【摘要】：目的:研究鈣敏感受體(Calcium-sensing receptor,Ca SR)在創(chuàng)傷性腦損傷(Traumatic brain injury,TBI)后大鼠神經(jīng)元中的表達,分析Ca SR及Caspase-3表達的變化與神經(jīng)元凋亡之間的關系。方法:健康成年清潔級SD大鼠54只,按隨機數(shù)字方法隨機分成對照組、TBI組、抑制劑組,每組18只,每組再分為損傷后6h、24h、72 h 3個亞組,每個亞組6只。對照組給予只開骨窗不予打擊處理,TBI組和抑制劑組采用改良自由落體硬腦膜撞擊法建立TBI模型,抑制劑組在模型建立前連續(xù)2 d尾靜脈注射Ca SR阻滯劑NPS2390(1次/d,每次10μmol/kg)。采用改良神經(jīng)功能評分(m NSS)評估各組大鼠神經(jīng)行為,Real-Time PCR檢測損傷腦組織Ca SR、Caspase-3 m RNA的表達,Western-blot法檢測Ca SR、Caspase-3蛋白的表達,Tunel法檢測皮質(zhì)神經(jīng)元的凋亡。采用單因素方差分析對數(shù)據(jù)進行分析。結果:(1)HE染色結果顯示,對照組可見腦組織結構完整,細胞排列整齊,TBI組和抑制劑組可見蛛網(wǎng)膜下腔出血,炎性細胞浸潤。(2)神經(jīng)行為學評分顯示:各時間點TBI組與對照組比較m NSS評分增高,差異有統(tǒng)計學意義(P0.01),而三個時間點抑制劑組m NSS評分均低于TBI組(P0.01)。(3)TBI組不同時間點Ca SR m RNA及其蛋白的表達,均為24 h達高峰,組內(nèi)比較差異有統(tǒng)計學意義(P0.01)。三個時間點TBI組Ca SR m RNA及其蛋白的表達高于對照組(P0.05),而抑制劑組Ca SR m RNA及其蛋白的表達均低于TBI組(P0.05)。各時間點TBI組Caspase-3 m RNA及其蛋白的表達在24 h達到高峰,組內(nèi)比較差有統(tǒng)計學意義(P0.05),各時間點TBI組Caspase-3 m RNA及其蛋白的表達高于對照組(P0.05),抑制劑組Caspase-3 m RNA轉(zhuǎn)錄低于TBI組(P0.05),抑制劑組僅在在24h時間點Caspase-3蛋白表達與TBI組相比,差異有統(tǒng)計學意義(P0.01)。(4)TUNEL法檢測結果顯示,TBI組24 h凋亡細胞達到峰值,組內(nèi)比較差異有統(tǒng)計學意義(P0.01)。各時間點TBI組比對照組神經(jīng)元凋亡細胞指數(shù)均增高(P0.01),而抑制劑組與TBI組比較,凋亡細胞指數(shù)降低(P0.01)。(5)相關性分析顯示:Ca SR、Caspase-3蛋白的表達均與細胞凋亡存在正相關(r=0.300,P0.05;r=0.371,P0.01),Ca SR蛋白的表達與Caspase-3蛋白的表達存在正相關(r=0.434,P0.01)。Ca SR、Caspase-3 m RNA轉(zhuǎn)錄與細胞凋亡存在正相關(r=0.641,P0.05;r=0.893,P0.01);Ca SR m RNA轉(zhuǎn)錄與Caspase-3 m RNA轉(zhuǎn)錄存在正相關(r=0.754,P0.01)。結論:在創(chuàng)傷性腦損傷中,Ca SR在腦損傷中表達明顯增高,抑制劑NPS2390能下調(diào)Ca SR的表達,改善神經(jīng)行為學評分,減少細胞凋亡。Ca SR的表達可能參與了創(chuàng)傷性腦損傷的病理生理過程。
【圖文】：

鈣敏感受體在創(chuàng)傷性腦損傷大鼠神經(jīng)元凋亡中作用的研究表 3.2 各組大鼠模型制作后改良神經(jīng)行為學評分比較（ ±s）.2 Rats neurobehavioral scores changes after traumatic brain injury鼠數(shù)（只） 6 h 24 h 6 1.50±0.55 1.33±0.82 6 13.87±0.75b13.33±0.82b16 11.83±0.98bc10.67±0.82bc1較，bP＜0.01；與 TBI 組比較，cP＜0.01；：與 6 h、24 h 時間點比較，d

與 TBI 組比較，#P<0.05 ；同一時間點 TBI 組與抑制劑組比較， P圖 3.3.1.CaSR mRNA 相對表達量Figure3.3.1. Comparison of CaSR mRNA transcription in all ge PCR 檢測 Caspase-3 蛋白轉(zhuǎn)錄腦組織 Caspase-3 mRNA 表達結果：模型制作后 6h、 蛋白轉(zhuǎn)錄在 6h到 24h呈現(xiàn)上升趨勢，，24h轉(zhuǎn)錄最為顯pase-3 mRNA 各時間點比較差異有統(tǒng)計學意義（P＜0TBI 組 Caspase-3 mRNA 的轉(zhuǎn)錄高于對照組（P＜0.0spase-3 mRNA 低于 TBI 組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜圖 3.3.2）.3.2 各組大鼠不同時間點 Caspase-3 mRNA 的相對表達量（.3.2.Transcription of Caspase-3 mRNA were observed in all gro鼠數(shù)（只） 6 h 24 h 6 0.85±0.18 0.75±0.24 6 2.57±1.03ab4.81±0.66abaa
【學位授予單位】：石河子大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R651.15

【參考文獻】

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相關博士學位論文 前1條

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本文編號：2640684