【摘要】：第一部分不同抗凝劑保存的富血小板血漿在圍體外循環(huán)期的質(zhì)量比較研究目的本研究將擬在離體狀態(tài)下,評價(jià)全身肝素化后、體外循環(huán)前通過靜脈引流管放血行自體血細(xì)胞分離獲得的血小板質(zhì)量。通過多個(gè)對照組的對比,比較不同的抗凝劑對自體富血小板血漿的分離及保存效果,探索肝素抗凝的富血小板血漿在體外循環(huán)患者中應(yīng)用是否安全可行。研究方法2017年1月至2017年08月,選擇本院20例擬行體外循環(huán)手術(shù)的成人患者作為研究對象,把同一患者同一時(shí)間抽取的靜脈血分為枸櫞酸抗凝組(Sodium citrate,SC)和肝素抗凝組(Heparin),并以EDTA抗凝管采的血樣為對照組1,以血站制備的機(jī)采濃縮血小板為對照組2,并與體外循環(huán)停機(jī)后的全血(對照組3)作比較,每組各20例。患者入室麻醉后,經(jīng)頸內(nèi)靜脈置管抽取靜脈血20ml分別注入多只枸櫞酸抗凝管及肝素抗凝管內(nèi),每管各含2.7 ml全血以及0.3ml抗凝劑,混勻,200g離心力,離心10分鐘,靜置后吸取上層血漿,移到另一個(gè)離心管,經(jīng)過二次離心,棄去上清層,吸取血漿下層制成富血小板血漿(PRP),分別進(jìn)行相應(yīng)指標(biāo)檢測。用Sysmex血細(xì)胞分析儀檢測各組血小板計(jì)數(shù)等五項(xiàng)指標(biāo)。用Nova biomedical血?dú)夥治鰞x測試各組的血糖、乳酸、滲透壓及電解質(zhì)、血?dú)獾戎笜?biāo)。用光密度比濁法檢測兩組在二磷酸腺苷(Adenosine diphosphate,ADP)、花生四烯酸(Arachidonic acid,AA)及腎上腺素(Adrenaline,ADR)的誘導(dǎo)下,血小板在60s、180s、300s時(shí)的聚集度、最大聚集度和達(dá)到最大聚集度的時(shí)間;用血小板聚集儀測算低滲休克反應(yīng)(Hypotonic shock response,HSR)的值。比較各組間血小板的各項(xiàng)指標(biāo)的差異。研究結(jié)果對于同時(shí)采樣的同一標(biāo)本,肝素與枸櫞酸抗凝的富血小板血漿都能達(dá)到滿意的分離效果,血小板濃度約為全血血小板濃度的2-3倍,濃縮血小板的血小板計(jì)數(shù)值(platelet count,PLT)高于兩組PRP。相比于EDTA抗凝,枸櫞酸鹽和肝素抗凝均會(huì)造成全血的血小板可逆性聚集,PLT、平均血小板體積(Mean platelet volume,MPV)、血小板體積分布寬度(Platelet volume distribution width,PDW)、大血小板比率(Platelet-large cell ratio,PLCR)和血小板壓積(Platelet crit,PCT)均較低,與EDTA抗凝全血相比有顯著性差異(P0.05)。當(dāng)枸櫞酸組與肝素組抗凝的血樣加入EDTA抗凝劑后,PLT、MPV、PDW、PLCR和PCT均得到了不同程度的恢復(fù),有顯著性差異(P0.05)。肝素組PRP和枸櫞酸組PRP的MPV與PDW均大于濃縮血小板,肝素組PRP的PDW大于枸櫞酸組,差異有顯著性(P0.05)。