【摘要】：目的:研究甘氨酸受體與大鼠心肌細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的共定位關(guān)系,及缺氧和甘氨酸處理對(duì)大鼠心肌細(xì)胞甘氨酸受體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)共定位的影響方法:實(shí)驗(yàn)分二部分進(jìn)行:第一部分:選用大鼠心肌細(xì)胞系H9C2細(xì)胞,用蛋白免疫印跡(Western blot)檢測(cè)甘氨酸受體α1(Gly Rα1)在缺氧及甘氨酸干預(yù)下的表達(dá)情況及其在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的表達(dá)情況。第二部分:選用大鼠心肌細(xì)胞系H9C2細(xì)胞,用免疫熒光染色與激光共聚焦顯微鏡觀察甘氨酸受體α1(Gly Rα1)與心肌細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的共定位關(guān)系。結(jié)果:1)缺氧及甘氨酸對(duì)心肌細(xì)胞甘氨酸受體α1(Gly Rα1)表達(dá)的影響結(jié)果顯示:缺氧可明顯引起心肌細(xì)胞內(nèi)甘氨酸受體α1蛋白表達(dá)增高,而甘氨酸處理大鼠心肌細(xì)胞不同時(shí)間后,甘氨酸受體α1表達(dá)有短暫升高趨勢(shì)。處理6h和12h后,甘氨酸受體α1與0h相比具有顯著意義(p0.05),且甘氨酸對(duì)缺氧造成的甘氨酸受體α1表達(dá)升高有一定的抑制作用。2)心肌細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上存在甘氨酸受體α1(Gly Rα1)。3)甘氨酸受體α1(Gly Rα1)與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(ER)共定位研究結(jié)果顯示:甘氨酸受體α1(Gly Rα1)與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)存在共定位現(xiàn)象,且缺氧組(Hyp組)甘氨酸受體α1(Gly Rα1)的表達(dá)量較高,甘氨酸組(Gly組)表達(dá)較弱,將缺氧處理的刺激細(xì)胞用甘氨酸處理后,缺氧促進(jìn)甘氨酸受體α1(Gly Rα1)的表達(dá)增加的趨勢(shì)被明顯抑制。結(jié)論:缺氧可以引起大鼠心肌細(xì)胞中甘氨酸受體的表達(dá)明顯增多,而甘氨酸可以通過與甘氨酸受體結(jié)合抑制其表達(dá),且甘氨酸可以有效地減少心肌細(xì)胞的凋亡率,共定位研究結(jié)果顯示大鼠心肌細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上存在甘氨酸受體,且在缺氧6h時(shí)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)甘氨酸受體α1表達(dá)明顯增高,說明甘氨酸可以通過與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)甘氨酸受體α1結(jié)合發(fā)揮細(xì)胞保護(hù)作用,其具體機(jī)制仍需進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)研究。
【圖文】：

軟件掃描并測(cè)定灰度值。計(jì)方法統(tǒng)計(jì)分析均采用 SPSS16.0（SPSS 公司，美國）軟件完成，所有檢測(cè)數(shù)據(jù)表示±標(biāo)準(zhǔn)差，所有計(jì)量資料以x± s 表示，每組 3 個(gè)平行重復(fù)（n=3），每種 3 次，所有數(shù)據(jù)不同組間差異采用單因素方差分析（One-way ANOVA），組間用 LSD 檢驗(yàn)法（方差齊），P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。果4.1 大鼠心肌細(xì)胞系 H9C2 細(xì)胞形態(tài)及凋亡情況由圖 1 所示，對(duì)于 Hyp 組，隨著缺氧時(shí)間的增加，心肌細(xì)胞凋亡個(gè)數(shù)逐漸增24h 時(shí)，細(xì)胞出現(xiàn)大面積凋亡。對(duì)于 Gly 組，隨著處理時(shí)間增加，，死亡的細(xì)胞顯變化，說明該濃度下 Gly 對(duì)心肌細(xì)胞的存活無影響。對(duì)于 Hyp + Gly 組，的增加，心肌細(xì)胞凋亡個(gè)數(shù)有所增加，但顯著低于 Hyp 組，說明 Gly 對(duì)缺氧鼠心肌細(xì)胞的凋亡具有明顯保護(hù)作用。

心肌細(xì)胞在缺氧和 Gly 處理后的細(xì)胞凋亡率，( x ±SD，n=3)，**P<0.01氧對(duì)大鼠心肌細(xì)胞 Gly Rα1 表達(dá)影響 所示，缺氧處理大鼠心肌細(xì)胞不同時(shí)間后，Gly Rα1 表達(dá)逐漸24h 和 48h 后，與 0h 相比具有顯著意義（p<0.01）。
【學(xué)位授予單位】：甘肅中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R644

