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中西醫(yī)結(jié)合非手術(shù)五法聯(lián)合治療腰椎間盤突出癥目標(biāo)蛋白的篩選及鑒定

發(fā)布時(shí)間:2020-04-14 09:43
【摘要】:目的:觀察中西醫(yī)結(jié)合非手術(shù)五法聯(lián)合法治療腰椎間盤突出癥(Lumbar Intervertebral Disc Protrusion,LIDP)的臨床治療效果。運(yùn)用同位素標(biāo)記相對和絕對定量技術(shù)聯(lián)合液相色譜與串聯(lián)質(zhì)譜探討LIDP患者經(jīng)中西醫(yī)結(jié)合非手術(shù)五法聯(lián)合療法治療前后的差異表達(dá)蛋白質(zhì),為尋找LIDP治療學(xué)的血清分子靶標(biāo)提供基礎(chǔ)。方法:納入LIDP患者35例,均予中西醫(yī)結(jié)合非手術(shù)五法聯(lián)合療法治療4周,同時(shí)觀察患者臨床療效。分別于治療前后采集患者外周血的血清,通過蛋白質(zhì)提取、蛋白質(zhì)濃度測量、蛋白質(zhì)酶解、肽段標(biāo)記、高效液相色譜分離、質(zhì)譜分析,對質(zhì)譜數(shù)據(jù)進(jìn)行查庫鑒定及定量分析,篩選并鑒定差異表達(dá)蛋白,并對其進(jìn)行生物信息學(xué)分析。結(jié)果:(1)經(jīng)中西醫(yī)結(jié)合非手術(shù)五法聯(lián)合療法治療4周后,治療后視覺模擬評分較前明顯降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p㩳0.05),腰腿痛水平好轉(zhuǎn)32例,好轉(zhuǎn)率達(dá)91.4%。療效標(biāo)準(zhǔn)按JOA評分表進(jìn)行評價(jià),與治療前JOA評分相比,治療后JOA評分明顯增高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p㩳0.05),其中臨床控制19例,顯效7例,有效5例,無效4例,總有效率達(dá)88.6%。(2)質(zhì)譜共篩選出有標(biāo)記意義差異蛋白209個(gè),并鑒定出差異表達(dá)的蛋白質(zhì)21個(gè)(p0.05),其中上調(diào)表達(dá)的差異蛋白13個(gè)、下調(diào)表達(dá)的差異蛋白8個(gè)。(3)基因本體論注釋(Gene Ontology,GO)分析這些差異蛋白發(fā)現(xiàn),共注釋到生物進(jìn)程182個(gè),細(xì)胞成分43個(gè)條目,分子功能條目90個(gè)。京都基因與基因組百科全書(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路分析這些差異蛋白發(fā)現(xiàn),其中14個(gè)差異蛋白富集至25條KEGG信號通路。結(jié)論:(1)中西醫(yī)結(jié)合非手術(shù)五法聯(lián)合治療腰椎間盤突出癥療效顯著,值得臨床應(yīng)用。(2)補(bǔ)體C3、纖維連接蛋白1、載脂蛋白A-IV,載脂蛋白B及載脂蛋白A-I可能成為中西醫(yī)結(jié)合非手術(shù)五法聯(lián)合療法治療腰椎間盤突出癥的潛在血清分子靶標(biāo)。
【圖文】:

電泳圖,樣品,比值,血清樣品


圖 1 樣品 SDS-PAGE 電泳圖(上樣量 10μg) 1 中可以看出,與原始血清樣品相比,除去高白條帶的分布更加均衡清楚,從而可知本實(shí)驗(yàn)白處理效果較好。段濃度測定結(jié)果依據(jù) OD280 吸收值來反映肽段的相對濃度,,,治療后-1 的濃度為 3.5μg/μL,治療前-2 的濃濃度為 3.7μg/μL。后差異蛋白的統(tǒng)計(jì)品按照蛋白質(zhì)豐度水平,依據(jù)治療后/治療前比 0.7 且 p㩳0.05 篩選差異蛋白,其中比值大于比值小于或等于 0.7 為表達(dá)下調(diào)。實(shí)驗(yàn)共篩選
【學(xué)位授予單位】:廣西中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2018
【分類號】:R681.53

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號:2627165

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