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2型糖尿病大鼠關(guān)節(jié)軟骨中連接蛋白43的表達(dá)及意義

發(fā)布時(shí)間:2020-04-24 07:51
【摘要】:目的:分析2型糖尿病大鼠關(guān)節(jié)軟骨Cx43的表達(dá)情況,并探討其與關(guān)節(jié)軟骨損傷程度之間的相關(guān)性,為進(jìn)一步研究糖尿病性骨關(guān)節(jié)炎的發(fā)病機(jī)制提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法:采用8周齡健康雄性ZDF大鼠作為2型糖尿病組(n=40),以空腹血糖7.8 mmol/L為成模標(biāo)準(zhǔn)。選用同齡雄性ZL大鼠作為對照組(n=30)。于模型建立成功后第8、12、16、20、24周末分批處死大鼠,取雙側(cè)膝關(guān)節(jié)、髖關(guān)節(jié),于雙側(cè)股骨內(nèi)側(cè)髁、脛骨平臺(tái)內(nèi)側(cè)負(fù)重區(qū)及股骨頭切取骨軟骨組織塊,常規(guī)制備石蠟切片,于番紅O染色下運(yùn)用Mankin’s評分評價(jià)關(guān)節(jié)軟骨損傷程度,同時(shí)運(yùn)用免疫組化染色觀察軟骨細(xì)胞中Cx43的表達(dá)情況。收集實(shí)驗(yàn)結(jié)果并統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果:(1)隨著2型糖尿病病程延長,糖尿病大鼠股骨內(nèi)側(cè)髁、脛骨平臺(tái)及股骨頭關(guān)節(jié)軟骨Mankin’s評分及軟骨細(xì)胞內(nèi)Cx43的表達(dá)均逐漸增加(P0.05),兩者呈正相關(guān)(r=0.786、0.845、0.785,P均0.001)。(2)模型建立成功后16-24周,糖尿病大鼠股骨頭關(guān)節(jié)軟骨Mankin’s評分及軟骨細(xì)胞內(nèi)Cx43的表達(dá)均小于股骨髁和脛骨平臺(tái)(P均0.05),而股骨髁與脛骨平臺(tái)之間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P均0.05)。(3)成模后8-24周,糖尿病組大鼠股骨髁及脛骨平臺(tái)關(guān)節(jié)軟骨Mankin’s評分及軟骨細(xì)胞內(nèi)Cx43的表達(dá)均高于同齡對照組(P均0.05)。而糖尿病大鼠股骨頭關(guān)節(jié)軟骨Mankin’s評分及軟骨細(xì)胞內(nèi)Cx43的表達(dá)于成模后16-24周高于同齡對照組(P均0.05)。結(jié)論:Cx43在2型糖尿病大鼠膝關(guān)節(jié)及髖關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞中的表達(dá)增加,與關(guān)節(jié)軟骨損傷程度呈正相關(guān),可加速糖尿病性骨關(guān)節(jié)炎的發(fā)生與發(fā)展。
【圖文】:

軟骨細(xì)胞,免疫組化,信度,股骨髁


圖 1 Cx43 在軟骨細(xì)胞中的表達(dá)情況(免疫組化, 400×)注:股骨髁(A)、脛骨平臺(tái)(B)及股骨頭(C)關(guān)節(jié)軟骨 Cx43 免疫組化圖像顯示,軟骨細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)內(nèi)和細(xì)胞膜上可見 Cx43 陽性表達(dá)的棕黃色或棕褐色顆粒。1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理數(shù)據(jù)采用 SPSS 13.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,P<0.05 被認(rèn)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(X± s)表示。觀察者內(nèi)的復(fù)測信度運(yùn)用組內(nèi)相關(guān)系數(shù)(Intraclass correlation, ICC)進(jìn)行評價(jià)。ICC<0.4 提示信度較差,,0.4≤ICC≤0.75 提示信度中等,ICC>0.75提示信度良好。實(shí)驗(yàn)大鼠左側(cè)與右側(cè)股骨髁、脛骨平臺(tái)及股骨頭關(guān)節(jié)軟骨的 Mankin’s 評分及 Cx43 的表達(dá)情況運(yùn)用兩獨(dú)立樣本 t 檢驗(yàn)進(jìn)行比較。若差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,則取兩側(cè)測量結(jié)果的平均值作為最終測量結(jié)果進(jìn)

關(guān)節(jié)軟骨,番紅,軟骨細(xì)胞,軟骨


15圖 2 股骨內(nèi)側(cè)髁關(guān)節(jié)軟骨番紅 O 染色(100×)注:A. 對照組 8 周組(C8),番紅 O 染色顯示關(guān)節(jié)軟骨表面光整,軟骨細(xì)胞排列及數(shù)量未見異常,潮線顯示清晰。B. 2 型糖尿病 8 周組(T2DM8),關(guān)節(jié)軟骨表面光整,細(xì)胞數(shù)量、分布及排列正常,番紅 O 染色較對照組淺淡。C. 2 型糖尿病 12 周組(T2DM12),關(guān)節(jié)軟骨表面毛糙,可見少量缺損。D. 2 型糖尿病 16 周組(T2DM16),軟骨表面不規(guī)整,可見較多缺損,軟骨細(xì)胞減少。E, F. 2 型糖尿病 20、24 周組(T2DM20,T2DM24),軟骨纖維基質(zhì)層明顯變薄,不規(guī)則,染色淺淡,軟骨細(xì)胞減少(F)。
【學(xué)位授予單位】:川北醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2018
【分類號】:R587.2;R684.3

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號:2638709

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