【摘要】：目的:建立兔下肢缺血模型,應用自體骨髓間充質干細胞定向誘導分化為的血管內皮細胞細胞,聯(lián)合半乳糖凝集素-3移植于下肢缺血模型中,觀察下肢缺血模型中血管新生的效果,探討自體血管內皮細胞移植治療兔下肢缺血的可行性。方法:(1)采用骨髓穿刺的方法在16只新西蘭大白兔右下肢獲取骨髓標記并記錄,密度梯度離心聯(lián)合貼壁培養(yǎng)法分離純化得到骨髓間充質干細胞,采用第3代生長性狀穩(wěn)定的骨髓間充質干細胞,VEGF聯(lián)合bFGF定向誘導分化為血管內皮細胞,流式細胞術檢測CD_(31)和vWF的表達率。(2)采用新西蘭大白兔左下肢髂總動脈部結扎的方法建立新西蘭大白兔左下肢缺血模型(3)將建立下肢缺血模型的16只新西蘭大白兔隨機分為實驗組(n=8)和對照組(n=8),在缺血模型建立后第16天,在缺血下肢均勻選取15個點,實驗組注射自體血管內皮細胞及半乳糖凝集素-3,對照組注射生理鹽水,3周后行DSA造影觀察缺血下肢血管。(4)造影結束后處死新西蘭大白兔并留取缺血下肢標本,HE染色并計數(shù)毛細血管密度及毛細血管數(shù)/肌纖維數(shù)比值。結果:(1)流式細胞術檢測CD_(31)表達率為97.3±0.8%,vWF表達率為95.7%±1.1%,新西蘭大白兔骨髓間充質干細胞成功定向分化為血管內皮細胞。(2)DSA造影顯示實驗組下肢血管明顯多于對照組(P0.05)。(3)HE染色結果實驗組毛細血管密度及毛細血管數(shù)/肌纖維數(shù)比值均高于對照組(P0.05)。結論:(1)兔骨髓間充質干細胞可以定向分化為血管內皮細胞作為組織工程的種子細胞。(2)自體血管內皮細胞聯(lián)合半乳糖凝集素-3移植比對照組更多的介導缺血下肢的新生血管生成。
【圖文】：

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本文編號：2610956