【摘要】：背景：脊髓損傷（spinal cord injury, SCI）可引起損傷部位神經(jīng)元死亡、局部軸突變性及脫髓鞘等嚴重病變，進而引起嚴重的神經(jīng)損傷后果，是目前臨床上多發(fā)且致殘率較高疾病。同時，治療SCI也是當前醫(yī)學界面臨的重大難題。雪旺細胞（Schwann cells）是一種主要分布在周圍神經(jīng)系統(tǒng)中神經(jīng)元突起周圍的功能細胞，其外表面有一層基膜，在周圍神經(jīng)再生中起重要作用。神經(jīng)干細胞（neural stem cells, NSCs）不僅具有分化為少突膠質(zhì)細胞、星形膠質(zhì)細胞和神經(jīng)元的能力，同時能自我更新，可提供大量腦組織細胞。這兩種細胞都能在一定程度上幫助修復SCI，但其協(xié)同作用尚未進行相關(guān)研究。 目的：本研究通過聯(lián)合兩種細胞對大鼠損傷脊髓進行治療，從而觀察其行為學與組織病理學結(jié)果，以期尋求一種有效修復SCI的方法，并評價此方法的可行性與臨床指導意義。 方法：應用Allen’s造模改良法制備大鼠脊髓損傷模型，待SCI大鼠模型成功建立后，采用雪旺細胞、神經(jīng)干細胞、以及聯(lián)合雪旺細胞和神經(jīng)干細胞修復大鼠脊髓損傷，細胞輸入方法采用尾靜脈注射方法，輸入量為1105，連續(xù)注射7d。細胞輸入后1周、2周、4周和8周，用BBB評分評價大鼠運動功能的恢復情況，并用病理學染色觀察大鼠脊髓損傷修復狀況。 結(jié)果：在本研究中，我們神經(jīng)干細胞、雪旺細胞、以及聯(lián)合神經(jīng)干細胞和雪旺細胞對應用Allen’s成功制備的SCI大鼠進行治療。實驗結(jié)果表明聯(lián)合神經(jīng)干細胞和雪旺細胞組，大鼠運動功能恢復良好，特別是在注射后8周，BBB評分均大幅上升；而單獨神經(jīng)干細胞或雪旺細胞組，BBB評分有一定上升，但效果不如聯(lián)合應用組。HE染色結(jié)果發(fā)現(xiàn)可見聯(lián)合應用組脊髓恢復正常的灰質(zhì)和白質(zhì)，組織也不再變形或皺縮，形態(tài)恢復正常；而兩個單獨細胞組脊髓形態(tài)雖然有一定恢復，，受損范圍也進一步變小，且損傷區(qū)域周圍有較多白質(zhì)殘存，腹側(cè)半的灰質(zhì)和白質(zhì)也基本正常，但依然有少量微囊腔存留。 結(jié)論：我們的研究證明大鼠脊髓損傷可通過靜脈注射神經(jīng)干細胞和雪旺細胞，細胞歸巢到損傷部位后促進對損傷脊髓的修復。研究為臨床上治療脊髓損傷病人提供參考，有較大的臨床意義。
【圖文】：

結(jié) 果經(jīng)干細胞和雪旺細胞形態(tài)學觀察經(jīng)干細胞培養(yǎng)一周后在光學顯微鏡下觀察，細胞呈球狀集 NSCs 球呈懸浮生長，細胞增殖旺盛(圖 2A)。在原代培養(yǎng)時看見少許細胞碎片以及部分貼壁的雜細胞，而經(jīng)傳代后，上甚至消失，且生長狀態(tài)良好。在相差顯微鏡下，NSCs 呈球形小不一。同樣，原代培養(yǎng)的雪旺細胞中也含有一些雜質(zhì)，雪呈長卵圓形，其長軸與軸突平行，核周有少量胞質(zhì)（圖 2B）

顯示受損范圍變小，同時可觀察到較多的白質(zhì)殘損傷區(qū)域周圍，腹側(cè)半的灰質(zhì)和白質(zhì)未見明顯異常，但觀察到微囊腔存在（圖 3B）；第三組形態(tài)與第二組相似見部分恢復，但與正常對照相比仍有區(qū)別（圖 3C）；第學未見任何改變，可以觀察到 SCI 后受損組織仍嚴重變細損傷區(qū)域范圍大，震中位于中央，沒有觀察到明顯的白縱切震中切面，可觀察到白質(zhì)、灰質(zhì)界限消失，甚至可壞死囊腔，正常結(jié)構(gòu)已被完全破壞，（圖 4D）。表明通過干細胞和雪旺細胞，損傷的脊髓可顯著修復，兩者具有協(xié)
【學位授予單位】：吉林大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R651.2

【共引文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 代廣輝;修俊剛;周振軍;陳中燦;徐如祥;姜曉丹;杜謀選;;超順磁性氧化鐵對大鼠神經(jīng)干細胞生物學活性的影響[J];南方醫(yī)科大學學報;2007年01期

2 王振宇;佟雷;季麗莉;唐源遠;趙久紅;;EGF培養(yǎng)條件下NGF與BDNF對大鼠海馬神經(jīng)干細胞向神經(jīng)元分化的差異[J];解剖學研究;2008年02期

