本文關(guān)鍵詞：MicroRNA-638表達(dá)對(duì)人骨肉瘤細(xì)胞增殖的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：【背景】在兒童和青少年人群中最常見的惡性骨腫瘤是骨肉瘤,骨肉瘤具有增殖速度快,易耐藥的特點(diǎn),使得骨肉瘤在臨床上的死亡率和致殘率都很高。微小RNA(microRNA,miRNA)是腫瘤分子生物學(xué)研究領(lǐng)域的熱點(diǎn),在腫瘤的發(fā)生發(fā)展過程中有著舉足輕重的作用�，F(xiàn)研究發(fā)現(xiàn)血清/血漿中存在上百種miRNA,這些miRNA與一些腫瘤疾病特異性存在一定聯(lián)系,因此在腫瘤的診斷、治療及預(yù)后監(jiān)測(cè)方面有一定的應(yīng)用價(jià)值。近期研究表明,miRNA在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移過程中起重要作用。本實(shí)驗(yàn)以miRNA-638為研究對(duì)象,觀察其在骨肉瘤組織中的表達(dá)及對(duì)骨肉瘤細(xì)胞系MG63及U2OS增殖的影響�！灸康摹客ㄟ^觀察miRNA-638(MicroRNA-638)對(duì)人骨肉瘤(Osteosarcoma,OS)細(xì)胞增殖帶來的變化,探討miRNA-638在骨肉瘤細(xì)胞增殖行為中的作用�！痉椒ā�(1)用64對(duì)骨肉瘤組織和癌旁組織,以及骨肉瘤MG63、U2OS、HOS、SaOS2細(xì)胞株中和正常人成骨NHOst細(xì)胞株作為研究對(duì)象,通過實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈反應(yīng)(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)檢測(cè)miRNA-638在上述組織和細(xì)胞中的表達(dá)。(2)使用LipofectamineTM2000轉(zhuǎn)染miRNA-638 mimic或inhibitor,達(dá)到上調(diào)或下調(diào)mg63及u2os細(xì)胞內(nèi)mirna-638的效果。(3)使用cck-8分別檢測(cè)轉(zhuǎn)染24h、48h、72h、96h后的吸光光度值。(4)使用平板克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)培養(yǎng)2周后在倒置顯微鏡計(jì)數(shù)超過30個(gè)細(xì)胞的菌落�！窘Y(jié)果】(1)mirna-638在人骨肉瘤組織、癌旁組織、多種骨肉瘤細(xì)胞株中及正常人成骨細(xì)胞株中的表達(dá):用實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈反應(yīng)的方法檢查出64組骨肉瘤組織中成熟的mirna-638的表達(dá)水平。結(jié)果顯示與配對(duì)的癌旁組織相比有36組(56.25%)骨肉瘤組織中mirna-638的表達(dá)是下調(diào)的(p0.001)。實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)分別檢測(cè)骨肉瘤mg63、u2os、hos、saos2細(xì)胞株和nhost細(xì)胞株中的mirna-638的表達(dá)水平,結(jié)果提示在骨肉瘤細(xì)胞株中mir-638的表達(dá)明顯下調(diào)(p0.05)。(2)cck-8與平板克隆形成實(shí)驗(yàn):cck-8實(shí)驗(yàn)顯示了mirna-638能抑制骨肉瘤mg63和u2os細(xì)胞的增殖(p0.05),相反,抑制mirna-638表達(dá)顯著促進(jìn)了mg63和u2os細(xì)胞的生長(zhǎng)(p0.05)。平板克隆形成實(shí)驗(yàn)也證實(shí)了mirna-638的高表達(dá)能顯著降低mg63和u2os細(xì)胞的生長(zhǎng)率(p0.05)�！窘Y(jié)論】(1)mirna-638在人骨肉瘤組織及骨肉瘤mg63、u2os、hos、saos2細(xì)胞株中的表達(dá)下調(diào)。(2)miRNA-638高表達(dá)能抑制人骨肉瘤細(xì)胞的增殖
【關(guān)鍵詞】：人骨肉瘤 MG63 U2OS MicroRNA-638 細(xì)胞增殖
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R738.1
【目錄】：

• 摘要4-7
• Abstract7-10
• 主要中英文縮略語索引10-12
• 第1章 緒論12-16
• 第2章 實(shí)驗(yàn)材料16-18
• 2.1 組織與細(xì)胞16
• 2.2 主要試劑16-17
• 2.3 主要實(shí)驗(yàn)儀器17-18
• 第3章 實(shí)驗(yàn)方法18-24
• 3.1 實(shí)驗(yàn)分組18
• 3.2 骨肉瘤細(xì)胞的培養(yǎng)18-19
• 3.3 qRT-PCR檢測(cè)骨肉瘤、癌旁組織及細(xì)胞中miRNA638的表達(dá)19-20
• 3.4 CCK-8 及平板克隆形成實(shí)驗(yàn)20-22
• 3.5 數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計(jì)學(xué)分析22-24
• 第4章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果24-30
• 4.1 qRT-PCR實(shí)驗(yàn)檢測(cè)骨肉瘤組織、癌旁組織、骨肉瘤細(xì)胞及正常人骨細(xì)胞中成熟的 miRNA-638的表達(dá)水平24-25
• 4.2 CCK-8實(shí)驗(yàn)檢測(cè)miRNA-638的高表達(dá)或低表達(dá)對(duì)骨肉瘤MG63及 U2OS 細(xì)胞的增殖能力的影響25-27
• 4.3 平板克隆實(shí)驗(yàn)檢測(cè)高表達(dá)miRNA-638對(duì)骨肉瘤MG63及U2OS 細(xì)胞的集落形成能力的影響27-30
• 第5章 討論30-36
• 第6章 結(jié)論36-38
• 參考文獻(xiàn)38-46
• 綜述46-54
• 參考文獻(xiàn)50-54
• 作者攻讀學(xué)位期間的科研成果54-56
• 致謝56

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1 王臻,呂昌偉,李立文,彭磊,郭剛,曹云新,李雪松;人骨肉瘤融合瘤的快速制備及其體外的免疫效應(yīng)[J];中國骨腫瘤骨病;2002年06期

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4 熊偉,陳t

本文編號(hào)：266581