在體外循環(huán)(CPB)停機(jī)后,停機(jī)全血的PLT比CPB前全血的PLT顯著下降(P0.05),PDW、PLCR和PCT在CPB后也明顯降低(P0.05)。肝素組PRP的PH值高于與枸櫞酸組PRP的值(P0.05),二氧化碳分壓(Partial Pressure of Carbon Dioxide,PCO2)低于枸櫞酸組 PRP(P0.01),碳酸氫根(Bicarbonate ion,HCO3-)則高于枸櫞酸PRP組(P0.01)。與濃縮血小板組相比,肝素組的PH值要高一些(P0.05),HCO3-遠(yuǎn)大于濃縮血小板(P0.01);枸櫞酸組的PH值高于濃縮血小板組(P0.05),PCO2和 HCO3-均大于濃縮血小板組(P0.01)。肝素PRP組與枸櫞酸PRP組的PH值均高于其全血組(P0.01);肝素PRP組與枸櫞酸PRP組的PCO2比起其全血組是降低的(P0.01)。兩組抗凝劑的PRP之間和全血之間的PH值、PC02均有顯著性差異(P0.01)。HCO3-也有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。和濃縮血小板組及枸櫞酸組比較,肝素組鈉離子(Na+)較低,鉀離子(K+)、鈣離子(Ca++)、鎂離子(Mg++)和氯離子(Cl-)較高,差異有顯著性(P0.01)。肝素組和枸櫞酸組的血糖和乳酸均在正常范圍,顯著低于濃縮血小板組,有顯著性差異(P0.01)。肝素組滲透壓低于枸櫞酸組和濃縮血小板組,有顯著性差異(P0.01)。與濃縮血小板比較,兩組PRP的低滲休克試驗(yàn)(Hypotonic shock response,HSR)恢復(fù)率均較高,有顯著性差異(P0.01)。肝素PRP組與枸櫞酸PRP組比較,無顯著差異(P0.05)。肝素組AA和ADP的60s、180s、300s聚集率和最大聚集率均優(yōu)于濃縮血小板組(P0.05)。枸櫞酸組ADP和ADR在180s聚集率,AA、ADP和ADR的300s聚集率和最大聚集率均優(yōu)于濃縮血小板組(P0.05)。肝素組PRP與枸櫞酸組PRP相比,AA的60s聚集率、ADP的60s、180s、300s聚集率和最大聚集率均優(yōu)于枸櫞酸組PRP(P0.05)。結(jié)論:與EDTA抗凝相比,枸櫞酸鹽和肝素抗凝均會(huì)造成血小板可逆性聚集,但是這種聚集在加入EDTA后是可逆的。肝素組PRP的PDW、MPV、PLCR略大于枸櫞酸組PRP和濃縮血小板組。CPB前全血的PLT、PDW、PLCR和PCT均優(yōu)于停機(jī)全血。肝素組對多數(shù)離子的保存效果更接近生理水平,乳酸和血糖略高于其他組,但均在正常范圍內(nèi)。肝素PRP的PH值要高于枸櫞酸組PRP和濃縮血小板組,這是由PC02和 HC03-的差異造成的。肝素PRP組對AA、ADP的聚集性優(yōu)于枸櫞酸PRP組,枸櫞酸PRP組對ADR的聚集性更好,兩組的AA、ADP、ADR聚集性均優(yōu)于濃縮血小板組。兩組PRP的低滲休克反應(yīng)恢復(fù)率均較高,優(yōu)于濃縮血小板組,肝素PRP組與枸櫞酸PRP組比較,無顯著差異。肝素可以作為心臟外科手術(shù)期間的血小板抗凝劑保存PRP。第二部分兩組抗凝劑保存的富血小板血漿在不同時(shí)間點(diǎn)的質(zhì)量變化研究目的第一部分對各種抗凝劑對PRP的保存效果做了比較。