【摘要】：目的:研究鴉膽子油乳(Brucea javanica oil emulsion,BJOE)對增生性瘢痕成纖維細(xì)胞(hypertrophic scar fibroblasts,HSFs)增殖、I型膠原合成、波形蛋白(Vimentin)表達(dá)量和ERK1/2 MAPK信號通路的影響。方法:收集人來源增生性瘢痕組織,行HSFs體外培養(yǎng)及鑒定;以不同濃度(0.5、1、5、10、20、50mg/ml)的BJOE作用HSFs 24h后,計(jì)算出24h半數(shù)抑制濃度(IC50)。實(shí)驗(yàn)分為兩組:以近IC50濃度的BJOE作用HSFs 24、48、72h為實(shí)驗(yàn)組,對照組為常規(guī)培養(yǎng)的HSFs,采用CCK-8法檢測HSFs的增殖和活力,觀察近IC50濃度的BJOE作用HSFs 24h后細(xì)胞的形態(tài)學(xué)變化,采用流式細(xì)胞術(shù)(FCM)進(jìn)行細(xì)胞的周期檢測。采用蛋白免疫印跡(Western blot)法檢測I型膠原、波形蛋白、細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶1/2(ERK1/2)及其磷酸化蛋白p-ERK1/2的表達(dá)。結(jié)果:BJOE的24h IC50為1.176mg/ml,故選擇1mg/ml濃度的BJOE進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。在1mg/ml濃度的BJOE下作用HSFs 24、48、72h后,BJOE對HSFs的抑制率分別為(53.13±2.40)%、(75.07±2.67)%、(88.65±0.32)%,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。BJOE作用下HSFs數(shù)目明顯減少,細(xì)胞間隔增寬,細(xì)胞突起明顯縮短,甚至消失,細(xì)胞變圓。實(shí)驗(yàn)組S期細(xì)胞百分比逐漸減少,HSFs中I型膠原、波形蛋白和p-ERK1/2的表達(dá)明顯受到抑制(P0.05),而ERK1/2的表達(dá)無明顯變化(P0.05)。結(jié)論:鴉膽子油乳對HSFs的增殖及I型膠原的合成具有抑制作用,其機(jī)制與抑制ERK1/2磷酸化及波形蛋白的表達(dá)有關(guān)。
【圖文】：

別為（36.78±2.09）%、（53.13±2.40）%、（64.72±1.61）%、（70.28±1.37）%、（72.10±1.51）%、（73.52±1.42）%。并繪制生長曲線圖，見圖2-1。藥物濃度在0.5~5mg/ml之間，BJOE濃度越高，，對HSFs的生長抑制率越高。且具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）。藥物濃度大于5mg/ml后，BJOE對HSFs的抑制率仍呈上升趨勢，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (p>0.05)。BJOE對HSFs的24h IC50為1.176mg/ml，故選擇1mg/ml濃度的BJOE進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。(2) 1mg/ml濃度鴉膽子油乳作用增生性瘢痕成纖維細(xì)胞不同時(shí)間的時(shí)-效關(guān)系：1mg/ml濃度BJOE作用HSFs24、48、72h后的抑制率分別為（53.13±2.40）%、（75.07±2.67）%、（88.65±0.32）%，繪制生長曲線。見圖2-2。隨著時(shí)間的延長，BJOE對HSFs的抑制率呈上升趨勢。差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05?

-效關(guān)系：1mg/ml濃度BJOE作用HSFs24、48、72h后的抑制率分別為（53.13±2.40）%、（75.07±2.67）%、（88.65±0.32）%，繪制生長曲線。見圖2-2。隨著時(shí)間的延長，BJOE對HSFs的抑制率呈上升趨勢。差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p<0.05）。圖 2-1不同濃度鴉膽子油乳作用下對增生性瘢痕成纖維細(xì)胞的抑制率圖2-21mg/ml 濃度鴉膽子油乳在不同時(shí)間作用下對增生性瘢痕成纖維細(xì)胞的抑制率
【學(xué)位授予單位】：南京醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R622

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2644794