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富血小板纖維蛋白應(yīng)用于骨外露創(chuàng)面皮瓣轉(zhuǎn)移的實(shí)驗(yàn)研究

發(fā)布時(shí)間:2020-04-13 17:59
【摘要】:研究目的:探討局部應(yīng)用富血小板纖維蛋白(Platelet-rich firbrin,PRF)對(duì)覆蓋于骨外露創(chuàng)面隨意皮瓣成活的影響,深入了解自身來(lái)源的PRF在皮瓣轉(zhuǎn)移過(guò)程中的作用,探討PRF是否可以加快皮瓣血管再生、提高皮瓣新生毛細(xì)血管密度,為臨床中除骨外露創(chuàng)面以外的其他難治性創(chuàng)面提供治療思路及實(shí)驗(yàn)依據(jù)。研究方法:清潔級(jí)新西蘭兔30只,體重2.4~3.Okg,雌雄不限,由廈門(mén)大學(xué)附屬東南醫(yī)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供并寄養(yǎng),正常飲食。將30只新西蘭兔編號(hào),使用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法隨機(jī)分為兩組,實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組,每組15只。用心臟采血法取新西蘭兔全血20mL,3000r/min,離心10min制備PRF。于新西蘭兔頭部作4cm×2cm、蒂部位于顱骨近耳側(cè)的骨性隆起處的皮瓣,寬與兩耳連線平行,各組分別給予下述處理:①實(shí)驗(yàn)組:形成皮瓣后剔除皮瓣下相應(yīng)位置的骨膜,在剔除骨膜后的顱骨上均勻覆蓋制作好的PRF膜,用“5-0”絲線沿皮瓣三周原位間斷縫合,間斷留長(zhǎng)線,縫合完畢后消毒,再將無(wú)菌紗布折疊好放置于皮瓣上方,打包包扎創(chuàng)面。②對(duì)照組:剔除骨膜后不行任何處理,其余同前。分別于術(shù)后3天、7天和14天在實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組各取5只新西蘭兔觀察皮瓣大體成活情況,計(jì)算皮瓣成活率。并切取皮瓣組織塊行組織學(xué)觀察、血管密度計(jì)算、免疫組化測(cè)定VEGF、CD34,分析術(shù)后3個(gè)時(shí)間點(diǎn)實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組皮瓣新生血管密度數(shù)量及皮瓣成活率的差異是否有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,并初步探討其作用機(jī)制。研究結(jié)果:1.大體觀察肉眼觀察可見(jiàn),成活的皮瓣質(zhì)地柔軟、色澤紅潤(rùn),刀割或針刺時(shí)出血;壞死的皮瓣質(zhì)地較硬、顏色較黑,刀割或針刺時(shí)不出血。各時(shí)間點(diǎn)實(shí)驗(yàn)組的皮瓣壞死面積較對(duì)照組小,顏色接近正常組織,組織水腫程度普遍較輕,壞死部分位于皮瓣遠(yuǎn)端。2.皮瓣成活率檢測(cè)術(shù)后第14天,實(shí)驗(yàn)組的皮瓣成活率為(98.02土0.74),對(duì)照組的皮瓣成活率為(86.20±1.84),P0.05,結(jié)果有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,實(shí)驗(yàn)組皮瓣存活率較對(duì)照組高。3.組織學(xué)觀察及血管密度檢測(cè)皮瓣中央組織塊HE染色可見(jiàn):各組皮瓣隨時(shí)間的延長(zhǎng),炎癥反應(yīng)越來(lái)越輕,血管密度越來(lái)越大。實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組相比,實(shí)驗(yàn)組炎癥反應(yīng)較對(duì)照組輕,實(shí)驗(yàn)組血管密度較對(duì)照組大。4.免疫組化測(cè)定VEGF和CD34用VEGF抗體標(biāo)記血管內(nèi)皮細(xì)胞和成纖維細(xì)胞,實(shí)驗(yàn)組較對(duì)照組陽(yáng)性率高,說(shuō)明實(shí)驗(yàn)組皮瓣血管內(nèi)皮細(xì)胞及成纖維細(xì)胞較對(duì)照組高;用CD34標(biāo)記新生血管并計(jì)數(shù),發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)組皮瓣內(nèi)血管密度較對(duì)照組高,血管計(jì)數(shù)后進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,術(shù)后3天,實(shí)驗(yàn)組血管密度為(11.40± 1.59)對(duì)照組為(8.74±1.14),術(shù)后7天,實(shí)驗(yàn)組血管密度(12.66±1.78),對(duì)照組(10.1±1.2),術(shù)后 14 天,實(shí)驗(yàn)組(13.24±0.99),對(duì)照組(10.24±0.95)。證明血管密度隨時(shí)間增長(zhǎng)在增長(zhǎng),但總體來(lái)說(shuō),實(shí)驗(yàn)組較對(duì)照組血管密度高。研究結(jié)論:富血小板纖維蛋白可以提高隨意皮瓣組織微血管密度,提高隨意皮瓣成活率。
【圖文】:

血小板,纖維蛋白,全血,離心管


凝膠使其排出多余的血清,既節(jié)約時(shí)間,亦可塑性,使其符合手術(shù)所需。此時(shí)逡逑所得到的即為標(biāo)準(zhǔn)的富血小板纖維蛋白膜,此過(guò)程必須保證嚴(yán)格的無(wú)菌操作。逡逑(圖1)逡逑10逡逑

皮瓣,毛發(fā),實(shí)驗(yàn)組,質(zhì)地


術(shù)后第14天,實(shí)驗(yàn)組皮瓣愈合良好,皮瓣質(zhì)地、顏色,毛發(fā)覆蓋等與周?chē)义掀つw無(wú)異。對(duì)照組皮瓣遠(yuǎn)端壞死皮瓣界限更為明顯,壞死部位無(wú)毛發(fā)生長(zhǎng),質(zhì)硬,逡逑皮瓣蒂部毛發(fā)生長(zhǎng)旺盛,皮瓣成活良好,與周?chē)=M織無(wú)明顯差異。(圖3邋e,,f)逡逑實(shí)驗(yàn)組邐對(duì)照組逡逑1邐2邐5邐S邋6邐7邐?邋吩逡逑P邋V、':逡逑術(shù)后3d邐:'丨邐卜:霸逡逑n邐m逡逑U:.::.‘人…N邐邐邐邋;逡逑i邋2邐3邋4邐5邐^邐 ̄邋^邐2邋Jl邋4邋5邋6邋7邋s邋v邋j0逡逑術(shù)后7d邐1邐 ̄邋J|逡逑\邋,-.…一一邋*邐i逡逑I邋rJJJJAZm邋.逡逑術(shù)后14d邐1逡逑圖3.術(shù)后不同時(shí)間點(diǎn)轉(zhuǎn)移皮瓣大體觀逡逑19逡逑
【學(xué)位授予單位】:廈門(mén)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2018
【分類號(hào)】:R622

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):2626265

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