本階段將進(jìn)一步在離體狀態(tài)下,評價(jià)以肝素抗凝和以枸櫞酸抗凝的富血小板血漿在常溫保存條件下隨著時(shí)間延長,血小板質(zhì)量的變化情況,并加入了電子顯微鏡下不同時(shí)間點(diǎn)的血小板形態(tài)指標(biāo),探索肝素抗凝的富血小板血漿在多長時(shí)間內(nèi)對患者是安全有效的。研究方法2017年9月至2018年02月,選擇本院20例擬行體外循環(huán)手術(shù)的成人患者作為研究對象,把同一患者同一時(shí)間抽取的靜脈血分為枸櫞酸抗凝組和肝素抗凝組�；颊呷胧衣樽砗�,經(jīng)頸內(nèi)靜脈置管抽取靜脈血30ml分別注入多只枸櫞酸抗凝管及肝素抗凝管內(nèi),每管各含2.7 ml全血以及0.3ml抗凝劑,混勻,以200g離心力,離心10分鐘,靜置后吸取上層血漿,移到另一個(gè)離心管,經(jīng)過二次離心,棄去上清層,吸取血漿下層制成富血小板血漿,分別用離心管存儲后,在取樣的當(dāng)時(shí),取樣后2小時(shí)、4小時(shí)、8小時(shí)、24小時(shí)這幾個(gè)時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行相應(yīng)指標(biāo)的檢測,包括兩組的血小板計(jì)數(shù)等五項(xiàng)指標(biāo);兩組的血糖、乳酸、滲透壓及電解質(zhì)、血?dú)獾戎笜?biāo);兩組的低滲休克試驗(yàn)情況;兩組在ADP、AA及ADR誘導(dǎo)下的最大聚集度。并用電鏡觀察血小板在取樣當(dāng)時(shí)和6小時(shí)后的形態(tài)和大小的變化。比較兩組間血小板的各項(xiàng)指標(biāo)的差異。研究結(jié)果兩組PRP在各個(gè)時(shí)刻的PDW、MPV和PLCR均有顯著性差異(P0.05)。與本組Oh 相比,SC-PRP 只有 4h 的 PDW、MPV 高于 Oh 的數(shù)值(P0.05);Heparin-PRP 的PDW的2h、24h與Oh相比有顯著性差異(P0.05),MPV和PLCR的各個(gè)時(shí)刻均有顯著性差異(P0.05),隨著時(shí)間延長呈逐漸增大趨勢。Heparin-PRP 在 Oh、2h、4h 的 PH 值高于 SC-PRP(P0.05)。SC-PRP 的 Na+、K+、Ca++、Mg++離子和乳酸值及滲透壓在所有時(shí)刻與Heparin-PRP均有顯著性差異(P0.05)。兩組的血糖在0h、2h的差異有顯著性(P0.05)。與本組Oh相比,兩組的pH值均呈先增大后減少趨勢,SC-PRP的PH值在全部時(shí)刻與Oh比較均有顯著性差異(P0.05)。Heparin-PRP 的 Ca++在 2h、4h 與 8h 有下降(P0.05);血糖呈下降趨勢,在8h和24h有顯著性差異(P0.05);乳酸隨著時(shí)間延長呈逐漸增大趨勢(P0.05),但在8小時(shí)內(nèi),Heparin-PRP這幾項(xiàng)生化指標(biāo)均在正常范圍內(nèi)。SC-PRP的血糖在4h、8h和24h呈下降趨勢(P0.05);乳酸隨著時(shí)間延長呈逐漸增大趨勢(P0.05)。