【摘要】：目的:探討大鼠燒沖復(fù)合傷后肺組織miRNA表達(dá)變化,并初步闡明特定miRNA與肺損傷的關(guān)系。方法一:選取健康雄性SD大鼠(200-220g),隨機(jī)分為假傷(CT)組和燒沖復(fù)合傷(BB)組,建立假傷和燒沖復(fù)合傷大鼠模型。利用Micro-CT、肺濕干比和HE染色等方法確認(rèn)肺損傷情況。用基因芯片檢測(cè)兩組大鼠肺組織miRNA表達(dá)并比較差異。根據(jù)文獻(xiàn)調(diào)研,選取關(guān)系較為緊密的miRNA用Real-time PCR復(fù)測(cè)表達(dá)以作備選,同時(shí)確認(rèn)芯片結(jié)果可靠性。然后,對(duì)差異表達(dá)的miRNA作生物信息學(xué)分析,推測(cè)其可能影響的功能和通路。用TUNEL染色觀察了大鼠肺組織凋亡情況。方法二:1.選取健康雄性SD大鼠(200-220g),隨機(jī)均分為假傷對(duì)照(CT)組和燒沖復(fù)合傷(BB)組(n=54),傷后6h、12h、24h、36h和48h分別處死動(dòng)物,取肺組織檢測(cè)并留血清備用。SP-C免疫組化觀察肺組織AT2損傷情況;熒光雙標(biāo)檢測(cè)AT2是否發(fā)生凋亡;Real-time PCR檢測(cè)miR-486-5p傷后表達(dá)時(shí)相變化;western blotting檢測(cè)SP-C表達(dá)時(shí)相變化,分析miR-486-5p和SP-C表達(dá)的相關(guān)性。檢測(cè)傷前和傷后24h肺組織IGF-1R蛋白和IGF-1RmRNA表達(dá)水平。2.選擇A549細(xì)胞作體外模型。根據(jù)轉(zhuǎn)染質(zhì)粒和刺激所用血清分為:空載質(zhì)粒+CT組血清(NS)組;空載質(zhì)粒+BB組血清(NI)組;mimics質(zhì)粒+CT組血清(MS)組;mimics質(zhì)粒+BB組血清(MI)組;inhibitor 質(zhì)粒+BB 組血清(Ⅱ)組。Real-time PCR 檢測(cè)各組 miR-486-5p 和 IGF-1R mRNA表達(dá)。Western blotting檢測(cè)IGF-1R及下游通路關(guān)鍵蛋白表達(dá)。流式細(xì)胞凋亡檢測(cè)觀察細(xì)胞模型凋亡水平。結(jié)果一:與CT組比較,BB組肺損傷明顯,其表達(dá)9個(gè)上調(diào)的miRNA和2個(gè)下調(diào)miRNA。PCR結(jié)果與芯片結(jié)果趨勢(shì)一致,提示芯片結(jié)果可靠。差異表達(dá)的miRNA最可能富集于細(xì)胞命運(yùn)相關(guān)通路并與基因轉(zhuǎn)錄相關(guān)。BB組TUNEL染色陽性率顯著高于CT組,提示凋亡可能是與差異表達(dá)miRNA有關(guān)的細(xì)胞命運(yùn)之一。結(jié)果二:與CT組相比,BB組SP-C組化染色陽性率顯著降低,提示AT2損傷。BB組熒光雙標(biāo)見TUNEL與SP-C共染,提示AT2發(fā)生凋亡。與CT組相比,BB組IGF-1R表達(dá)顯著下調(diào),而IGF-IRmRNA表達(dá)無顯著改變。通過轉(zhuǎn)染上調(diào)細(xì)胞miR-486-5p表達(dá),可使細(xì)胞出現(xiàn)相同改變。體外模型見:燒沖復(fù)合傷血清刺激可使轉(zhuǎn)染空載質(zhì)粒的細(xì)胞凋亡增加;上調(diào)miR-486-5p和燒沖復(fù)合傷血清刺激具有協(xié)同作用;單獨(dú)上調(diào)miR-486-5p可部分模擬燒沖復(fù)合傷血清刺激導(dǎo)致的細(xì)胞凋亡效果;下調(diào)miR-486-5p可部分抑制燒沖復(fù)合傷血清刺激導(dǎo)致的細(xì)胞凋亡效果。不同組別中,IGF-1R及下游FoxO信號(hào)通路發(fā)生相應(yīng)改變。結(jié)論:1.燒沖復(fù)合傷大鼠表現(xiàn)出明顯肺損傷,肺組織miRNA表達(dá)特征改變;2.miR-486-5p可下調(diào)其靶基因IGF-1R的蛋白表達(dá),抑制其下游PI3K/Akt/FoxO信號(hào)通路,使凋亡相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄增加,從而參與燒沖復(fù)合傷肺損傷。
【圖文】：

