【摘要】：目的:應(yīng)用器械打磨法建立脊髓損傷經(jīng)神經(jīng)根途徑重建排便功能動(dòng)物模型并檢測(cè)其有效性;并通過(guò)多種技術(shù)定位大鼠排便高級(jí)中樞;運(yùn)用微電極刺激檢測(cè)脊髓損傷排便功能重建后腦功能重塑的變化。方法:選取成年雌性SD大鼠作為研究對(duì)象,通過(guò)器械打磨法建立雙側(cè)L5--S1前后根移位動(dòng)物模型,同時(shí)修復(fù)運(yùn)動(dòng)和感覺(jué)神經(jīng)重建脊髓損傷后排便功能,并通過(guò)形態(tài)學(xué)與功能學(xué)檢測(cè)其有效性;通過(guò)功能核磁共振、PRV神經(jīng)逆行示蹤及微電極刺激定位大鼠排便高級(jí)中樞;以正常大鼠微電極刺激檢測(cè)作為正常對(duì)照,分別對(duì)脊髓排便功能重建術(shù)后1月、6月、12月進(jìn)行腦部微電極刺激觀察其動(dòng)態(tài)重塑性變化過(guò)程。結(jié)果:器械打磨法具有更短手術(shù)時(shí)間及更少術(shù)中出血量,且術(shù)后存活率高;通過(guò)PRV逆行示蹤對(duì)動(dòng)物模型檢測(cè)發(fā)現(xiàn)吻合口近端有示蹤陽(yáng)性的綠色熒光表達(dá),甲苯胺藍(lán)染色和電鏡檢測(cè)均發(fā)現(xiàn)吻合口處有神經(jīng)纖維再生,肛管直腸電生理檢測(cè)顯示動(dòng)物模型肛管測(cè)壓可恢復(fù)到正常大鼠L5與S1水平,從而證實(shí)器械打磨法行雙側(cè)L5--S1前后根移位重建脊髓損傷排便功能是可行且有效的方法。大鼠排便高級(jí)中樞主要分布于中腦導(dǎo)水管周圍灰質(zhì)(PAG)及腦干內(nèi)Barrington氏神經(jīng)核團(tuán)(Bar),并與腦部丘腦、中腦、大腦皮層等多核團(tuán)共同調(diào)節(jié)大鼠的排便功能。微電極刺激顯示在造模術(shù)后1月出現(xiàn)了明顯的排便中樞抑制現(xiàn)象,術(shù)后6月對(duì)排便功能出現(xiàn)了部分再支配;而在術(shù)后12月模型鼠腦部相應(yīng)的區(qū)域又由抑制變?yōu)槿ヒ种啤＝Y(jié)論:神經(jīng)根移位為脊髓損傷后排便功能重建提供了可行性,并可通過(guò)腦功能重塑實(shí)現(xiàn)排便功能的再支配。實(shí)驗(yàn)結(jié)果為研究脊髓損傷自主排便功能的實(shí)現(xiàn)奠定了實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
【圖文】：

1.3 結(jié)果實(shí)驗(yàn)組建模所需手術(shù)時(shí)間為（93.05 ± 7.60）min，較對(duì)照組（131.30 ± 11.68）min 明顯縮短，，且具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（t=12.279，P<0.001）；實(shí)驗(yàn)組建模時(shí)術(shù)中出血量為（4.33 ± 0.46）ml，明顯低于對(duì)照組的（7.36 ± 0.58）ml，且具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（t=18.293，P<0.001）。術(shù)后 3 天，傳統(tǒng)鉗咬法建模存活 12 只大鼠，存活率達(dá) 60%；動(dòng)物模型術(shù)后當(dāng)日死亡 1 只，術(shù)后第 1 天死亡 5 只，術(shù)后第 2 天死亡2 只，死亡主要原因考慮與手術(shù)暴露損傷過(guò)大及術(shù)中出血過(guò)多有關(guān)。器械打磨法建模存活 18 只大鼠，存活率達(dá)到 90%；動(dòng)物模型術(shù)后第 1 天與術(shù)后第 3 天分別死亡 1 只，考慮死亡原因與術(shù)中出血過(guò)多及術(shù)后感染有關(guān)。兩組術(shù)后 3 天大鼠存活率比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（χ2=4.800，P=0.028）。（表 1-1）

gure 3-1 Equipment of 7.0 T MRI. Perform fMRI scans and collect data.圖 3-1 7.0T MRI 儀器。 進(jìn)行 fMRI 掃描并收集數(shù)據(jù)。 逆行示蹤檢測(cè)康成年雌性 SD 大鼠（200-250g）10 只進(jìn)行 PRV-CMW-Mrfp 用 3%戊巴比妥鈉（40mg/kg）腹腔注射麻醉后仰臥位固定于鼠消毒、鋪巾，取下腹部正中切口暴露大鼠肛管直腸，顯微鏡下射器穿破直腸肛管壁粘膜層下將 3ul PRV（1.0×108pf/ml）分 3 點(diǎn)不能穿破直腸肛管壁以免無(wú)效注射，且每次注射完畢時(shí)應(yīng)留滯止 PRV 從注射處溢出。注射 PRV 后縫合傷口烤燈復(fù)蘇后將大下飼養(yǎng) 5 天。5 天后采取同樣的麻醉方式，手術(shù)暴露心臟，先使耳無(wú)血液流出后再行 4%多聚甲醛灌注，灌注至合適后顯微鏡o
【學(xué)位授予單位】：上海交通大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R651.2

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2665390