SC-PRP 在 8h 的滲透壓比 Oh 低(P0.05)。SC-PRP的AA和ADP的最大聚集率在多數(shù)時(shí)刻要低于Heparin-PRP(P0.05);ADR聚集率在Oh和2h高于肝素組(P0.05)。從4h開始,兩組血小板的AA、ADP、ADR最大聚集率隨著時(shí)間延長呈下降趨勢,與本組0h相比均有顯著性差異(P0.05),但在8小時(shí)以內(nèi)的數(shù)值仍在正常范圍內(nèi)。兩組低滲休克反應(yīng)的HSR結(jié)果都在正常范圍內(nèi),兩組間在各個(gè)時(shí)刻無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05);組內(nèi)隨時(shí)間延長呈下降趨勢,但在8h內(nèi)組間差異不顯著,24h時(shí)兩組與Oh比較均有顯著性差異(P0.05)。掃描電鏡結(jié)果顯示,Heparin-PRP的血小板體積稍大于SC-PRP和濃縮血小板組(P0.05),6h后組內(nèi)比較差異不明顯。兩組血小板形態(tài)在Oh和6h的計(jì)分無明顯差異。均比濃縮血小板組高。兩組在6小時(shí)后偽足均增多,枸櫞酸鹽組的偽足更長更多。濃縮血小板組的偽足最多最長。透射電鏡里,三組血小板的形態(tài)不盡相同。濃縮血小板組樹突形的的血小板較多,偽足較多較長。枸櫞酸血小板和肝素血小板呈圓盤狀的血小板較多,偽足較少且短。透射電鏡下的肝素血小板體積與其他兩組無明顯差異(P0.05)。結(jié)論Heparin-PRP的PDW、MPV和PLCR在各個(gè)時(shí)刻均稍高于SC-PRP,隨著時(shí)間延長PDW、MPV和PLCR呈增大趨勢。Heparin-PRP的PH值高于枸櫞酸組,電解質(zhì)均在生理范圍內(nèi),各時(shí)刻的乳酸值均稍高于SC-PRP。SC-PRP的電解質(zhì)含量異于正常值。隨著時(shí)間延長,Heparin-PRP和SC-PRP的鈣和血糖值均逐漸下降,乳酸逐漸增加,但在前8小時(shí)均在正常值內(nèi)。Heparin-PRP在AA和ADP的最大聚集率要稍優(yōu)于SC-PRP;而ADR的最大聚集率要低于SC-PRP。兩組的HSR結(jié)果在各個(gè)時(shí)刻無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,組內(nèi)隨時(shí)間延長呈下降趨勢,但在8h內(nèi)組間無顯著性差異。掃描電鏡結(jié)果顯示,Heparin-PRP的血小板體積稍大于SC-PRP的,兩組血小板形態(tài)在Oh無明顯差異,6h后兩組的偽足均增多,濃縮血小板組的偽足最多最長。透射電鏡的結(jié)果與之類似,濃縮組偽足較多較長,SC-PRP與Heparin-PRP組的圓形血小板較多,偽足較少。三組的直徑大小無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,與掃描電鏡結(jié)果不同。隨著時(shí)間延長,Heparin-PRP各項(xiàng)指標(biāo)與SC-PRP相比各有優(yōu)劣,8小時(shí)內(nèi)肝素的大部分指標(biāo)都在正常范圍內(nèi)。Heparin-PRP在8小時(shí)內(nèi)是相對安全的。
【圖文】：

