【摘要】：目的探討富氫鹽水對大鼠燒傷后急性腎損傷的保護(hù)作用并對其相關(guān)機(jī)制進(jìn)行研究。方法將56只SD大鼠按隨機(jī)數(shù)表法隨機(jī)分為分為假傷組(8只)、燒傷組(24只)、富氫鹽水組(24只)。假傷組大鼠背部采用溫水浴(20 ℃,15 s)模擬致傷,燒傷組和富氫鹽水組大鼠背部采用沸水浴法(100℃,15 s)致Ⅲ度30%TBSA的重度燙傷(以下稱燒傷)。富氫鹽水組大鼠傷后立即一次性腹腔注射富氫水10mL/kg,假傷組和燒傷組大鼠傷后立即注射同等劑量生理鹽水。假傷組于傷后72 h,燒傷組和富氫鹽水組分別于傷后6、24、72h選取8只大鼠,取腹主動脈血后處死取腎臟組織,行蘇木素-伊紅染色觀察組織病理學(xué)情況和損傷評分,臨床血生化分析儀測定血肌酐和血尿素氮水平,免疫組織化學(xué)染色觀察腎臟組織中腫瘤壞死因子α(TNF-α)、白細(xì)胞介素1β(IL-1β)、IL-6的表達(dá)分布,實(shí)時(shí)熒光定量反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)檢測腎臟組織中TNF-α、IL-1β、IL-6的mRNA表達(dá),蛋白質(zhì)印跡法檢測高遷移率族蛋白B1(HMGB1)的蛋白表達(dá)。對數(shù)據(jù)行Kruskal-Wallis檢驗(yàn)、Dunn's檢驗(yàn)、單因素方差分析、Bonferroni事后檢驗(yàn)。結(jié)果(1)假傷組大鼠傷后72h腎小管管腔結(jié)構(gòu)完整,無炎性細(xì)胞浸潤、細(xì)胞變形壞死。燒傷組大鼠自傷后6h腎小管結(jié)構(gòu)逐步開始出現(xiàn)細(xì)胞空泡變形、管腔內(nèi)碎裂蛋白聚集等損傷變化,并隨著時(shí)間增加,損傷變化逐步加重。富氫鹽水組大鼠腎臟組織傷后各時(shí)間點(diǎn)損傷情況較燒傷組同時(shí)間點(diǎn)有不同程度的減輕。與假傷組傷后72h比較,燒傷組、富氫鹽水組大鼠傷后6、24、72h的腎小管損傷評分均明顯升高(p0.05);與燒傷組比較,富氫鹽水組大鼠傷后6、24、72h的腎小管損傷評分均明顯下降(P0.05)。(2)除富氫水組傷后6、72 h外(p0.05),燒傷組和富氫鹽水組大鼠余時(shí)間點(diǎn)血肌酐水平明顯高于假傷組傷后72 h(p0.01);除富氫鹽水組傷后6 h外(p0.05),燒傷組和富氫鹽水組大鼠余時(shí)間點(diǎn)血尿素氮水平明顯高于假傷組傷后72 h(p0.01)。富氫鹽水組大鼠傷后6、24、72 h血肌酐和血尿素氮水平分別明顯低于燒傷組相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)(p0.05)。(3)假傷組大鼠傷后72h腎臟組織中有一定程度的TNF-α、1L-1β、IL-6陽性表達(dá),主要集中在腎小管上皮細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)。燒傷組大鼠傷后6、24、72h腎臟組織中以上炎癥因子的表達(dá)較假傷組多。富氫鹽水組大鼠傷后各時(shí)間點(diǎn)腎臟組織中以上炎癥因子的表達(dá)較燒傷組少。(4)與假傷組傷后72h比較,燒傷組大鼠傷后6、24、72h的TNF-α、IL-1β、IL-6的mRNA表達(dá)均明顯增加(P0.01);富氫鹽水組大鼠僅傷后6、24h的TNF-α的mRNA表達(dá)增加(p0.05或p0.01),傷后6h的IL-6的mRNA表達(dá)增加(p0.01)。與燒傷組各時(shí)間點(diǎn)比較,富氫鹽水組大鼠除傷后6h的TNF-α的mRNA表達(dá)無明顯差異外(p0.05),余各時(shí)間點(diǎn)的TNF-α、IL-1β、IL-6的mRNA表達(dá)均明顯降低(p0.05)。(5)與假傷組傷后72 h(0.39±0.03)比較,燒傷組大鼠傷后6、24、72 h腎臟組織中HMGB1的蛋白表達(dá)(1.19±0.07、1.00±0.06、0.80±0.05)均明顯上調(diào)(p0.05),而富氫鹽水組大鼠傷后6、24、72 h腎臟組織中HMGB1的蛋白表達(dá)(0.35±0.08、0.47±0.06、0.42±0.06)無明顯差異(p0.05)。與燒傷組比較,富氫鹽水組大鼠傷后6、24、72 h腎臟組織中HMGB1的蛋白表達(dá)均明顯下調(diào)(p0.05)。結(jié)論富氫鹽水可以一定程度減輕重度燒傷大鼠急性腎損傷,而其這一作用通過調(diào)控腎臟組織炎癥因子釋放實(shí)現(xiàn)。
【圖文】：

