【摘要】：研究目的研究超聲波結(jié)合艾灸對兔膝骨性關(guān)節(jié)炎(knee osteoarthritis,KOA)模型軟骨、滑膜形態(tài)學(xué)變化,以及軟骨、滑膜和滑液內(nèi)血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、基質(zhì)金屬蛋白酶-9(matrixmetalloproteinase-9,MMP-9)和金屬蛋白酶組織抑制劑-1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)表達(dá)的影響,明確超聲波結(jié)合艾灸治療KOA的療效并探討其可能的作用機(jī)制。研究方法1 KOA動物模型建立30只6月齡新西蘭大白兔隨機(jī)分為手術(shù)組和正常組(E組),手術(shù)組24只,E組6只。除E組動物外,其余動物均行右膝關(guān)節(jié)前交叉韌帶橫斷術(shù)(anterior cruciate ligament transection,ACLT)建立兔 KOA 模型;2實驗動物分組術(shù)后再將手術(shù)組隨機(jī)分為超聲波結(jié)合艾灸組(A組)、艾灸組(B組)、超聲波組(C組)和模型組(D組),每組各6只;3實驗干預(yù)術(shù)后6周,除D組和E組外,分別對A組、B組、C組分別給予超聲波結(jié)合艾灸、艾灸和超聲波治療2周;4實取材cwg 治療結(jié)束后,行空氣栓塞法處死動物。采集樣本,肉眼觀察軟骨、滑膜的表觀形態(tài);5指標(biāo)檢測采用蘇木精-伊紅(hematoxylin-eosin staining,HE)染色,光鏡下觀察滑膜、軟骨組織形態(tài)學(xué);通過免疫組化檢測軟骨、滑膜細(xì)胞VEGF、MMP-9、TIMP-1的表達(dá),免疫印跡法(westernblotting,WB)檢測各組軟骨組織中MMP-9,滑液VEGF、MMP-9、TIMP-1的蛋白表達(dá)情況;實時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)檢測軟骨中 VEGFmRNA、MMP-9mRNA,以及滑液VEGFmRNA的表達(dá)。研究結(jié)果1肉眼觀察軟骨、滑膜的表觀形態(tài):與E組相比,A組、B組、C組、D組出現(xiàn)不同程度的骨性關(guān)節(jié)炎和滑膜炎組織形態(tài)學(xué)變化的表現(xiàn),但A組、B組、C組的軟骨表面退性行改變和滑膜炎癥明顯輕于D組。2軟骨、滑膜HE染色評分結(jié)果:A組、B組、C組、D組的軟骨、滑膜評分均高于E組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);A組、B組、C組軟骨、滑膜評分低于D組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);A組、B組、C組軟骨、滑膜評分組間比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。3軟骨細(xì)胞和滑膜細(xì)胞免疫組化陽性表達(dá)光密度值(indicator optic density,IOD)比較:與E組相比,A組、B組、C組、D組的軟骨細(xì)胞VEGF、MMP-9、TIMP-1和滑膜細(xì)胞VEGF、MMP-9、TIMP-1的IOD值均升高,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);與D組比較,A組、B組、C組軟骨細(xì)胞VEGF、MMP-9、TIMP-1和滑膜細(xì)胞VEGF、MMP-9、TIMP-1的IOD值降低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);A組、B組、C組軟骨細(xì)胞MMP-9、TIMP-1和滑膜細(xì)胞VEGF、MMP-9、TIMP-1的IOD值組間比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);A組、B組、C組的軟骨細(xì)胞VEGF的IOD值組間比較,A組與B組、B組與C軟骨細(xì)胞VEGF的IOD值比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)而A組與C組軟骨細(xì)胞VEGF的IOD值差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。4 WB檢測結(jié)果:與E組相比,A組、B組、C組、D組的軟骨MMP-9和滑液VEGF、MMP-9、TIMP-1蛋白含量升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);與D組相比,A組、B組、C組的軟骨MMP-9和滑液VEGF、MMP-9、TIMP-1蛋白含量降低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);A組、B組、C組軟骨MMP-9和滑液VEGF、MMP-9、TIMP-1蛋白含量組間比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。5 RT-qPCR檢測結(jié)果:與E組相比,A組、B組、C組、D組中MMP-9和VEGF mRNA在軟骨中的表達(dá)升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);與D組相比,A組、B組、C組軟骨中MMP-9和VEGF mRNA的表達(dá)低于D組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);A組、B組、C組軟骨中MMP-9和VEGF mRNA表達(dá)組間比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。與E組比較,A組、B組、C組、D組中VEGF mRNA在滑液中表達(dá)顯著升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);與D組比較,A組、B組、C組滑液中VEGF mRNA表達(dá)顯著降低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);A組、B組、C組滑液中VEGF mRNA表達(dá)組間比較,C組中VEGF mRNA的表達(dá)低于B組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),A組中VEGF mRNA的表達(dá)低于C組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),A組中VEGF mRNA的表達(dá)低于B組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論1超聲波結(jié)合艾灸以及單純艾灸或超聲波治療均能延緩?fù)肒OA軟骨退變和減輕滑膜炎癥。2超聲波結(jié)合艾灸以及單純艾灸或超聲波在治療兔KOA的效果上無明顯差異,但兩者結(jié)合可能對骨關(guān)節(jié)的不同組織作用有異于單純超聲波或單純艾灸治療。臨床上在選擇KOA中西醫(yī)物理因子療法治療KOA時可能單純選擇超聲波或艾灸中的一種方法即可,而無需多種理療方法綜合,可為今后進(jìn)一步精準(zhǔn)選擇理療方法治療KOA提供一定參考依據(jù),但今后仍需進(jìn)一步研究。3超聲波、艾灸可能是通過抑制軟骨、滑液、滑膜VEGF、MMP-9、TIMP-1的表達(dá)來延緩軟骨退變以及減輕滑膜、滑液炎癥,從而起到治療兔KOA的作用。
【圖文】：

