【摘要】：目的:研究鴉膽子油乳(Brucea javanica oil emulsion,BJOE)對增生性瘢痕成纖維細胞(hypertrophic scar fibroblasts,HSFs)增殖、I型膠原合成、波形蛋白(Vimentin)表達量和ERK1/2 MAPK信號通路的影響。方法:收集人來源增生性瘢痕組織,行HSFs體外培養(yǎng)及鑒定;以不同濃度(0.5、1、5、10、20、50mg/ml)的BJOE作用HSFs 24h后,計算出24h半數(shù)抑制濃度(IC50)。實驗分為兩組:以近IC50濃度的BJOE作用HSFs 24、48、72h為實驗組,對照組為常規(guī)培養(yǎng)的HSFs,采用CCK-8法檢測HSFs的增殖和活力,觀察近IC50濃度的BJOE作用HSFs 24h后細胞的形態(tài)學變化,采用流式細胞術(shù)(FCM)進行細胞的周期檢測。采用蛋白免疫印跡(Western blot)法檢測I型膠原、波形蛋白、細胞外信號調(diào)節(jié)激酶1/2(ERK1/2)及其磷酸化蛋白p-ERK1/2的表達。結(jié)果:BJOE的24h IC50為1.176mg/ml,故選擇1mg/ml濃度的BJOE進行后續(xù)實驗。在1mg/ml濃度的BJOE下作用HSFs 24、48、72h后,BJOE對HSFs的抑制率分別為(53.13±2.40)%、(75.07±2.67)%、(88.65±0.32)%,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。BJOE作用下HSFs數(shù)目明顯減少,細胞間隔增寬,細胞突起明顯縮短,甚至消失,細胞變圓。實驗組S期細胞百分比逐漸減少,HSFs中I型膠原、波形蛋白和p-ERK1/2的表達明顯受到抑制(P0.05),而ERK1/2的表達無明顯變化(P0.05)。結(jié)論:鴉膽子油乳對HSFs的增殖及I型膠原的合成具有抑制作用,其機制與抑制ERK1/2磷酸化及波形蛋白的表達有關(guān)。
【圖文】：

別為（36.78±2.09）%、（53.13±2.40）%、（64.72±1.61）%、（70.28±1.37）%、（72.10±1.51）%、（73.52±1.42）%。并繪制生長曲線圖，見圖2-1。藥物濃度在0.5~5mg/ml之間，BJOE濃度越高，，對HSFs的生長抑制率越高。且具有統(tǒng)計學意義（p<0.05）。藥物濃度大于5mg/ml后，BJOE對HSFs的抑制率仍呈上升趨勢，但無統(tǒng)計學意義 (p>0.05)。BJOE對HSFs的24h IC50為1.176mg/ml，故選擇1mg/ml濃度的BJOE進行后續(xù)實驗。(2) 1mg/ml濃度鴉膽子油乳作用增生性瘢痕成纖維細胞不同時間的時-效關(guān)系：1mg/ml濃度BJOE作用HSFs24、48、72h后的抑制率分別為（53.13±2.40）%、（75.07±2.67）%、（88.65±0.32）%，繪制生長曲線。見圖2-2。隨著時間的延長，BJOE對HSFs的抑制率呈上升趨勢。差異具有統(tǒng)計學意義（p<0.05?

-效關(guān)系：1mg/ml濃度BJOE作用HSFs24、48、72h后的抑制率分別為（53.13±2.40）%、（75.07±2.67）%、（88.65±0.32）%，繪制生長曲線。見圖2-2。隨著時間的延長，BJOE對HSFs的抑制率呈上升趨勢。差異具有統(tǒng)計學意義（p<0.05）。圖 2-1不同濃度鴉膽子油乳作用下對增生性瘢痕成纖維細胞的抑制率圖2-21mg/ml 濃度鴉膽子油乳在不同時間作用下對增生性瘢痕成纖維細胞的抑制率
【學位授予單位】：南京醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R622

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 Tao Sui;Da-wei Ge;Lei Yang;Jian Tang;Xiao-jian Cao;Ying-bin Ge;;Mitomycin C induces apoptosis in human epidural scar fibroblasts after surgical decompression for spinal cord injury[J];Neural Regeneration Research;2017年04期

2 YAN Zheng;GUO Gui-fang;ZHANG Bei;;Research of Brucea javanica against Cancer[J];Chinese Journal of Integrative Medicine;2017年02期

3 林苗苗;王文波;康文;高振;武曉莉;唐勝建;劉偉;;辣椒素抑制體外培養(yǎng)瘢痕疙瘩成纖維細胞增殖的實驗研究[J];組織工程與重建外科雜志;2017年01期

4 郭姣;張琦;辛燕;陳濤;;病理性瘢痕的藥物治療研究進展[J];皮膚性病診療學雜志;2016年02期

5 A-chao Han;Jing-xiu Deng;Qi-shun Huang;Huai-yuan Zheng;Pan Zhou;Zhi-wei Liu;Zhen-bing Chen;;Verapamil inhibits scar formation after peripheral nerve repair in vivo[J];Neural Regeneration Research;2016年03期

6 馬林梟;鮑濟洪;陳斌;;瘢痕:評估、防治、早期干預方法的研究與進展[J];中國組織工程研究;2015年20期

7 田卓;劉巍敏;湯婛;;病理性瘢痕與ERK信號轉(zhuǎn)導途徑相關(guān)性研究進展[J];臨床醫(yī)學;2013年04期

8 李開琴;趙斌;許宏龍;李鵬;茍洪喜;;醋調(diào)海藻、鴉膽子治療燒傷瘢痕增生的臨床探索[J];內(nèi)蒙古中醫(yī)藥;2012年23期

9 路廣秀;范潔宇;馬瑞蓮;;鴉膽子臨床新用及研究進展[J];內(nèi)蒙古醫(yī)學院學報;2012年05期

10 張士更;趙高高;呂伯東;馬寅鋒;年建華;張莉麗;劉樹碩;;鴉膽子油乳尿道沖洗對兔尿道瘢痕的作用[J];中國中西醫(yī)結(jié)合外科雜志;2011年02期

本文編號：2644794