解放軍醫(yī)學(xué)院博士學(xué)位論文逡逑＿ｗ．邐—逡逑刖邋目逡逑燒沖復(fù)合傷是熱力和沖擊波同時(shí)或相繼作用于機(jī)體所形成的燒傷和沖積傷合傷。燒沖復(fù)合傷常見于軍事沖突、恐怖襲擊和生產(chǎn)意外。１近年來，恐怖主義愈演愈烈，每年死于恐襲的人數(shù)不斷增高。爆炸恐襲是恐怖組織常用、威脅性最襲擊方式之一，自２０１０年至２０１５年，爆炸襲擊共導(dǎo)致１０．４８萬人受傷、４．４７萬亡。２在我國(guó)，燒沖復(fù)合傷傷員主要來自生產(chǎn)意外。近年來相關(guān)事件不斷發(fā)生，如２年九月在江西發(fā)生的煙花廠爆炸、２０１７年六七月間發(fā)生在北京、杭州、錦州和的天然氣爆炸等。逡逑0ａ邋Ａｓｓａｓｓｉｎａｔｉｏｎ逡逑

解放軍醫(yī)學(xué)院博士學(xué)位論文逡逑研宄。我們發(fā)現(xiàn)炎癥、凋亡、氧化應(yīng)激等多種導(dǎo)致肺損傷的因素。Ｍ然而，就筆者所逡逑知，能夠改善ＡＲＤＳ預(yù)后的治療手段仍然只有機(jī)械通氣一種手段而已。這提示我們，逡逑對(duì)于肺損傷，我們還需要進(jìn)行更深入的機(jī)制探討，各種致病因素的發(fā)生機(jī)制尚需進(jìn)一逡逑步明確，，從而為研宄干預(yù)措施提供理論依據(jù)。逡逑ｍｉＲＮＡ是一組具有廣泛調(diào)節(jié)活性的短鏈非編碼ＲＮＡ。它們主要通過與相應(yīng)靶基逡逑因ｍＲＮＡ的３’非翻譯區(qū)（３’邋ｕｎｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎａｌ邋ｒｅｇｉｏｎ）互補(bǔ)序列結(jié)合來引起該ｍＲＮＡ降逡逑解或翻譯抑制，進(jìn)而發(fā)揮調(diào)控相關(guān)生物過程的作用。迄今，ｍｉＲＢａｓｅ數(shù)據(jù)庫中共收錄逡逑２２３個(gè)物種的３５８２８條成熟ｍｉＲＮＡ，其中包含人類成熟ｍｉＲＮＡ達(dá)２５８８條。１１４４這些逡逑ｍｉＲＮＡｓ可以調(diào)控人體內(nèi)６０％以上的細(xì)胞活動(dòng)。１５逡逑
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)人民解放軍醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R644;R563

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 劉銳;曹衛(wèi)紅;;成批燒沖復(fù)合傷的臨床診斷學(xué)特征[J];中華診斷學(xué)電子雜志;2014年01期

2 胡泉;柴家科;楊紅明;;燒沖復(fù)合傷肺損傷的研究進(jìn)展[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2013年05期

3 孫曙光;王良喜;孫建忠;王靜;曹淑琴;張佳;江學(xué)成;;燒沖復(fù)合傷臨床特征和救治[J];天津醫(yī)藥;2009年04期

4 魏雪菁;王淑君;劉文娟;李方容;;5例嚴(yán)重?zé)龥_復(fù)合傷的護(hù)理體會(huì)[J];家庭護(hù)士;2006年06期

5 岳茂興;;燒沖復(fù)合傷的急救[J];繼續(xù)醫(yī)學(xué)教育;2006年14期

6 李丹;曹衛(wèi)紅;;燒沖復(fù)合傷救治體會(huì)[J];感染.炎癥.修復(fù);2006年03期

7 張新力;黃國(guó)寶;李緒q;;成批燒沖復(fù)合傷的救治[J];中華燒傷雜志;2005年06期

8 王海軍,蔡寶仁,孔繁英,肖杰;36例重度燒沖復(fù)合傷的臨床救治[J];中華燒傷雜志;2000年05期

9 何家坤;爆炸燒沖復(fù)合傷35例死亡病理分析[J];人民軍醫(yī);1998年07期

10 鄭懷恩;程天民;;燒沖復(fù)合傷血小板的變化及其發(fā)生機(jī)理的實(shí)驗(yàn)研究[J];電子顯微學(xué)報(bào);1988年03期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 鄧德柱;;燒沖復(fù)合傷并多臟器功能衰竭救治體會(huì)[A];全國(guó)危重?zé)齻颊咴缙趶?fù)蘇對(duì)策專題研討會(huì)論文匯編[C];2005年

