【摘要】：目的:探討體內(nèi)誘導(dǎo)合成低氧誘導(dǎo)因子-1ɑ(hypoxia-inducible factor-1ɑ,HIF-1ɑ)對(duì)跨區(qū)皮瓣內(nèi)VEGF(Vascular endothelial growth factor,VEGF)的影響及其作用機(jī)制,為促進(jìn)臨床皮瓣遠(yuǎn)端早期血管化和提高其成活率提供新的理論思路。方法:選取健康成年雄性SD大鼠30只,體重在250-300g之間,并隨機(jī)分成3組,實(shí)驗(yàn)組:激動(dòng)劑處理組,抑制劑處理組;對(duì)照組:生理鹽水組。術(shù)前2小時(shí)及術(shù)后1、2、3天分別對(duì)3組進(jìn)行腹腔注射藥物,激動(dòng)劑組注射DMOG(二甲基乙二酰基甘氨酸),40mg/kg;抑制劑組注射YC-1[3-(5-羥甲基-2-呋喃基)-1-苯甲基吲唑],10mg/kg;對(duì)照組給予等體積生理鹽水。在大鼠背部左側(cè)建立一個(gè)以髂腰動(dòng)脈為血管蒂,跨越肋間動(dòng)脈和胸背動(dòng)脈,肩胛下角為上邊界,髂后上棘連線為下邊界,后正中線為內(nèi)側(cè)邊界,腋后線為外側(cè)邊界,長(zhǎng)12cm,寬3cm的矩形跨區(qū)皮瓣模型。觀察指標(biāo)包括:(1)術(shù)后7天通過(guò)肉眼觀察大體皮瓣的成活情況;(2)術(shù)后第7天通過(guò)M2 Image Analysis system圖像分析系統(tǒng)對(duì)皮瓣成活率進(jìn)行計(jì)算(皮瓣成活率=皮瓣成活面積/皮瓣總面積);(3)通過(guò)造影技術(shù)檢測(cè)術(shù)后7天ChokeⅡ區(qū)血管生成情況;(4)通過(guò)HE染色法進(jìn)行鏡下血管數(shù)量檢測(cè);(5)通過(guò)Elisa法檢測(cè)術(shù)后7天不同組間HIF-1ɑ、VEGF表達(dá)量。(6)通過(guò)Western blot檢測(cè)術(shù)后7天不同組間HIF-1ɑ、VEGF表達(dá)量。(7)通過(guò)免疫組化檢測(cè)術(shù)后7天不同組間HIF-1ɑ、VEGF的表達(dá)情況。結(jié)果1.大體觀察:術(shù)后7天在3組皮瓣模型中,激動(dòng)劑組皮瓣遠(yuǎn)端壞死范圍明顯小于對(duì)照組和抑制劑組。激動(dòng)劑組內(nèi)Choke II區(qū)出現(xiàn)血管擴(kuò)張?jiān)錾�、貫通直達(dá)遠(yuǎn)端皮瓣組織,而對(duì)照組Choke II內(nèi)血管未見(jiàn)明顯變化,且遠(yuǎn)端皮瓣組織呈輕度暗黑色,抑制劑組內(nèi)Choke II血管出現(xiàn)中斷,遠(yuǎn)端皮瓣組織出現(xiàn)壞死。2.壞死面積:術(shù)后7天采用高清數(shù)碼相機(jī)攝片,將圖片數(shù)據(jù)通過(guò)M2 Image Analysis system圖像分析系分別計(jì)算激動(dòng)劑組、抑制劑組、對(duì)照組成活率(%)分別為90.38±1.36;84.28±1.45;85.83±1.59。與對(duì)照組相比,激動(dòng)劑組高于對(duì)照組,有明顯差異性(P0.05),具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;而抑制劑組與對(duì)照組相比未見(jiàn)明顯差異性,(P0.05),不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。3.造影:術(shù)后7天造影,激動(dòng)劑組Choke vessels II區(qū)血管結(jié)構(gòu)密集清晰,可出現(xiàn)大面積血管吻合網(wǎng),而對(duì)照組和抑制劑組Choke vessels II區(qū)血管區(qū)血管結(jié)構(gòu)則稀少模糊不清,血管吻合網(wǎng)較少。4.HE染色法進(jìn)行鏡下血管數(shù)量檢測(cè):在10×20倍光學(xué)顯微鏡鏡下隨意選取5個(gè)視野觀測(cè),根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)激動(dòng)劑組在術(shù)后第7天有明顯的血管生長(zhǎng)趨勢(shì)和血管數(shù)量的增生;對(duì)照組術(shù)后第7天也出現(xiàn)新鮮血管生長(zhǎng)趨勢(shì),但未見(jiàn)明顯血管數(shù)量增生;抑制劑組術(shù)后血管生長(zhǎng)較差,未有明顯新血管增生。在Choke vessels II區(qū)中,平均血管數(shù)量為激動(dòng)劑組24.00±5.52個(gè);抑制劑組7.60±7.71個(gè);對(duì)照組Choke vessels II區(qū)14.00±2.34個(gè),激動(dòng)劑組對(duì)照組抑制劑組。差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。5.Elisa法檢測(cè)術(shù)后7天choke II區(qū)choke II區(qū)的HIF-1ɑ表達(dá)量為激動(dòng)劑組對(duì)照組抑制劑組(分別為2.87±0.19;1.85±0.41;0.89±0.29,單位為ng/mg);VEGF表達(dá)量為激動(dòng)劑組對(duì)照組抑制劑組,(分別為34.87±3.05;19.64±1.13;14.41±1.34,單位為ng/mg)。與對(duì)照組相比二者均由明顯差異性,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。6.Western blot檢測(cè)HIF-1ɑ、VEGF:選取術(shù)后7天進(jìn)行檢測(cè),Choke vessels II區(qū)HIF-1ɑ、VEGF的灰度值/β-actin的灰度值大小來(lái)表示HIF-1ɑ、VEGF蛋白表達(dá)強(qiáng)度,其結(jié)果為激動(dòng)劑組對(duì)照組抑制劑組,兩者與對(duì)照組相比差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。7.免疫組化檢測(cè)內(nèi)HIF-1ɑ、VEGF表達(dá):在40×10倍電子顯微鏡下觀察,發(fā)現(xiàn)現(xiàn)術(shù)后7天的激動(dòng)劑組血管中HIF-1ɑ、VEGF表達(dá)明顯,對(duì)照組、抑制劑組血管中也可見(jiàn)HIF-1ɑ、VEGF的表達(dá),但兩者表達(dá)量明顯小于激動(dòng)劑組。結(jié)論1.HIF-1α的表達(dá)可明顯降低大鼠Choke vessles II區(qū)早期缺血的損傷程度。2.皮瓣移植術(shù)后,體內(nèi)誘導(dǎo)HIF-1α的高表達(dá)可促進(jìn)跨區(qū)皮瓣VEGF的表達(dá),進(jìn)而促進(jìn)皮瓣Choke vessels II區(qū)的血管新生,進(jìn)一步加快了早期血管化的進(jìn)程,促進(jìn)了皮瓣遠(yuǎn)端的血液供應(yīng),從而提高了大鼠背部跨區(qū)穿支皮瓣的成活。3.術(shù)后早期提高HIF-1α的表達(dá)有望成為促進(jìn)跨區(qū)皮瓣成活的一種新途徑。
【圖文】：