圖２各種抗凝劑下血小板ＭＰＶ、ＰＤＷ柱形圖逡逑３、兩種富血小板血漿和濃縮血小板的參數(shù)、離子和代謝情況比較逡逑肝素與枸櫞酸抗凝的富血小板血漿都能達(dá)到滿意的分離效果，，血小板濃度約為逡逑全血血小板濃度２－３倍，血小板回收率兩者無顯著性差異。濃縮血小板丨３丨／丨’最高，逡逑

圖３某個(gè)樣品測量時(shí)的實(shí)時(shí)曲線逡逑
【學(xué)位授予單位】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R654.1

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 湯其元;馬亞萍;張斌;羅南寧;王信;張怡;;骨組織再生工程中富血小板血漿的應(yīng)用與研究進(jìn)展[J];中國組織工程研究;2019年04期

2 周華;;自體富血小板血漿治療膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎療效觀察[J];世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘;2018年74期

3 江麗;;自體富血小板血漿治療膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎的護(hù)理體會(huì)[J];世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘;2018年82期

4 康麗;李前國;王瑛琨;黃俊青;楊義成;;富血小板血漿聯(lián)合復(fù)方甘草酸苷片治療斑禿32例臨床療效觀察[J];中國皮膚性病學(xué)雜志;2016年01期

5 吳昭君;葛建華;季星利;陳歌;;自體富血小板血漿在周圍神經(jīng)損傷修復(fù)中的潛在價(jià)值[J];西南軍醫(yī);2016年05期

6 余晶;馮幼平;吳毅平;;微針導(dǎo)入自體富血小板血漿對面部年輕化的療效研究[J];中國美容醫(yī)學(xué);2015年17期

7 楊毅;;富血小板血漿(PRP)在種植體周圍骨缺損修復(fù)中的應(yīng)用研究[J];人人健康;2017年14期

8 萬蕓;李文芳;;富血小板血漿對組織損傷修復(fù)的研究進(jìn)展[J];中國美容醫(yī)學(xué);2014年17期

9 黃曉燕;;富血小板血漿治療難愈傷口的應(yīng)用研究及相關(guān)護(hù)理[J];中國醫(yī)藥指南;2012年14期

10 劉更夫;尹義軍;吳琴;畢紅琳;胡勝;;特發(fā)性血小板減少性紫癜患者激活的富血小板血漿凝固時(shí)間測定及臨床意義[J];現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志;2008年06期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 徐燕;蔣勇;;富血小板血漿對人牙周組織細(xì)胞的礦化作用影響[A];中華口腔醫(yī)學(xué)會(huì)第七屆全國口腔病理學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要匯編[C];2006年

2 汪永躍;郭雨文;嚴(yán)玲;唐禮;程偉;;血小板活化劑對富血小板血漿中生長因子濃度的影響[A];第四屆全國口腔種植學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2005年

3 文昌暉;;富血小板血漿聯(lián)合中藥內(nèi)服治療激素依賴性皮炎[A];2018全國中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2018年

4 袁霆;張長青;陸男吉;李四波;曾炳芳;;富血小板血漿修復(fù)皮膚缺損的實(shí)驗(yàn)研究[A];第二屆華東地區(qū)骨科學(xué)術(shù)大會(huì)暨山東省第九次骨科學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2007年

5 袁霆;張長青;曾炳芳;;富血小板血漿修復(fù)皮膚缺損的實(shí)驗(yàn)研究[A];2007年上海市醫(yī)用生物材料研討會(huì)論文匯編[C];2007年

6 孫曉雷;馬劍雄;王志剛;張華峰;馬信;;富血小板血漿聯(lián)合鈣化誘導(dǎo)對骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖和成骨活性的影響[A];天津市生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)會(huì)第30次學(xué)術(shù)年會(huì)暨生物醫(yī)學(xué)工程前沿科學(xué)研討會(huì)論文集[C];2010年

7 徐燕;PM Bartold;V Marino;;富血小板血漿和乏血小板血漿包被的屏障膜對成骨細(xì)胞附著的影響[A];中華口腔醫(yī)學(xué)會(huì)第七屆全國口腔病理學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要匯編[C];2006年

8 劉中寧;王衣祥;姜婷;;富血小板血漿促進(jìn)損傷人牙髓細(xì)胞恢復(fù)和增殖的研究[A];第六次全國口腔修復(fù)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文摘要匯編[C];2009年

9 趙啟明;;自體富血小板血漿的應(yīng)用[A];2011年浙江省整形美容學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2011年

10 鄭燦鑌;朱慶棠;劉小林;黃喜軍;何彩鳳;江麗;全大萍;周翔;朱昭煒;;富血小板血漿的制備和對許旺細(xì)胞的作用研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第10屆全國顯微外科學(xué)術(shù)會(huì)議暨世界首例斷肢再植成功50周年慶典論文集[C];2013年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前3條

