠Notch及下游信號(hào)Hes1、Hes5的蛋白和基因表達(dá)情況以及凋亡和氧化應(yīng)激指標(biāo)。在TBI24小時(shí)檢測不同程度TBI大鼠損傷區(qū)周圍皮質(zhì)Notch及下游信號(hào)Hes1、Hes5的蛋白和基因表達(dá)情況,以及凋亡指標(biāo):Bcl-2、Bax、Caspase-3、Caspase-9,和氧化應(yīng)激指標(biāo):MDA和SOD。②評(píng)價(jià)Notch信號(hào)抑制劑DAPT對(duì)重度TBI大鼠的腦血管自動(dòng)調(diào)節(jié)的保護(hù)作用及機(jī)制。選取重度TBI大鼠用Notch抑制劑進(jìn)行治療,用重度TBI和重度TBI+ vehicle作為對(duì)照組,在TBI24小時(shí)后對(duì)重度TBI+vehicle組和重度TBI+DAPT組行改良的神經(jīng)功能評(píng)分、水迷宮,隨后行功能核磁共振檢測腦血管自動(dòng)調(diào)節(jié)功能,評(píng)價(jià)全腦和局部感興趣區(qū)域腦血管自動(dòng)調(diào)節(jié)功能,檢測完畢后進(jìn)行組織學(xué)評(píng)估(HE染色、尼氏染色、TUNEL),檢測損傷周圍皮質(zhì)組織中凋亡指標(biāo):Bcl-2、Bax、Caspase-3、Caspase-9,和氧化應(yīng)激指標(biāo):MDA和SOD、Notch和下游Hes1、Hes5表達(dá)情況。(3)探討AT1R抑制劑對(duì)重度TBI大鼠腦血管自動(dòng)調(diào)節(jié)的保護(hù)作用及機(jī)制:30只雄性SD大鼠(250-300g)隨機(jī)分為3組:重度TBI組(Severe,n=10),重度TBI+vehicle 組(Severe+ vehicle,n=10),重度 TBI+ Losartan 組(Severe+ Losartan,n=10)。在TBI24小時(shí)行改良的神經(jīng)功能評(píng)分、水迷宮,隨后行功能核磁共振檢測腦血管自動(dòng)調(diào)節(jié)功能,檢測損傷周圍皮質(zhì)和海馬組織的Notch及下游信號(hào)Hes1、Hes5蛋白和基因表達(dá),檢測凋亡指標(biāo):Bcl-2、Bax、Caspase-3、Caspase-9,和氧化應(yīng)激指標(biāo):MDA和SOD。結(jié)果:(1)在TBI后24小時(shí),重度TBI大鼠在腹主動(dòng)脈解除阻斷后16分鐘腦血流仍然處于下降趨勢,提示腦血管自動(dòng)調(diào)節(jié)功能受損,正常組在腹主動(dòng)脈解除阻斷后4分鐘腦血流恢復(fù)到基礎(chǔ)水平、輕度TBI組和中度TBI組分別在解除阻斷后8-12分鐘腦血流恢復(fù)到基礎(chǔ)水平,提示腦血管自動(dòng)調(diào)節(jié)功能存在。隨著損傷程度加重,Notch及下游信號(hào)Hes1、Hes5表達(dá)逐漸升高,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。促凋亡因子Bax、Caspase-3、Caspase-9逐漸升高,抗凋亡因子Bcl-2、逐漸降低,氧化應(yīng)激指標(biāo)MDA逐漸升高,SOD下降,各組之間表達(dá)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。給予Notch抑制劑DAPT治療后,與TBI組和TBI+vehicle組比較,重度TBI組腦血流在解除阻斷后16分鐘上升,提示腦血管自動(dòng)調(diào)節(jié)功能改善。此外,DAPT治療組Notch及下游信號(hào)Hes1、Hes5表達(dá)下降,各組之間比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。促凋亡因子Bax、Caspase-3、Caspase-9下降,抗凋亡因子Bcl-2升高,MDA下降,SOD上升,各組之間比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。DAPT治療組NSS評(píng)分和水迷宮逃避潛伏期均改善,各組差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。(2)重度TBI組在AT1R抑制劑Losartan治療后,腦血流在腹主動(dòng)脈阻斷后16分鐘開始上升,提示腦血管自動(dòng)調(diào)節(jié)功能恢復(fù)。Losartan治療后Notch及下游信號(hào)因子Hes1、Hes5下降,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。此外,Losartan治療組促凋亡因子Bax、Caspase-3、Caspase-9下降,抗凋亡因子Bcl-2升高,MDA下降,SOD上升,各組之間比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。Losartan治療組NSS評(píng)分和水迷宮逃避潛伏期均改善,各組差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。結(jié)論:(1)重度TBI大鼠在TBI后24小時(shí)全腦和局部感興趣區(qū)域腦血管自動(dòng)調(diào)節(jié)功能受損(2)AT1R抑制劑Losartan可以通過抑制Notch及下游信號(hào)減輕凋亡和氧化應(yīng)激,改善重度TBI大鼠腦血管自動(dòng)調(diào)節(jié)功能。
【圖文】：

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本文編號(hào)：2706753