【摘要】：目的以兔離斷后肢為模型,進(jìn)一步改進(jìn)二甲基亞砜(DMSO)灌注方法,并檢驗(yàn)該灌注方法的有效性以及對(duì)復(fù)合組織深低溫凍存的保護(hù)效果,為復(fù)合組織深低溫冷凍再植提供理論依據(jù)。方法實(shí)驗(yàn)分兩部分進(jìn)行。第一部分:19%DMSO-30min+10%DMSO-10min改良灌注方法灌注兔離斷后肢模型有效性的檢測(cè)。取健康新西蘭大白兔9只,獲得18只兔離斷后肢模型,隨機(jī)分為1組、2組及3組,每組6只離斷后肢模型。1組為改良灌注組,經(jīng)股動(dòng)脈給予19%DMSO灌注30min,繼而給予10%DMSO灌注10min;2組為灌注組,經(jīng)股動(dòng)脈給予19%DMSO灌注40min;3組為對(duì)照組,經(jīng)股動(dòng)脈給予生理鹽水(NS)灌注40min,用于磁共振波譜技術(shù)的基線調(diào)整。各組采用磁共振波譜技術(shù)定量測(cè)量相同部位血管、肌肉組織中DMSO的具體濃度,1組、2組獲得的各樣本數(shù)據(jù)進(jìn)行對(duì)比,并行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。第二部分:兔離斷后肢模型不同灌注方法經(jīng)冷凍復(fù)溫再植后微觀形態(tài)學(xué)變化的觀察。取健康新西蘭大白兔24只,隨機(jī)分為A組、B組、C組及D組,每組6只。A組為改良灌注組,首先經(jīng)股動(dòng)脈給予19%DMSO灌注30min,然后給予10%DMSO灌注10min;B組為灌注組,直接經(jīng)股動(dòng)脈給予19%DMSO灌注40min;C組為對(duì)照組,經(jīng)股動(dòng)脈給予生理鹽水(NS)灌注40min;D組為空白組,不進(jìn)行冷凍再植,直接取樣本。A組、B組、C組先行兔右后肢離斷,進(jìn)行灌注后給予慢速冷凍、快速?gòu)?fù)溫后再植并取樣本,D組直接取新鮮樣本,各樣本行蘇木精-伊紅(HE)染色后標(biāo)記并保存,觀察并對(duì)比各組間血管、骨骼肌及神經(jīng)微觀形態(tài)學(xué)變化。結(jié)果第一部分:1組、2組血管周?chē)鶧MSO濃度存在顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,P值=0.0000004;1組血管周?chē)鶧MSO平均濃度為6.8550±1.97581%;2組血管周?chē)鶧MSO平均濃度為18.6367±0.35359%。1組、2組肌肉周?chē)鶧MSO濃度無(wú)顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,P值=0.784,1組肌肉周?chē)鶧MSO平均濃度為9.4633±2.48194%,2組肌肉周?chē)鶧MSO平均濃度為9.7517±1.54743%。第二部分:各組樣本血管組織損傷程度:D組A組B組C組;各組樣本肌肉、神經(jīng)組織損傷程度:A組與B組損傷程度相當(dāng),明顯優(yōu)于C組,但與新鮮組D組相比,仍有較大差距。結(jié)論本實(shí)驗(yàn)證明,兔離斷肢體模型經(jīng)19%DMSO灌注30min后應(yīng)用10%DMSO灌洗血管的改良灌注方法,可在保證肌肉內(nèi)接近10%有效保護(hù)濃度的基礎(chǔ)上,顯著降低血管中DMSO濃度,從而降低了DMSO對(duì)血管的毒性損傷。
【圖文】：

實(shí)驗(yàn)前行溶液配制圖注：從右往左依次為①19%DMSO溶液②10%DMSO溶液③灌洗液

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物固定體位圖注：行右后肢消毒、備皮，避免損傷手術(shù)區(qū)域皮膚，，固定四肢于操作臺(tái)
【學(xué)位授予單位】：錦州醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類(lèi)號(hào)】：R658.1

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2651698