【摘要】：目的探索人參皂甙Rg1對星形膠質細胞轉分化為神經元樣細胞的影響。方法首先制備SD大鼠脊髓損傷模型,一周后切取脊髓損傷組織,消化離心后用ACM(星形膠質細胞條件培養(yǎng)基)培養(yǎng)細胞,實驗分成兩組,一組在ACM中加入人參皂甙Rg1聯合培養(yǎng),另一組設為空白對照,一周后待細胞形成神經球后加入神經干細胞分化液自然分化,倒置顯微鏡觀察兩組中細胞生長形態(tài);免疫熒光鑒定兩組中神經球nestin及GFAP的表達及誘導分化后細胞的MAP-2陽性表達率;Western Blot檢測兩組細胞轉分化培養(yǎng)過程中nestin及MAP-2蛋白表達量的差異。結果兩組中均能培養(yǎng)出神經球,經免疫熒光雙標鑒定兩組神經球均同時表達nestin/GFAP,以及誘導分化的細胞后均可見MAP-2陽性表達,但兩組中MAP-2陽性表達率不同,Rg1組為(4.39±1.00)%,而對照組為(2.63±0.76)%,統(tǒng)計學檢測P0.05,提示Rg1組分化為神經元的潛能較對照組增高。Western Blot檢測提示Rg1可以促進星形膠質細胞損傷后nestin的表達,以及分化后MAP-2的表達。結論人參皂甙Rg1可促進星形膠質細胞轉分化形成神經元樣細胞,為臨床治療脊髓損傷提供新的思路。
【圖文】：

人參皂甙 Rg1 促進星形膠質細胞向神經元轉分化的實驗研究 結 果結 果一、神經球的形態(tài)觀察原代星形膠質細胞放置培養(yǎng)板中培養(yǎng) 2d 后，實驗組及對照組中均可見細胞聚集現象，呈現大小不一的懸浮細胞團塊，同時可以看到少許部分細胞貼壁生長。培養(yǎng)約一周時，可見兩組中懸浮細胞團塊變大，形態(tài)接近球形，周圍折光性強，即神經球產生。兩組間神經球形態(tài)、大小近似相同，未見明顯區(qū)別。如圖 1 所示。

人參皂甙 Rg1 促進星形膠質細胞向神經元轉分化的實驗研究 結 果三、人參皂甙 Rg1 促進星形膠質細胞轉分化形成的神經元收集 Rg1 組及對照組中培養(yǎng)一周后形成的神經球，將神經球吹打成單細胞懸液用神經干細胞培養(yǎng)基培養(yǎng)，經細胞計數后，，均勻接種在多聚賴氨酸包被的蓋玻片上培養(yǎng)一周。待細胞鋪滿蓋玻片后經 MAP-2 免疫熒光和 DAPI 染核測定，結果顯示 Rg1組及對照組中均能看到 MAP-2 陽性表達細胞，隨機每組記錄 5 個視野，陽性細胞比例=陽性細胞數/總細胞數來初步計算得知，測得 Rg1 組中細胞分化為神經元比例為( 4.39 ±1.00) %，對照組中相對較少，測得比例為( 2.63 ±0.76) %。有提高的趨勢，( P＜0.05，n=5) 。如圖 3 所示。
【學位授予單位】：蘇州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R651.2

【參考文獻】

相關期刊論文 前1條

1 郭維瀟;陸政峰;成茂華;沈憶新;唐胤堯;劉以禮;;人參皂甙Rg1對嗅鞘細胞遷移能力的影響[J];中華實驗外科雜志;2015年07期

相關博士學位論文 前1條

1 陸政峰;人參皂甙Rg1強化嗅鞘細胞生物學行為的實驗研究[D];蘇州大學;2010年

本文編號：2665396