【摘要】：目的:本研究回顧性分析在我院行經(jīng)會(huì)陰尿道成形術(shù)的骨盆骨折尿道損傷患者,明確尿道成形術(shù)后狹窄復(fù)發(fā)的危險(xiǎn)因素。壓力性尿失禁是骨盆骨折尿道損傷的并發(fā)癥之一,我們應(yīng)用脂肪干細(xì)胞膜片結(jié)合納米紗構(gòu)建組織工程吊帶和膜片碎片尿道內(nèi)注射兩種方式,從組織學(xué),尿流動(dòng)力學(xué)方面探討膜片技術(shù)對(duì)壓力性尿失禁的治療效果。材料和方法:回顧性分析2005-2015年間在我院行經(jīng)會(huì)陰尿道成形術(shù)的928例骨盆骨折尿道損傷患者,年齡,具體損傷原因,狹窄部位,狹窄長(zhǎng)度,急診處理方式,之前手術(shù)失敗史,并發(fā)傷和手術(shù)處理方式,明確尿道成形術(shù)后狹窄復(fù)發(fā)的危險(xiǎn)因素。應(yīng)用脂肪干細(xì)胞膜片結(jié)合水紡納米紗構(gòu)建組織工程吊帶,掃描電子顯微鏡(SEM)觀察納米紗和膜片的微觀結(jié)構(gòu),HE,masson染色觀察膜片和尿道的組織學(xué)改變,漏尿點(diǎn)壓力檢測(cè)各組的尿流動(dòng)力學(xué)變化。脂肪干細(xì)胞膜片碎片尿道內(nèi)注射,漏尿點(diǎn)壓力檢測(cè)各組的尿流動(dòng)力學(xué)變化,免疫組化和免疫熒光檢測(cè)平滑肌,血管和神經(jīng)的轉(zhuǎn)化情況。結(jié)果:單因素分析發(fā)現(xiàn)急診處理方式,失敗的尿道內(nèi)切開,失敗尿道成形術(shù),前列腺移位,狹窄長(zhǎng)度可以影響尿道成形術(shù)的手術(shù)復(fù)發(fā)率,而進(jìn)一步多因素分析發(fā)現(xiàn)兩次以上的尿道內(nèi)切開,失敗的尿道成形術(shù),前列腺移位和狹窄長(zhǎng)度大于3cm為經(jīng)會(huì)陰尿道成形術(shù)術(shù)后復(fù)發(fā)的危險(xiǎn)因素。SEM檢測(cè)顯示納米紗孔徑較傳統(tǒng)納米纖維大,更利于細(xì)胞生長(zhǎng)。組織學(xué)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)膜片納米紗吊帶細(xì)胞排列規(guī)則緊密,與尿道融合更好,尿流動(dòng)力學(xué)與正常組無明顯差異。膜片碎片尿道內(nèi)注射,可以恢復(fù)尿流動(dòng)力學(xué)改變,同時(shí)更多的細(xì)胞分化為平滑肌細(xì)胞,同時(shí)促進(jìn)血管和神經(jīng)再生。結(jié)論:經(jīng)會(huì)陰尿道成形術(shù)時(shí),前列腺移位,狹窄長(zhǎng)度大于3cm,之前有失敗尿道成形術(shù)病史和兩次以上內(nèi)切開病史是術(shù)后狹窄復(fù)發(fā)的高危因素。膜片納米紗吊帶可以使吊帶在與尿道交界產(chǎn)生大量膠原,與尿道融合較好,同時(shí)細(xì)胞排列緊密規(guī)則,增加了吊帶的機(jī)械性能。膜片碎片尿道內(nèi)注射可以增強(qiáng)細(xì)胞在尿道內(nèi)的存活時(shí)間,同時(shí)更多的細(xì)胞分化為平滑肌細(xì)胞,同時(shí)促進(jìn)血管和神經(jīng)再生。這兩種方式為壓力性尿失禁的治療提供了新的方向。
【圖文】：

3. 結(jié)果3.1 脂肪干細(xì)胞形態(tài)學(xué)特征及成脂、成骨誘導(dǎo)我們應(yīng)用老鼠腹股溝脂肪組織，通過酶消化法成功培養(yǎng)出了脂肪干細(xì)胞，脂肪干細(xì)胞培養(yǎng) 24h 貼壁，2 天后，細(xì)胞融合度達(dá) 50%，細(xì)胞形態(tài)較為一致呈短梭形（圖 1A）。初次傳代后，3 天可以再次達(dá)到融合狀態(tài)。我們選取第二代進(jìn)行成脂和成骨誘導(dǎo)。脂肪干細(xì)胞給予成脂誘導(dǎo)液孵育 21 天后，用油紅 O 脂肪染色法染色，發(fā)現(xiàn)細(xì)胞質(zhì)內(nèi)染成紅色的脂肪滴出現(xiàn)（圖 1B）。同樣給予成骨誘導(dǎo)液孵育 21 天后，茜素紅染色發(fā)現(xiàn)細(xì)胞外有染成橘紅色的鈣鹽沉積。綜上，原代培養(yǎng)的脂肪干細(xì)胞有成脂和成骨分化能力。

3.2 脂肪干細(xì)胞表型鑒定：取第二代脂肪干細(xì)胞用流式細(xì)胞學(xué)技術(shù)檢測(cè)干細(xì)胞相關(guān)抗原 CD29CD45，CD90，，其中 CD29，CD44，CD90 為干細(xì)胞表面標(biāo)記物，CD45 為表面標(biāo)記物，結(jié)果顯示，CD29，CD44，CD45，CD90 的陽性率分別為：（圖 2A）、99.41%（圖 2B）和 0.15%（圖 2C）96.37%（圖 2D），因此，細(xì)胞表達(dá)干細(xì)胞標(biāo)記物，不表達(dá)血細(xì)胞標(biāo)記物。符合脂肪干細(xì)胞表型標(biāo)
【學(xué)位授予單位】：上海交通大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R683.3;R699.6

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本文編號(hào)：2644766