２各組組織形態(tài)學(xué)大體肉眼觀察逡逑２．１各組軟骨表面肉眼觀察比較逡逑軟骨表面形態(tài)肉眼觀察比較（圖３－１，表３－１）：超聲波結(jié)合艾灸組：軟骨表面稍不逡逑平整，色偏淡白，稍有光澤，透明度尚可，部分可見龜裂；艾灸組：軟骨表面粗糙色白，逡逑光澤度稍低，，透明度差，軟骨表面部分可見小潰瘍；超聲波組：軟骨表面粗糙，稍透亮，逡逑顏色淡藍(lán)偏白，部分可見裂隙；模型組：軟骨表面暗淡粗糙，變薄，部分甚至糜爛；正逡逑常組：軟骨呈乳白色，表面光滑透亮。逡逑，」ｗ逡逑超聲波結(jié)合艾灸組邐艾灸組邐超聲波組逡逑模型組邐正常組逡逑圖３－１各組股骨髁軟骨表面形態(tài)肉眼觀察比較逡逑軟骨表面形態(tài)肉眼觀察評分結(jié)果比較（表３－１）：超聲波結(jié)合艾灸組、艾灸組、超逡逑聲波組、模型組軟骨評分均高于正常組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（Ｐ＜０．０１，Ｐ＜０．０１，Ｐ＜０．０１，逡逑１５逡逑