縫合線原位縫合。術(shù)閉，用碘伏消毒液依次擦拭切口。為防止大鼠互咬皮瓣模型，術(shù)后均采用單籠飼養(yǎng)，，自由進(jìn)食水。所用動(dòng)物操作臺(tái)術(shù)前均行紫外線照射，所用手術(shù)器械均高壓蒸汽滅菌。（附：圖1）2.3術(shù)后大體觀察皮瓣的成活情況術(shù)后 7 天分別對(duì)三組皮瓣成活情況進(jìn)行肉眼觀察，觀察指標(biāo)主要包括：背部毛發(fā)生

術(shù)后7天激動(dòng)劑組(A)、抑制劑組(B)、對(duì)照組(C)皮瓣大體觀
【學(xué)位授予單位】：甘肅中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R622

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 陶先耀;周宗偉;楊良慧;高偉陽(yáng);王瓏;丁健;封曉亮;;二甲基乙二�；拾彼犷A(yù)處理對(duì)大鼠跨區(qū)穿支皮瓣成活的影響及相關(guān)機(jī)制[J];中華燒傷雜志;2016年07期

2 習(xí)珊珊;丁茂超;鄭俊;劉曉琳;毛以華;梅勁;唐茂林;;尾靜脈注射DMOG對(duì)大鼠跨區(qū)皮瓣choke血管區(qū)的影響[J];中華顯微外科雜志;2016年02期

3 王欣;張英琪;陳銳;張世民;俞光榮;;低分子量肝素鈉對(duì)逆行島狀皮瓣存活影響的實(shí)驗(yàn)研究[J];中華手外科雜志;2016年02期

4 胡斯旺;毛海蛟;莊躍宏;崔懷瑞;黃美賢;唐茂林;徐達(dá)傳;;再探大鼠背部穿支體區(qū)間choke血管變化規(guī)律[J];中國(guó)臨床解剖學(xué)雜志;2014年06期

5 龐秋霞;米志寬;景彩霞;成延萍;王愛(ài)紅;魏曉麗;;乳腺癌組織中HIF-1α及VEGF-C蛋白表達(dá)分析[J];陜西醫(yī)學(xué)雜志;2014年11期

6 胡斯旺;莊躍宏;崔懷瑞;黃美賢;唐茂林;徐達(dá)傳;;大鼠背部穿支體區(qū)間choke血管變化規(guī)律初探[J];中國(guó)臨床解剖學(xué)雜志;2014年05期

7 戴開(kāi)宇;胡斯旺;莊躍宏;劉楊武;楊錦;張根福;楊曉東;;大鼠背部跨區(qū)皮瓣的Choke靜脈的變化規(guī)律[J];解剖學(xué)報(bào);2013年02期

8 梁鐵軍;;腓腸神經(jīng)血管營(yíng)養(yǎng)皮瓣修復(fù)足踝部缺損療效觀察[J];當(dāng)代醫(yī)學(xué);2012年35期

9 唐茂林;章偉文;張世民;徐達(dá)傳;;穿支皮瓣研究進(jìn)展[J];中國(guó)臨床解剖學(xué)雜志;2011年06期

10 莊躍宏;胡斯旺;吳東方;丁茂超;黃美賢;唐茂林;徐達(dá)傳;;一種研究choke血管新的動(dòng)物模型—大鼠背部皮窗[J];中國(guó)臨床解剖學(xué)雜志;2011年06期

本文編號(hào)：2698333