【摘要】：研究目的研究超聲波結合艾灸對兔膝骨性關節(jié)炎(knee osteoarthritis,KOA)模型軟骨、滑膜形態(tài)學變化,以及軟骨、滑膜和滑液內(nèi)血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、基質(zhì)金屬蛋白酶-9(matrixmetalloproteinase-9,MMP-9)和金屬蛋白酶組織抑制劑-1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)表達的影響,明確超聲波結合艾灸治療KOA的療效并探討其可能的作用機制。研究方法1 KOA動物模型建立30只6月齡新西蘭大白兔隨機分為手術組和正常組(E組),手術組24只,E組6只。除E組動物外,其余動物均行右膝關節(jié)前交叉韌帶橫斷術(anterior cruciate ligament transection,ACLT)建立兔 KOA 模型;2實驗動物分組術后再將手術組隨機分為超聲波結合艾灸組(A組)、艾灸組(B組)、超聲波組(C組)和模型組(D組),每組各6只;3實驗干預術后6周,除D組和E組外,分別對A組、B組、C組分別給予超聲波結合艾灸、艾灸和超聲波治療2周;4實取材cwg 治療結束后,行空氣栓塞法處死動物。采集樣本,肉眼觀察軟骨、滑膜的表觀形態(tài);5指標檢測采用蘇木精-伊紅(hematoxylin-eosin staining,HE)染色,光鏡下觀察滑膜、軟骨組織形態(tài)學;通過免疫組化檢測軟骨、滑膜細胞VEGF、MMP-9、TIMP-1的表達,免疫印跡法(westernblotting,WB)檢測各組軟骨組織中MMP-9,滑液VEGF、MMP-9、TIMP-1的蛋白表達情況;實時熒光定量聚合酶鏈反應(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)檢測軟骨中 VEGFmRNA、MMP-9mRNA,以及滑液VEGFmRNA的表達。研究結果1肉眼觀察軟骨、滑膜的表觀形態(tài):與E組相比,A組、B組、C組、D組出現(xiàn)不同程度的骨性關節(jié)炎和滑膜炎組織形態(tài)學變化的表現(xiàn),但A組、B組、C組的軟骨表面退性行改變和滑膜炎癥明顯輕于D組。2軟骨、滑膜HE染色評分結果:A組、B組、C組、D組的軟骨、滑膜評分均高于E組,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05);A組、B組、C組軟骨、滑膜評分低于D組,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05);A組、B組、C組軟骨、滑膜評分組間比較,差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。3軟骨細胞和滑膜細胞免疫組化陽性表達光密度值(indicator optic density,IOD)比較:與E組相比,A組、B組、C組、D組的軟骨細胞VEGF、MMP-9、TIMP-1和滑膜細胞VEGF、MMP-9、TIMP-1的IOD值均升高,差異均有統(tǒng)計學意義(P0.05);與D組比較,A組、B組、C組軟骨細胞VEGF、MMP-9、TIMP-1和滑膜細胞VEGF、MMP-9、TIMP-1的IOD值降低,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05);A組、B組、C組軟骨細胞MMP-9、TIMP-1和滑膜細胞VEGF、MMP-9、TIMP-1的IOD值組間比較,差異無統(tǒng)計學意義(P0.05);A組、B組、C組的軟骨細胞VEGF的IOD值組間比較,A組與B組、B組與C軟骨細胞VEGF的IOD值比較,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)而A組與C組軟骨細胞VEGF的IOD值差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。4 WB檢測結果:與E組相比,A組、B組、C組、D組的軟骨MMP-9和滑液VEGF、MMP-9、TIMP-1蛋白含量升高,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05);與D組相比,A組、B組、C組的軟骨MMP-9和滑液VEGF、MMP-9、TIMP-1蛋白含量降低,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05);A組、B組、C組軟骨MMP-9和滑液VEGF、MMP-9、TIMP-1蛋白含量組間比較,差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。5 RT-qPCR檢測結果:與E組相比,A組、B組、C組、D組中MMP-9和VEGF mRNA在軟骨中的表達升高,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05);與D組相比,A組、B組、C組軟骨中MMP-9和VEGF mRNA的表達低于D組,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05);A組、B組、C組軟骨中MMP-9和VEGF mRNA表達組間比較,差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。與E組比較,A組、B組、C組、D組中VEGF mRNA在滑液中表達顯著升高,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05);與D組比較,A組、B組、C組滑液中VEGF mRNA表達顯著降低,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05);A組、B組、C組滑液中VEGF mRNA表達組間比較,C組中VEGF mRNA的表達低于B組,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05),A組中VEGF mRNA的表達低于C組,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05),A組中VEGF mRNA的表達低于B組,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。結論1超聲波結合艾灸以及單純艾灸或超聲波治療均能延緩兔KOA軟骨退變和減輕滑膜炎癥。2超聲波結合艾灸以及單純艾灸或超聲波在治療兔KOA的效果上無明顯差異,但兩者結合可能對骨關節(jié)的不同組織作用有異于單純超聲波或單純艾灸治療。臨床上在選擇KOA中西醫(yī)物理因子療法治療KOA時可能單純選擇超聲波或艾灸中的一種方法即可,而無需多種理療方法綜合,可為今后進一步精準選擇理療方法治療KOA提供一定參考依據(jù),但今后仍需進一步研究。3超聲波、艾灸可能是通過抑制軟骨、滑液、滑膜VEGF、MMP-9、TIMP-1的表達來延緩軟骨退變以及減輕滑膜、滑液炎癥,從而起到治療兔KOA的作用。
【圖文】：