模型組邐正常組逡逑圖３－２各組滑膜形態(tài)肉眼觀察比較逡逑３各組組織染色及評分比較逡逑３．１各組軟骨組織ＨＥ染色及其改良Ｍａｎｋｉｎ評分比較逡逑軟骨組織ＨＥ染色光鏡下觀察結(jié)果比較（圖３－３）：超聲波結(jié)合艾灸組：軟骨細(xì)胞逡逑較超聲波組和艾灸組增多，排列較規(guī)整，偶見潮線不規(guī)則，少見失染現(xiàn)象；艾灸組：軟逡逑骨細(xì)胞有較多增殖，且多余比模型組，排列較整齊，部分可見微小裂隙，潮線不齊或中逡逑斷，輕染的現(xiàn)象；超聲波組：軟骨細(xì)胞稍微減少且排列稍紊亂，軟骨表層不平整，部分逡逑可見小裂隙，潮線稍不齊或中斷，失染的現(xiàn)象；模型組組：軟骨表層部分可見纖維化，逡逑軟骨細(xì)胞減少，細(xì)胞排列紊亂，有細(xì)胞簇聚，染色不均或失染，潮線中斷或消失的現(xiàn)象逡逑發(fā)生；正常組：軟骨細(xì)胞結(jié)構(gòu)正常，基本無形變，潮線完整，各層均染無失染。逡逑■W■逡逑超聲波結(jié)合艾灸組邐艾灸組邐超聲波組逡逑：＾Ｉ逡逑模型組邐正常組逡逑圖３－３各組軟骨ＨＥ染色光鏡下觀察形態(tài)學(xué)比較（ｘ２０
【學(xué)位授予單位】：福建中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R684.3

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 樊思琴;李珊;梁杰;林如輝;羅慶祿;;超聲導(dǎo)入復(fù)方三七消痛軟膏對兔膝骨性關(guān)節(jié)炎滑膜形態(tài)和軟骨細(xì)胞caspase-9、XIAP表達(dá)的影響[J];北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報;2017年09期

2 葛瑞英;;溫針灸聯(lián)合超聲波治療膝骨性關(guān)節(jié)炎療效分析[J];亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥;2017年15期

3 陳達(dá);彭力平;廖州偉;李媛;胡烈奎;余闐;馬篤軍;;木瓜蛋白酶與石膏制動建立兔膝骨關(guān)節(jié)炎模型的比較[J];廣東醫(yī)學(xué);2017年14期

4 孫士全;譚濤;;針灸治療膝骨關(guān)節(jié)炎的作用機(jī)制探討[J];中國醫(yī)藥導(dǎo)報;2017年10期

5 何堅;梁杰;羅慶祿;柳維林;林如輝;;復(fù)方三七消痛軟膏超聲導(dǎo)入對兔膝骨性關(guān)節(jié)炎治療作用及機(jī)制研究[J];中國中醫(yī)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)雜志;2017年02期

6 陳白露;彭麒;熊燕;白玉;王丹;武平;;艾灸對實驗性RA家兔滑膜HIF-1α/VEGF的調(diào)節(jié)作用[J];時珍國醫(yī)國藥;2016年12期

7 張馳;王樸;劉遄;雒曉甜;何成奇;;不同動物膝骨關(guān)節(jié)炎造模和模型病理學(xué)評估的研究進(jìn)展[J];中華物理醫(yī)學(xué)與康復(fù)雜志;2016年10期

8 張承舜;呂鵬;唐勇;尹海燕;陳莎莎;周薇;左川弋;雷茹雪;岳運(yùn)青;吳巧鳳;羅玲;余曙光;;艾灸光效應(yīng)研究進(jìn)展及展望[J];成都中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報;2016年03期

9 呂蘇梅;張瑞麗;;中老年膝骨關(guān)節(jié)炎的流行病學(xué)研究進(jìn)展[J];中國老年學(xué)雜志;2016年16期

10 沈士浩;程凱;林強(qiáng);夏鵬;高明霞;任莎莎;李雪萍;;低強(qiáng)度脈沖超聲波對兔膝骨性關(guān)節(jié)炎軟骨整合素-FAK-MAPKs信號通路蛋白表達(dá)的影響[J];中國康復(fù)醫(yī)學(xué)雜志;2016年02期

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前2條

1 李姍;超聲導(dǎo)入復(fù)方三七消痛軟膏對兔膝骨性關(guān)節(jié)炎軟骨細(xì)胞caspase-3、caspase-9及XIAP表達(dá)的影響[D];福建中醫(yī)藥大學(xué);2016年

2 王文博;赤木洗劑低強(qiáng)度超聲波導(dǎo)入治療早中期膝骨性關(guān)節(jié)炎的臨床療效觀察[D];福建中醫(yī)藥大學(xué);2015年

本文編號：2667626