1 李鳳元;富血小板血漿幫牙周骨再生[N];健康報(bào);2007年

2 本報(bào)記者 劉霞;用自己的血治愈自己的傷[N];科技日報(bào);2009年

3 大連醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院鉆石灣院區(qū)骨科主任 何盛為;抽點(diǎn)血幫老人緩骨痛[N];健康時(shí)報(bào);2016年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 王力;青藏高原東北部農(nóng)作物與牧草物候特征及其對氣候變化的響應(yīng)[D];蘭州大學(xué);2018年

2 白明;椎間盤鏡輔助下兩種方法修復(fù)椎間盤纖維環(huán)缺損的實(shí)驗(yàn)研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2016年

3 吳劍;富血小板血漿對兔膝骨性關(guān)節(jié)炎的作用及機(jī)制研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2017年

4 宋揚(yáng);富血小板血漿促進(jìn)骨組織修復(fù)的實(shí)驗(yàn)研究[D];四川大學(xué);2005年

5 田學(xué)忠;硫酸鈣對骨修復(fù)的影響及硫酸鈣富血小板血漿活性支架材料的研制[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;2008年

6 徐紅黨;氨甲環(huán)酸和富血小板血漿對A型主動(dòng)脈夾層手術(shù)患者的血液保護(hù)作用[D];鄭州大學(xué);2016年

7 周紹龍;負(fù)載富血小板血漿的聚多巴胺明膠微球在脂肪移植中的研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2017年

8 張森林;珊瑚與骨髓基質(zhì)細(xì)胞和富血小板血漿構(gòu)建組織工程骨的實(shí)驗(yàn)研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2008年

9 蘇瑪;滾針聯(lián)合富血小板血漿促進(jìn)面部除皺美容的研究[D];黑龍江中醫(yī)藥大學(xué);2016年

10 木拉提·熱夏提;毛囊干細(xì)胞和異種脫細(xì)胞支架復(fù)合培養(yǎng)方法及組織相容性研究[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2014年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 梁碧霞;離體狀態(tài)下肝素抗凝的富血小板血漿在體外循環(huán)患者中的可行性研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2018年

2 王旭;自體富血小板血漿采集與回輸技術(shù)在大血管手術(shù)中應(yīng)用對患者腎功能的影響[D];天津醫(yī)科大學(xué);2018年

3 劉松;富血小板血漿治療圍塌陷期股骨頭壞死臨床療效觀察及及相關(guān)實(shí)驗(yàn)研究[D];廣州中醫(yī)藥大學(xué);2018年

4 舒海寧;同種異體富血小板血漿對糖尿病大鼠深Ⅱ°燙傷創(chuàng)面愈合的影響[D];南華大學(xué);2018年

5 李煒峰;富血小板血漿用于前交叉韌帶重建術(shù)后的臨床療效研究[D];廣西中醫(yī)藥大學(xué);2018年

6 田永川;膝痹通方聯(lián)合富血小板血漿治療中度膝骨關(guān)節(jié)炎的臨床研究[D];中國中醫(yī)科學(xué)院;2018年

7 劉志遠(yuǎn);富血小板血漿負(fù)載人脂肪來源干細(xì)胞促進(jìn)小鼠壓瘡愈合的實(shí)驗(yàn)研究[D];遵義醫(yī)學(xué)院;2018年

8 劉廣濤;自體血小板單采在成人心臟直視手術(shù)中的血液保護(hù)作用研究[D];中國醫(yī)科大學(xué);2018年

9 谷寶鳳;自體富血小板血漿治療慢性創(chuàng)面的療效觀察[D];甘肅中醫(yī)藥大學(xué);2018年

10 翟亞東;富血小板血漿應(yīng)用在慢性靜脈性潰瘍中臨床療效的Meta分析[D];山西醫(yī)科大學(xué);2018年

本文編號：2651676