細(xì)胞及裂解的蛋白質(zhì)聚集等典型損傷表現(xiàn)并隨著時(shí)間增加，，損傷變化逐步加重。逡逑富氫鹽水組大鼠腎臟組織傷后各時(shí)間點(diǎn)損傷情況較燒傷組同時(shí)間點(diǎn)有不同程度的逡逑減輕。見圖１。逡逑W逡逑W＿＿逡逑圖１假傷及燒傷各組大鼠傷后各時(shí)間點(diǎn)腎臟組織病理學(xué)觀察逡逑蘇木素－伊紅Ｘ４００，圖中標(biāo)尺為５０邋ｐｍ。１Ａ．假傷組傷后７２邋ｈ腎皮質(zhì)組織中腎逡逑小管管腔結(jié)構(gòu)完整，腎小管上皮細(xì)胞規(guī)律排列，無炎性細(xì)胞浸潤、細(xì)胞變形壞死。逡逑１Ｂ、１Ｃ、１Ｄ．分別為燒傷組傷后６、２４、７２ｈ腎皮質(zhì)組織結(jié)構(gòu)變化，均可見腎小管逡逑明顯的空泡化及變形（ ）、碎裂蛋白聚集（ ），具有這些損傷變現(xiàn)的腎小管數(shù)逡逑量，隨著時(shí)間變化而增加；１Ｅ、１Ｆ、１Ｇ．分別分別為富氫鹽水組傷后６、２４、７２邋ｈ逡逑腎皮質(zhì)組織結(jié)構(gòu)變化，分別較圖１Ｂ、１Ｃ、ＩＤ腎臟俎織中出現(xiàn)損傷變化的腎小管逡逑數(shù)量明顯減少，結(jié)構(gòu)損傷有所緩解逡逑與假傷組傷后７２ｈ比較

主要集中在腎小管上皮細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)。燒傷組大鼠傷后６、２４、７２ｈ腎臟組織中以逡逑上炎癥因子的表達(dá)較假傷組多。富氫鹽水組大鼠傷后各時(shí)間點(diǎn)腎臟組織中以上炎逡逑癥因子的表達(dá)較燒傷組少。見圖２、圖３、圖４。逡逑圖２假傷及燒傷各組大鼠傷后各時(shí)間點(diǎn)腎臟組織中腫瘤壞死因子ａ邋（ＴＮＦ－ａ）表逡逑徶（棕黃色）情況逡逑９逡逑
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R644;R692

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本文編號：2651403