2 岳茂興;;燒沖復(fù)合傷的急救[A];第十一次全國(guó)急診醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議暨中華醫(yī)學(xué)會(huì)急診醫(yī)學(xué)分會(huì)成立二十周年慶典論文匯編[C];2006年

3 宋斌;王海林;肖海;鄭春雨;吳愛萍;雷勇;;成批特重?zé)龥_復(fù)合傷傷員救治與分流的組織實(shí)施[A];第四屆全國(guó)燒傷救治專題研討會(huì)燒傷感染救治新進(jìn)展論文匯編[C];2006年

4 柴家科;盛志勇;陸江陽;文仲光;楊紅明;賈曉明;李利根;曹衛(wèi)紅;郝岱峰;申傳安;庹曉曄;梁黎明;王淑君;;燒沖復(fù)合傷臨床特點(diǎn)及救治策略[A];第四屆全國(guó)燒傷救治專題研討會(huì)燒傷感染救治新進(jìn)展論文匯編[C];2006年

5 張林清;劉海英;吳學(xué)田;李曉巧;姚子文;;燒沖復(fù)合傷早期處理的特點(diǎn)[A];第八屆全國(guó)燒傷外科學(xué)年會(huì)論文匯編[C];2007年

6 柴家科;盛志勇;陸江陽;文仲光;楊紅明;賈曉明;李利根;曹衛(wèi)紅;郝岱峰;申傳安;庹曉曄;梁黎明;王淑君;;燒沖復(fù)合傷臨床特點(diǎn)及救治策略[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)燒傷外科學(xué)分會(huì)2009年學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2009年

7 劉國(guó)建;王正國(guó);朱佩芳;;大鼠中度燒沖復(fù)合傷后肺病理形態(tài)學(xué)變化[A];全國(guó)第三屆燒傷外科學(xué)術(shù)交流會(huì)議論文摘要[C];1991年

8 鄭懷恩;程天民;;燒沖復(fù)合傷血小板的變化及其發(fā)生機(jī)理的實(shí)驗(yàn)研究[A];第五次全國(guó)電子顯微學(xué)會(huì)議論文摘要集[C];1988年

9 柴家科;盛志勇;陸江陽;文仲光;楊紅明;賈曉明;李利根;曹衛(wèi)紅;郝岱峰;申傳安;庹曉曄;梁黎明;王淑君;;成批燒沖復(fù)合傷患者的臨床救治[A];第八屆全國(guó)燒傷外科學(xué)年會(huì)論文匯編[C];2007年

10 劉國(guó)建;王正國(guó);朱佩芳;;大鼠燒沖復(fù)合傷后肺組織中堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子mRNA轉(zhuǎn)錄表達(dá)的變化[A];全國(guó)第三屆燒傷外科學(xué)術(shù)交流會(huì)議論文摘要[C];1991年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前4條

1 張東海;microRNA-486-5p調(diào)控?zé)龥_復(fù)合傷肺損傷機(jī)制的研究[D];中國(guó)人民解放軍醫(yī)學(xué)院;2018年

2 謝鋒;鈣蛋白酶在燒沖復(fù)合傷心肌損傷中的作用和機(jī)制研究[D];中國(guó)人民解放軍醫(yī)學(xué)院;2017年

3 王一賀;西維來司鈉和丙泊酚對(duì)燒沖復(fù)合傷后犬急性肺損傷的療效研究[D];中國(guó)人民解放軍醫(yī)學(xué)院;2014年

4 胡泉;膽堿能α7受體激動(dòng)劑對(duì)燒沖復(fù)合傷休克期血管內(nèi)皮細(xì)胞的保護(hù)作用及機(jī)制研究[D];中國(guó)人民解放軍醫(yī)學(xué)院;2013年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前3條

1 蔡建華;中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶在大鼠燒沖復(fù)合傷肺損傷中作用的實(shí)驗(yàn)研究[D];中國(guó)人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;2010年

2 閆紅;復(fù)合戰(zhàn)傷合并海水浸泡對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞止血功能影響的實(shí)驗(yàn)研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2002年

3 詹剛;海水浸泡燒沖復(fù)合傷的傷情特點(diǎn)及早期救治的實(shí)驗(yàn)研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2002年

本文編號(hào)：2664081