【摘要】：目的:電燒傷漸進(jìn)性損傷的機(jī)制復(fù)雜,目前還不明朗。本課題組前期研究發(fā)現(xiàn),電燒傷漸進(jìn)性損傷與機(jī)體微血管損傷、微血流動(dòng)力學(xué)及流變學(xué)異常有關(guān)。燒傷可使局部創(chuàng)面及遠(yuǎn)隔組織發(fā)生微循環(huán)障礙,引起機(jī)體組織和器官缺血、缺氧,導(dǎo)致細(xì)胞代謝障礙。血小板是血液重要的組成部分,其流變行為異常不僅影響微循環(huán)血液流動(dòng),還影響微血管結(jié)構(gòu)和功能,其釋放反應(yīng)包括血小板α顆粒、致密顆粒及溶酶體內(nèi)所含有的大量生物活性物質(zhì)。PDGF最初從血小板中發(fā)現(xiàn),在損傷早期從血小板α顆粒釋放出來,啟動(dòng)并加速組織創(chuàng)傷修復(fù),是創(chuàng)傷愈合過程中較早出現(xiàn)的生長因子之一,主要作用表現(xiàn)在促進(jìn)創(chuàng)面愈合方面,其中BB型促進(jìn)愈合能力更強(qiáng),有助于加強(qiáng)肉芽組織的形成,縮短愈合時(shí)間。PF-5同樣也是由a顆粒分泌,具有增強(qiáng)止血效果。烏司他丁(Ulinastain,UTI)作為一種廣譜蛋白酶抑制劑,臨床上主要用于治療急性胰腺炎、急慢性肺炎、膿毒癥、全身炎癥反應(yīng)綜合征等,其主要作用是清除氧自由基、抑制炎癥介質(zhì)釋放、提高機(jī)體免疫力等,經(jīng)UTI治療可減輕各種原因所引起的組織細(xì)胞炎性損傷,改善組織微循環(huán)狀態(tài)等。UTI無免疫原性、副作用小,對機(jī)體的副反應(yīng)少,易在臨床上推廣使用。本實(shí)驗(yàn)旨在分析高壓電燒傷后早期大鼠血清PDGF和PF-5的含量變化,同時(shí)給予UTI干預(yù),探討UTI治療高壓電燒傷及其并發(fā)癥的可行性。方法:1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:健康成年SD大鼠,雄性,180只(體重220-310g,證書編號:1411023;購自河北醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心)。2.分組及給藥:采用隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì),將上述大鼠隨機(jī)分為高壓電燒傷鹽水組(鹽水組)、高壓電燒傷組(電傷組)、高壓電燒傷UTI治療組(烏司組),每組60只。將每組中60只大鼠隨機(jī)分為高壓電傷前15min、電傷后5min、1h、2h、4h、8h共6個(gè)時(shí)相組,每組10只。3.高壓電燒傷大鼠模型制備1)實(shí)驗(yàn)藥物的制備UTI溶液:劑量為2萬單位/kg(按大鼠體重計(jì)算),注射體積為2ml/kg。水合氯醛:0.3ml/100g(按大鼠體重計(jì)算)2)模型制備(1)電擊設(shè)備電路連接:正確連接電線,檢查實(shí)驗(yàn)電路安全性及元件和電路準(zhǔn)確性。(2)麻醉大鼠:各組大鼠腹腔注射水合氯醛溶液麻醉,注意麻醉深度。(3)模型制作:固定大鼠并聯(lián)接電路:取麻醉成功后3組大鼠,仰臥位固定在電路絕緣板上,左前肢、右后肢分別連接大小為1cm×1cm電極夾片。左前肢夾片連接火線,右后肢夾片連接零線,則左前肢為電流入口,右后肢為電流出口。閉合電路建立電燒傷模型:確保電路均連接正確,接通電源,調(diào)節(jié)升壓器輸出端電壓至2kv,接通輸出端電路,對實(shí)驗(yàn)大鼠實(shí)施接觸性高壓電擊,電擊時(shí)間控制在3s,然后斷開升壓器輸出端電閘,關(guān)閉總電源。各組給藥:鹽水組大鼠腹腔注射生理鹽水,注射量為2ml/kg。烏司組大鼠腹腔內(nèi)注射制備好的UTI(2萬單位/kg即2ml/kg)。以上各組大鼠分別記錄電擊時(shí)間點(diǎn)。4.標(biāo)本采集:對各組相應(yīng)時(shí)相組大鼠進(jìn)行心臟采血,收集全血約5-6ml,靜置約30min,3000轉(zhuǎn)/min,離心10min。離心后取上清液,于-70℃冰箱保存,備用。5.指標(biāo)檢測:ELISA雙抗夾心法檢測各組各時(shí)相大鼠血清中PF-5及PDGF的含量;本實(shí)驗(yàn)測得各指標(biāo)含量以O(shè)D值表示,根據(jù)試劑說明書繪制標(biāo)準(zhǔn)品擬合曲線,以測得的樣品OD值,計(jì)算血清中PF-5及PDGF的含量。