【摘要】：背景:創(chuàng)傷性腦損傷(traumatic brain injure,TBI)是指頭部受到直接或間接性的物理或非物理性的撞擊或顱骨穿刺傷引起,死亡率和致殘率較高,造成沉重的社會和家庭負擔。TBI可以不同程度的損傷腦血管自動調(diào)節(jié)系統(tǒng)中的組織和細胞等,導致腦血管自動調(diào)節(jié)功能(Cerebrovascular autoregulation,CA)障礙,引起繼發(fā)性腦損傷。TBI引起的腦組織原發(fā)性損傷難以逆轉(zhuǎn),但對于TBI后的腦血管損傷和腦血流改變等繼發(fā)性損傷是可以進行干預的。因此通過對TBI后腦血管自動調(diào)節(jié)功能障礙的機制研究,可以為腦外傷的治療提供新的理論依據(jù)。目的:(1)用功能核磁共振(functional magnetic resonance imaging,fMRI)評價不同程度TBI大鼠全腦及局部感興趣區(qū)(Regionofinterests,ROIs)腦血管自動調(diào)節(jié)功能。(2)探討AT1R及下游信號通路在TBI后腦血管調(diào)節(jié)障礙中的作用及機制,為TBI的治療提供新的理論依據(jù)。方法:(1)用功能核磁共振評價不同程度TBI大鼠腦血管自動調(diào)節(jié)功能:利用feeney自由落體打擊原理制備創(chuàng)傷性腦外傷動物模型:40只雄性SD大鼠(250-300g)隨機分為 4 組:假手術(shù)組(Sham,n=10),輕度 TBI 組(Mild,.n=10),中度 TBI 組(Moderate,n=10),重度 TBI 組(Severe,n=10)。在 TBI 后 24 小時行改良的神經(jīng)功能評分、水迷宮,隨后在腹主動脈瞬間阻斷造成血壓瞬時變化的狀態(tài)下,行功能核磁共振檢測腦血管自動調(diào)節(jié)功能,評價不同程度TBI大鼠全腦和局部感興趣區(qū)域腦血管自動調(diào)節(jié)功能,檢測完畢后進行組織學評估(HE染色、尼氏染色、TUNEL)。(2)探討Notch信號通路抑制劑DAPT對重度TBI大鼠腦血管自動調(diào)節(jié)的保護作用及機制:60只雄性SD大鼠(250-300g)隨機分為6組:輕度TBI組(Mild,n = 10),中度 TBI 組(Moderate,n = 10),重度 TBI 組(Severe,n=10),重度 TBI+vehicle 組(Severe+ vehicle,n= 10),重度 TBI+ DAPT 組(Severe+ DAPT,n=1 0)。①評價不同損傷程度TBI大鼠Notch及下游信號Hes1、Hes5的蛋白和基因表達情況以及凋亡和氧化應(yīng)激指標。在TBI24小時檢測不同程度TBI大鼠損傷區(qū)周圍皮質(zhì)Notch及下游信號Hes1、Hes5的蛋白和基因表達情況,以及凋亡指標:Bcl-2、Bax、Caspase-3、Caspase-9,和氧化應(yīng)激指標:MDA和SOD。②評價Notch信號抑制劑DAPT對重度TBI大鼠的腦血管自動調(diào)節(jié)的保護作用及機制。選取重度TBI大鼠用Notch抑制劑進行治療,用重度TBI和重度TBI+ vehicle作為對照組,在TBI24小時后對重度TBI+vehicle組和重度TBI+DAPT組行改良的神經(jīng)功能評分、水迷宮,隨后行功能核磁共振檢測腦血管自動調(diào)節(jié)功能,評價全腦和局部感興趣區(qū)域腦血管自動調(diào)節(jié)功能,檢測完畢后進行組織學評估(HE染色、尼氏染色、TUNEL),檢測損傷周圍皮質(zhì)組織中凋亡指標:Bcl-2、Bax、Caspase-3、Caspase-9,和氧化應(yīng)激指標:MDA和SOD、Notch和下游Hes1、Hes5表達情況。(3)探討AT1R抑制劑對重度TBI大鼠腦血管自動調(diào)節(jié)的保護作用及機制:30只雄性SD大鼠(250-300g)隨機分為3組:重度TBI組(Severe,n=10),重度TBI+vehicle 組(Severe+ vehicle,n=10),重度 TBI+ Losartan 組(Severe+ Losartan,n=10)。在TBI24小時行改良的神經(jīng)功能評分、水迷宮,隨后行功能核磁共振檢測腦血管自動調(diào)節(jié)功能,檢測損傷周圍皮質(zhì)和海馬組織的Notch及下游信號Hes1、Hes5蛋白和基因表達,檢測凋亡指標:Bcl-2、Bax、Caspase-3、Caspase-9,和氧化應(yīng)激指標:MDA和SOD。結(jié)果:(1)在TBI后24小時,重度TBI大鼠在腹主動脈解除阻斷后16分鐘腦血流仍然處于下降趨勢,提示腦血管自動調(diào)節(jié)功能受損,正常組在腹主動脈解除阻斷后4分鐘腦血流恢復到基礎(chǔ)水平、輕度TBI組和中度TBI組分別在解除阻斷后8-12分鐘腦血流恢復到基礎(chǔ)水平,提示腦血管自動調(diào)節(jié)功能存在。隨著損傷程度加重,Notch及下游信號Hes1、Hes5表達逐漸升高,差異均具有統(tǒng)計學意義(p0.05)。促凋亡因子Bax、Caspase-3、Caspase-9逐漸升高,抗凋亡因子Bcl-2、逐漸降低,氧化應(yīng)激指標MDA逐漸升高,SOD下降,各組之間表達具有統(tǒng)計學意義(p0.05)。給予Notch抑制劑DAPT治療后,與TBI組和TBI+vehicle組比較,重度TBI組腦血流在解除阻斷后16分鐘上升,提示腦血管自動調(diào)節(jié)功能改善。此外,DAPT治療組Notch及下游信號Hes1、Hes5表達下降,各組之間比較差異具有統(tǒng)計學意義(p0.05)。促凋亡因子Bax、Caspase-3、Caspase-9下降,抗凋亡因子Bcl-2升高,MDA下降,SOD上升,各組之間比較差異具有統(tǒng)計學意義(p0.05)。DAPT治療組NSS評分和水迷宮逃避潛伏期均改善,各組差異具有統(tǒng)計學意義(p0.05)。(2)重度TBI組在AT1R抑制劑Losartan治療后,腦血流在腹主動脈阻斷后16分鐘開始上升,提示腦血管自動調(diào)節(jié)功能恢復。Losartan治療后Notch及下游信號因子Hes1、Hes5下降,差異均具有統(tǒng)計學意義(p0.05)。此外,Losartan治療組促凋亡因子Bax、Caspase-3、Caspase-9下降,抗凋亡因子Bcl-2升高,MDA下降,SOD上升,各組之間比較差異具有統(tǒng)計學意義(p0.05)。Losartan治療組NSS評分和水迷宮逃避潛伏期均改善,各組差異具有統(tǒng)計學意義(p0.05)。結(jié)論:(1)重度TBI大鼠在TBI后24小時全腦和局部感興趣區(qū)域腦血管自動調(diào)節(jié)功能受損(2)AT1R抑制劑Losartan可以通過抑制Notch及下游信號減輕凋亡和氧化應(yīng)激,改善重度TBI大鼠腦血管自動調(diào)節(jié)功能。
【圖文】：

范源瓷誦閱運鶘撕竽匝，

本文編號：2706753