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 陳楚天;陸大祥;戚仁斌;王華東;;甘氨酸受體α_1亞基在乳鼠心肌細(xì)胞的表達(dá)及損害性因素對(duì)其表達(dá)的影響[J];中國病理生理雜志;2015年11期

2 李曉宇;朱旭冬;陳琪;;甘氨酸在心血管疾病中的保護(hù)作用[J];生物化學(xué)與生物物理進(jìn)展;2015年09期

3 彭靖;李騰;呂尚軍;張勇;吳煒;徐淑秀;彭曦;;甘氨酸減輕燒傷大鼠心肌損害的實(shí)驗(yàn)研究[J];重慶醫(yī)學(xué);2012年36期

4 顧捷;白慧茹;崔春霞;孫文娟;;甘氨酸對(duì)大鼠供肝熱缺血再灌注損傷的保護(hù)作用[J];內(nèi)蒙古醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2012年S4期

5 ;Glycine attenuates myocardial ischemia-reperfusion injury by inhibiting myocardial apoptosis in rats[J];Journal of Biomedical Research;2012年05期

6 楊林;聶鑫;姚宏;劉蘭忠;馬東洋;曹健;田文艷;;二甲氧乙二酰甘氨酸對(duì)長(zhǎng)期低氧狀態(tài)下成骨細(xì)胞結(jié)構(gòu)及功能改變的調(diào)控研究[J];西北國防醫(yī)學(xué)雜志;2011年06期

7 關(guān)青;李中言;Soban Uumar;呂士杰;;精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸肽對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子分泌的影響[J];衛(wèi)生研究;2010年01期

8 宋華培;黃躍生;黨永明;張東霞;褚志剛;張瓊;;PI3K/Akt信號(hào)途徑抑制燒傷后大鼠缺血缺氧心肌細(xì)胞凋亡[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2009年01期

9 陳夢(mèng)飛;陸大祥;戚仁斌;王華東;王彥平;張俊艷;李楚杰;;甘氨酸脂質(zhì)體對(duì)心肌細(xì)胞線粒體膜電位及凋亡的影響[J];中國病理生理雜志;2008年07期

10 趙雪;陸大祥;戚仁斌;王華東;王彥平;付詠梅;陳夢(mèng)飛;張俊艷;李楚杰;;甘氨酸受體在甘氨酸抗心肌細(xì)胞缺氧/復(fù)氧損傷中的作用機(jī)制研究[J];中國病理生理雜志;2006年11期

相關(guān)會(huì)議論文 前2條

1 周軍利;黃躍生;宋華培;黨永明;張瓊;;甘氨酸對(duì)缺血缺氧心肌細(xì)胞凋亡的影響[A];第八屆西南五省一市燒傷整形學(xué)術(shù)會(huì)議暨貴州省醫(yī)學(xué)會(huì)燒傷整形分會(huì)2010年學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2010年

2 周軍利;黃躍生;宋華培;黨永明;張瓊;;甘氨酸對(duì)缺血缺氧心肌細(xì)胞凋亡的影響[A];第六屆全國燒傷救治專題研討會(huì)論文匯編[C];2009年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前4條

1 高翔;甘氨酸—氮氧自由基綴合物對(duì)缺血再灌注損傷的保護(hù)作用及其內(nèi)在機(jī)制的研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2017年

2 陳雯;骨骼肌缺血再灌注后心肌損傷的免疫機(jī)理及調(diào)控研究[D];中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院;2013年

3 劉玲;組織激肽釋放酶對(duì)離體缺血/缺氧性損傷的影響及其機(jī)制研究[D];復(fù)旦大學(xué);2009年

4 周軍利;甘氨酸膜受體途徑對(duì)嚴(yán)重?zé)齻笫笮募”Ｗo(hù)效應(yīng)及機(jī)制研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2008年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前3條

1 張紅霞;低氧誘導(dǎo)因子-1α對(duì)大鼠心肌缺血/再灌注細(xì)胞凋亡的抑制作用研究[D];山西醫(yī)科大學(xué);2014年

2 趙雪;甘氨酸受體在心肌細(xì)胞缺氧復(fù)氧損傷中的作用機(jī)制研究[D];暨南大學(xué);2006年

3 劉靖;甘氨酸對(duì)小鼠脂質(zhì)代謝的影響及對(duì)肝脂肪變性的抑制作用[D];暨南大學(xué);2005年

本文編號(hào)：2692452