6.數(shù)據(jù)分析:實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差((?)±s)表示,采用SPSS21.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。行兩因素析因設(shè)計(jì)資料的方差分析,多重比較采用LSD-t檢驗(yàn),以P0.05為具有顯著性差異。結(jié)果:1.大鼠PDGF的含量變化電傷組大鼠血清PDGF總體含量與鹽水組比較,(F=14.707,P0.05),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,電傷組大鼠血清中PDGF含量與鹽水組大鼠血清中PDGF含量不同;電傷后不同時(shí)相組大鼠血清PDGF含量差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=14.180,P0.05),2h、8h較高。(Fig1、Table 1)。烏司組電傷后各時(shí)相大鼠血清PDGF總體含量與鹽水組比較,(F=17.407,P0.05),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,烏司組大鼠血清中PDGF含量與鹽水組大鼠血清中PDGF含量不同;不同時(shí)相大鼠血清PDGF含量比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=17.587,P0.05),1h、2h較高。(Fig1、Table 1)。2.大鼠PF-5的含量變化電傷組與鹽水組比較,大鼠血清PF-5總體含量與鹽水組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=9.571,P0.05),電傷組大鼠血清中PF-5含量與鹽水組大鼠血清中PF-5含量不同;電傷組大鼠傷后不同時(shí)相血清PF-5含量差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=9.515,P0.05),5min、2h、8h較高。烏司組與鹽水組比較,大鼠血清PF-5總體含量與鹽水組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=15.170,P0.05),烏司組大鼠血清中PF-5含量與鹽水組大鼠血清中PF-5含量不同;不同時(shí)相大鼠PF-5含量差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=16.381,P0.05),1h、2h、8h較高。(Fig2、Table 2)。結(jié)論:1.高壓電燒傷可導(dǎo)致大鼠血液中PDGF含量升高,其含量在傷后8小時(shí)內(nèi)隨時(shí)間變化呈現(xiàn)逐漸增高趨勢。2.高壓電燒傷可導(dǎo)致大鼠血液中PF-5含量升高,其含量在傷后8小時(shí)內(nèi)隨時(shí)間變化呈現(xiàn)逐漸增高趨勢。3.高壓電燒傷早期應(yīng)用UTI治療會(huì)降低電傷后大鼠血液中PDGF和PF-5含量,促進(jìn)電傷后創(chuàng)傷組織修復(fù)。但UTI降低PDGF和PF-5含量的程度與具體方式需進(jìn)一步探索。
【圖文】：

圖 1 電傷組大鼠血清中 PDGF 含量與鹽水組的比較Fig.1 The compare of Rat PDGF content between control groupelectrical-injury groupNote: Compared with saline group * P<0.05**

圖 1 電傷組大鼠血清中 PDGF 含量與鹽水組的比較g.1 The compare of Rat PDGF content between control groupelectrical-injury groupNote: Compared with saline group * P<0.05**
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R647

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