3 張晨鵬;孫曉光;黃鋼;;腫瘤熱療作用分子機制及臨床方式[J];國際腫瘤學雜志;2006年12期

4 胡曉霞;朱筑霞;陳剛;譚新杰;;胎鼠大腦皮層神經(jīng)干細胞的分離培養(yǎng)、分化及鑒定[J];貴陽醫(yī)學院學報;2008年04期

5 任延輝;;脊柱損傷手術(shù)治療臨床分析[J];當代醫(yī)學;2013年29期

6 王憲朋;王傳棟;劉陽;杜旭;王勤;;聚乳酸及其共聚物多孔支架的制備及性能比較[J];材料導報;2013年16期

7 朱峰;張艷;何巖;張會清;張英杰;;三氧化二砷對人腎癌細胞786-O增殖及其PI3K-Akt轉(zhuǎn)導途徑的影響[J];重慶醫(yī)學;2013年26期

8 李春波;陳增淦;陳統(tǒng)一;張峰;;周圍神經(jīng)缺損修復研究進展[J];國際骨科學雜志;2013年06期

9 馬文靜;王鴻勛;孫乃祥;白潔;張鑫;封華;;TMS-MEP評價大鼠脊髓損傷后運動功能障礙程度的研究[J];中國法醫(yī)學雜志;2014年02期

10 李超婧;MOHAMMED Abedalwafa;王富軍;葛鵬;陳培峰;王璐;;Effect of Molecular Weight of PCL on the Structure and Mechanical Properties of PCL/PET Composite Vascular Scaffold Prototype[J];Journal of Donghua University(English Edition);2013年05期

相關(guān)會議論文 前2條

1 Jun Wu;Tiansheng Sun;Chaoqun Ye;Jianhua Yao;Bing Zhu;Hongying He;;Clinical Observation of Fetal Olfactory Ensheathing Glia Transplantation(OEGT) in Patients With Complete Chronic Spinal Cord Injury[A];第三屆全國脊髓損傷治療與康復研討會論文集[C];2012年

2 張華;白金柱;;脊髓損傷后皮質(zhì)脊髓束的相關(guān)研究進展[A];第三屆全國脊髓損傷治療與康復研討會論文集[C];2012年

相關(guān)博士學位論文 前10條

1 陳超;腫瘤熱物理治療損傷區(qū)域精確控制的理論研究[D];上海交通大學;2011年

2 程映華;神經(jīng)干細胞修復脊髓損傷的組織工程學研究[D];蘇州大學;2002年

3 賈彬;表皮生長因子及雌雄激素對小鼠前列腺生長影響機制的研究[D];河北醫(yī)科大學;2004年

4 肖明;成人嗅神經(jīng)前體細胞移植修復大鼠脊髓損傷的實驗研究[D];南京醫(yī)科大學;2005年

5 陸艷;絲素在面神經(jīng)缺損修復中作用的實驗研究[D];復旦大學;2005年

6 吳永魁;仔豬冷應激反應中激素、HSP70及其mRNA的動態(tài)分析[D];吉林大學;2006年

7 周廣軍;5-氨基乙酰丙酸介導光動力學治療人胃癌的實驗研究[D];第一軍醫(yī)大學;2006年

8 鮑世韻;卡鉑碳包鐵納米籠殼聚糖微球靶向治療肝癌的實驗研究[D];華中科技大學;2006年

9 程細高;SPIO標記BMSCs治療股骨頭壞死及其活體MR示蹤的實驗研究[D];南昌大學;2008年

10 劉秀梅;胎鼠神經(jīng)干細胞培養(yǎng)及移植治療Tourette綜合征大鼠實驗研究[D];山東大學;2008年

相關(guān)碩士學位論文 前10條

1 馬騰;熱休克法制備高效樹突狀細胞腫瘤疫苗治療小鼠乳腺癌[D];泰山醫(yī)學院;2010年

2 孫宇;白藜蘆醇對大鼠皮層神經(jīng)元GABA_A受體介導電流的影響[D];安徽師范大學;2010年

3 張燕;人臍帶華通膠間充質(zhì)干細胞向髓核細胞誘導分化的實驗研究[D];第二軍醫(yī)大學;2011年

4 賈得巍;結(jié)合血管傳熱及微波輻照式加熱的高效全身熱療方法研究[D];清華大學;2010年

5 畢文浩;超順磁性氧化鐵標記西藏小型豬骨髓間充質(zhì)干細胞體內(nèi)示蹤的實驗研究[D];廣州醫(yī)學院;2011年

6 黨洪勝;腫瘤壞死因子和干擾素對體外乳鼠雪旺氏細胞增殖的影響[D];廣西醫(yī)科大學;2002年

7 呂文科;大鼠成骨細胞向神經(jīng)細胞轉(zhuǎn)化的體外誘導研究[D];成都中醫(yī)藥大學;2006年

8 盧暉;C-MYC C-FOS在良性膽道狹窄瘢痕組織中的表達及相關(guān)性研究[D];昆明醫(yī)學院;2006年

9 牛煥章;碘油磁液經(jīng)肝動脈選擇性栓塞熱療術(shù)治療肝癌的實驗研究[D];東南大學;2006年

10 劉玉鳳;惡性黑色素瘤熱療中熱休克蛋白70表達變化及與免疫相關(guān)作用[D];佳木斯大學;2007年

本文編號：2573841