【摘要】：下丘腦或垂體功能紊亂常見于下丘腦及其臨近區(qū)域病變或手術后出現(xiàn)。其中典型并發(fā)癥之一是中樞性尿崩癥(CDI),其特征為水電解質、垂體后葉激素紊亂。盡管有不少維持內(nèi)環(huán)境平衡的治療方案,但患者仍處于嚴重內(nèi)環(huán)境紊亂風險,可導致死亡或慢性進展的轉歸。在臨床實踐中發(fā)現(xiàn),部分患者可在術后CDI中恢復。類似地,在垂體損傷所致的CDI的哺乳動物中也觀察到此現(xiàn)象。然而,恢復的機制及規(guī)律仍未闡明。為了進一步研究,本研究首先建立了穩(wěn)定的CDI大鼠模型,使用3D金屬打印的損毀刀建立垂體柄電損毀模型(PEL),并且對PEL術后進行為期28天的尿量、飲水量以及尿比重檢測,發(fā)現(xiàn)整個尿崩趨勢呈三相型,使用聚類分析將術后為四個階段,急性尿崩期(術后第1天),暫時恢復期(第2-4天),遲發(fā)尿崩期(第5-17天),和尿崩恢復期(第18-28天)。同時提出了尿崩指數(shù)(CDI index)以標準化評估尿崩狀況,通過CDI指數(shù)和各期血清AVP以及血漿Na+水平比較發(fā)現(xiàn),PEL術后大鼠得以恢復。為了探討恢復的機制。PEL后使用溴脫氧尿苷(BrdU)標記。在視上核(SON)與室旁核(PVN)均發(fā)現(xiàn)新生細胞(BrdU+),且不少新生細胞分化為GABA能和谷氨酸能中間神經(jīng)元,也可化為膠質細胞和少突膠質細胞。新生中間神經(jīng)元與大細胞神經(jīng)元有接觸,并且新生細胞加入了原有神經(jīng)環(huán)路產(chǎn)生了功能。對下丘腦連續(xù)切片染色發(fā)現(xiàn),在下丘腦正中隆起處(ME),術后短期便出現(xiàn)大量BrdU+細胞,并且這些新生細胞大部分是由Nestin+Nkx 2.1+靜態(tài)神經(jīng)干細胞(qNSCs)轉化為BrdU+Nestin+Nkx 2.1+激活態(tài)神經(jīng)干細胞(aNSCs)而來。使用逆轉錄病毒分別區(qū)域標記ME、SON、PVN,只有在PEL并標記于ME組,才會在SON和PVN內(nèi)出現(xiàn)GFP+細胞,從而確認ME為PEL術后NSCs的起源位點。為了觀察新生細胞的遷移路線,使用神經(jīng)前體細胞遷移的指標(DCX)標記。術后位于ME區(qū)的新生遷移細胞從ME遷移到視上核漏斗部,并且跨過視束到達視上核前部以及PVN,對腦組織進行透明化處理后在多光子掃描下觀察整個正中隆起遷移流(ME migratory stream,MMS)。為了研究調(diào)控Nkx 2.1+Nestin+細胞的神經(jīng)發(fā)生對CDI影響,LHX2為Nkx 2.1+細胞分化為神經(jīng)元的重要調(diào)控因子。使用AAV-shLHX2抑制分化為神經(jīng)元后CDI癥狀加重,CDI指數(shù)高,尿崩癥狀加重。同時發(fā)現(xiàn)新生細胞表達IGFI受體,通過上調(diào)或者下調(diào)神經(jīng)發(fā)生(側腦室予IGF1或Ara-C),術后的CDI癥狀隨之改變。通過本研究,我們證實了大鼠垂體柄離斷引起了三相型尿崩,其癥狀的恢復,是通過激活ME的qNSCs轉化為aNSCs,遷移至SON與PVN并分化為谷氨酸能和GABA能中間神經(jīng)元,并加入神經(jīng)環(huán)路產(chǎn)生功能進行自我調(diào)節(jié)。同時證實了神經(jīng)發(fā)生對垂體柄離斷引起CDI的恢復起到重要作用。
【圖文】：

槽和右孔槽。刀頭與刀桿和刀柄同軸水平連接成一體，，刀柄的內(nèi)面卡槽適配立逡逑體定向儀的標準對角夾持器頭，外面卡槽適配夾持器的金屬元件，厚度為１＿逡逑（圖１－１邋Ａ，邋Ｃ）。設計文件導出至ＳＬＭ激光熔融３Ｄ打印機，使用鋁合金材質逡逑１０逡逑

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