２各組組織形態(tài)學大體肉眼觀察逡逑２．１各組軟骨表面肉眼觀察比較逡逑軟骨表面形態(tài)肉眼觀察比較（圖３－１，表３－１）：超聲波結合艾灸組：軟骨表面稍不逡逑平整，色偏淡白，稍有光澤，透明度尚可，部分可見龜裂；艾灸組：軟骨表面粗糙色白，逡逑光澤度稍低，，透明度差，軟骨表面部分可見小潰瘍；超聲波組：軟骨表面粗糙，稍透亮，逡逑顏色淡藍偏白，部分可見裂隙；模型組：軟骨表面暗淡粗糙，變薄，部分甚至糜爛；正逡逑常組：軟骨呈乳白色，表面光滑透亮。逡逑，」ｗ逡逑超聲波結合艾灸組邐艾灸組邐超聲波組逡逑模型組邐正常組逡逑圖３－１各組股骨髁軟骨表面形態(tài)肉眼觀察比較逡逑軟骨表面形態(tài)肉眼觀察評分結果比較（表３－１）：超聲波結合艾灸組、艾灸組、超逡逑聲波組、模型組軟骨評分均高于正常組，差異均有統(tǒng)計學意義（Ｐ＜０．０１，Ｐ＜０．０１，Ｐ＜０．０１，逡逑１５逡逑

模型組邐正常組逡逑圖３－２各組滑膜形態(tài)肉眼觀察比較逡逑３各組組織染色及評分比較逡逑３．１各組軟骨組織ＨＥ染色及其改良Ｍａｎｋｉｎ評分比較逡逑軟骨組織ＨＥ染色光鏡下觀察結果比較（圖３－３）：超聲波結合艾灸組：軟骨細胞逡逑較超聲波組和艾灸組增多，排列較規(guī)整，偶見潮線不規(guī)則，少見失染現(xiàn)象；艾灸組：軟逡逑骨細胞有較多增殖，且多余比模型組，排列較整齊，部分可見微小裂隙，潮線不齊或中逡逑斷，輕染的現(xiàn)象；超聲波組：軟骨細胞稍微減少且排列稍紊亂，軟骨表層不平整，部分逡逑可見小裂隙，潮線稍不齊或中斷，失染的現(xiàn)象；模型組組：軟骨表層部分可見纖維化，逡逑軟骨細胞減少，細胞排列紊亂，有細胞簇聚，染色不均或失染，潮線中斷或消失的現(xiàn)象逡逑發(fā)生；正常組：軟骨細胞結構正常，基本無形變，潮線完整，各層均染無失染。逡逑■W■逡逑超聲波結合艾灸組邐艾灸組邐超聲波組逡逑：＾Ｉ逡逑模型組邐正常組逡逑圖３－３各組軟骨ＨＥ染色光鏡下觀察形態(tài)學比較（ｘ２０
【學位授予單位】：福建中醫(yī)藥大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R684.3

【參考文獻】

相關期刊論文 前10條

1 樊思琴;李珊;梁杰;林如輝;羅慶祿;;超聲導入復方三七消痛軟膏對兔膝骨性關節(jié)炎滑膜形態(tài)和軟骨細胞caspase-9、XIAP表達的影響[J];北京中醫(yī)藥大學學報;2017年09期

2 葛瑞英;;溫針灸聯(lián)合超聲波治療膝骨性關節(jié)炎療效分析[J];亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥;2017年15期

3 陳達;彭力平;廖州偉;李媛;胡烈奎;余闐;馬篤軍;;木瓜蛋白酶與石膏制動建立兔膝骨關節(jié)炎模型的比較[J];廣東醫(yī)學;2017年14期

4 孫士全;譚濤;;針灸治療膝骨關節(jié)炎的作用機制探討[J];中國醫(yī)藥導報;2017年10期

5 何堅;梁杰;羅慶祿;柳維林;林如輝;;復方三七消痛軟膏超聲導入對兔膝骨性關節(jié)炎治療作用及機制研究[J];中國中醫(yī)基礎醫(yī)學雜志;2017年02期

6 陳白露;彭麒;熊燕;白玉;王丹;武平;;艾灸對實驗性RA家兔滑膜HIF-1α/VEGF的調(diào)節(jié)作用[J];時珍國醫(yī)國藥;2016年12期

7 張馳;王樸;劉遄;雒曉甜;何成奇;;不同動物膝骨關節(jié)炎造模和模型病理學評估的研究進展[J];中華物理醫(yī)學與康復雜志;2016年10期

8 張承舜;呂鵬;唐勇;尹海燕;陳莎莎;周薇;左川弋;雷茹雪;岳運青;吳巧鳳;羅玲;余曙光;;艾灸光效應研究進展及展望[J];成都中醫(yī)藥大學學報;2016年03期

9 呂蘇梅;張瑞麗;;中老年膝骨關節(jié)炎的流行病學研究進展[J];中國老年學雜志;2016年16期

10 沈士浩;程凱;林強;夏鵬;高明霞;任莎莎;李雪萍;;低強度脈沖超聲波對兔膝骨性關節(jié)炎軟骨整合素-FAK-MAPKs信號通路蛋白表達的影響[J];中國康復醫(yī)學雜志;2016年02期

相關碩士學位論文 前2條

1 李姍;超聲導入復方三七消痛軟膏對兔膝骨性關節(jié)炎軟骨細胞caspase-3、caspase-9及XIAP表達的影響[D];福建中醫(yī)藥大學;2016年

2 王文博;赤木洗劑低強度超聲波導入治療早中期膝骨性關節(jié)炎的臨床療效觀察[D];福建中醫(yī)藥大學;2015年

本文編號：2667626