發(fā)布時(shí)間：2020-05-24 17:09

【摘要】：目的:基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1(SDF-1)是新發(fā)現(xiàn)的一種α趨化因子家族成員。近年來研究發(fā)現(xiàn)SDF-1及其受體CXCR4組成的信號傳導(dǎo)系統(tǒng)在骨折愈合的成骨分化、重塑,礦化和骨髓成骨過程中發(fā)揮著重要作用。有研究表明SDF-1的上位調(diào)控因子HIF-1在顱腦創(chuàng)傷合并骨折愈合中能加速骨折愈合。本實(shí)驗(yàn)通過建立創(chuàng)傷性顱腦損傷后脛骨骨折模型和坐骨神經(jīng)切斷后脛骨骨折模型,來研究SDF-1在失神經(jīng)骨折愈合中的表達(dá)變化和作用機(jī)制。方法:將216只大鼠隨機(jī)分為A組(單純脛骨骨折),B組(創(chuàng)傷性顱腦損傷合并脛骨骨折)和C組(坐骨神經(jīng)切斷合并脛骨骨折)每組各72只。制備單純脛骨骨折,創(chuàng)傷性顱腦損傷(TBI)合并脛骨骨折和坐骨神經(jīng)切斷合并脛骨骨折大鼠模型。各組于術(shù)后3、5、7、14、21、28天處死12只大鼠。其中6只大鼠取下右側(cè)脛骨全長稱量濕重后用于HE染色、免疫組織化學(xué)染色。剩余6只大鼠右側(cè)脛骨標(biāo)本利用RT-PCR技術(shù)檢測骨痂組織中SDF-1表達(dá)水平。結(jié)果:脛骨全長濕重稱量結(jié)果示,術(shù)后各個(gè)時(shí)間點(diǎn)B組脛骨濕重稱量與A組比較,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),而B組脛骨濕重稱量與C組比較,差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。術(shù)后各個(gè)時(shí)間點(diǎn)C組脛骨濕重稱量與A組比較,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。A、B、C三組脛骨濕重均在術(shù)后7天顯著增高并達(dá)到最大值。免疫組織化學(xué)檢測示,B組和C組術(shù)后5d、7d、14d陽性染色的軟骨細(xì)胞數(shù)均高于A組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。術(shù)后21d、28d,對比B組和C組2組與A組中陽性染色的軟骨細(xì)胞數(shù),差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。對比術(shù)后5d B組和C組中陽性染色的軟骨細(xì)胞數(shù),C組高于B組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。對比術(shù)后7d、14d、21d、28d B組和C組中陽性染色的軟骨細(xì)胞數(shù),差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。A組術(shù)后14d、21d陽性表達(dá)的成骨細(xì)胞數(shù)均高于B組和C組,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。對比A組術(shù)后28d與B組和C組中陽性染色的成骨細(xì)胞數(shù),差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。對比術(shù)后14d,B組和C組中陽性染色的成骨細(xì)胞數(shù),C組高于B組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。對比術(shù)后21d、28d B組和C組中陽性染色的成骨細(xì)胞數(shù),差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。RT-PCR檢測示,B組和C組SDF-1 m RNA于術(shù)后3天即有表達(dá)并逐漸升高,于術(shù)后7d均達(dá)到高峰開始下降,術(shù)后28d仍有部分表達(dá);A組SDF-1 m RNA于術(shù)后5天開始大量表達(dá),于術(shù)后14d達(dá)到高峰開始下降,術(shù)后28d仍有部分表達(dá)。術(shù)后3d、5d、7d B組和C組SDF-1 m RNA表達(dá)均明顯高于A組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。術(shù)后14d、21d A組SDF-1 m RNA表達(dá)均高于B組和C組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。術(shù)后28d B組和C組SDF-1 m RNA表達(dá)略高于A組,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。C組SDF-1 m RNA表達(dá)于術(shù)后5d明顯高于B組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。B組SDF-1 m RNA表達(dá)于術(shù)后3d、7d、14d、21d、28d與C組比較,差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:SDF-1在失神經(jīng)骨折愈合早期高表達(dá),它在失神經(jīng)骨折加速愈合過程中扮演著重要的角色,而且可能主要在骨折愈合早期通過募集間充質(zhì)干細(xì)胞、促進(jìn)成骨分化、調(diào)控新生血管形成等方面發(fā)揮作用。
【圖文】：

愈合過程中的表達(dá)變化13圖1 脛骨濕重稱量3.3 HE染色觀察術(shù)后3d和5d，三組大鼠骨折線均清晰可見，骨折斷端及髓腔內(nèi)可見炎性細(xì)胞和纖維組織浸潤。術(shù)后7d(圖2 a、b、c)，三組均形成少量纖維骨痂，可見纖維組織向骨折斷端生長，骨外膜下可見軟骨細(xì)胞和成骨細(xì)胞。B、C組新生軟骨細(xì)胞較A組體積大且排列疏松，成骨細(xì)胞及纖維骨痂也較A組多。術(shù)后14d(圖2 d、e、f)，A組骨折斷段及骨外膜下可見軟骨痂形成，骨痂中軟骨細(xì)胞排列規(guī)則，軟骨痂致密，類骨質(zhì)和新生血管較少。B組骨折斷段及骨外膜下可見軟骨痂形成

3.3 HE染色觀察術(shù)后3d和5d，，三組大鼠骨折線均清晰可見，骨折斷端及髓腔內(nèi)可見炎性細(xì)胞和纖維組織浸潤。術(shù)后7d(圖2 a、b、c)，三組均形成少量纖維骨痂，可見纖維組織向骨折斷端生長，骨外膜下可見軟骨細(xì)胞和成骨細(xì)胞。B、C組新生軟骨細(xì)胞較A組體積大且排列疏松，成骨細(xì)胞及纖維骨痂也較A組多。術(shù)后14d(圖2 d、e、f)，A組骨折斷段及骨外膜下可見軟骨痂形成，骨痂中軟骨細(xì)胞排列規(guī)則，軟骨痂致密，類骨質(zhì)和新生血管較少。B組骨折斷段及骨外膜下可見軟骨痂形成，軟骨細(xì)胞排列疏松
【學(xué)位授予單位】：蘭州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R683.42;R651.15

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2678716