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臍帶間充質(zhì)干細胞及PRP對軟骨損傷的修復研究

發(fā)布時間:2019-12-05 00:49
【摘要】:背景:關節(jié)軟骨是由膠原纖維構成的基本框架,表面較為光滑,屬于透明軟骨,呈淡藍色,有光澤,沒有神經(jīng)支、血管,關節(jié)軟骨一旦損傷,自我修復可能性極小,目前的再生方法是軟骨移植,但移植的軟骨來源有限,若為自體移植還會給患者帶來二次創(chuàng)傷并增加患者疼痛,異種移植又存在強烈的移植排斥反應,此技術尚未成熟而致應用受到一定的限制。骨髓間充質(zhì)干細胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)與人臍帶間充質(zhì)干細胞(Human umbilical cord mesenchymal stem cells,h UCMSCs)有很多功能相似,h UCMSCs在成骨及組織器官修復方面具有更強的擴增能力及低免疫原性,其成集落生長潛能及成骨時間早于骨髓等其他來源間充質(zhì)干細胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)。同時體外誘導實驗也證實了h UCMSCs具有明確的成骨作用,能夠修復骨損傷[1]。有學者認為h UCMSCs能夠替代BMSCs在研究中的應用。富血小板血漿(Platelet-rich plasma,PRP)與BMSCs共培養(yǎng),BMSCs有向軟骨細胞分化的傾向。PRP中含有很多種類的生長因子和蛋白質(zhì),是通過離心自體全血得到的血小板濃縮物。PRP中的這些生長因子通過多種途徑構成復雜的調(diào)控系統(tǒng),為促進骨組織修復提供一定的療效[2]。目的:通過實驗證實h UCMSCs和PRP能促進軟骨組織損傷的修復及觀察其聯(lián)合作用效果。方法:正常健康新西蘭大白兔40只,制備兔膝關節(jié)軟骨損傷模型,隨機將實驗動物分為4組,生理鹽水組,h UCMSCs組,PRP組,h UCMSCs聯(lián)合PRP組。兩次離心法制備PRP,制備第3代h UCMSCs。造模后生理鹽水組關節(jié)腔內(nèi)一次性注入生理鹽水0.5 ml;PRP組注入PRP0.5ml;h UCMSCs組注入1×107的h UCMSCs0.5ml;PRP(12.5%)聯(lián)合h UCMSCs(1×107)組注入兩種物質(zhì)的混合物共0.5ml。造模后第12周對軟骨損傷修復情況進行評價,評價內(nèi)容包括肉眼進行大體形態(tài)學觀察軟骨損傷修復情況;H-E染色光鏡下觀察損傷部位細胞修復情況;O’Driscoll組織學評分標準對造模后第12周軟骨損傷處的組織切片進行評分。結果與結論:第12周軟骨損傷修復后的大體形態(tài)學觀察、蘇木精-伊紅染色組織學觀察及O’Driscoll組織學評分結果均顯示h UCMSCs組、PRP組、PRP聯(lián)合h UCMSCs組對軟骨損傷的修復效果均優(yōu)于生理鹽水組,差異有顯著性(P0.05),PRP組、PRP聯(lián)合h UCMSCs組的修復效果優(yōu)于h UCMSCs組,差異有顯著性(P0.05)。得出結論h UCMSCs、PRP均能促進軟骨損傷的修復且PRP、PRP聯(lián)合h UCMSCs較單獨應用h UCMSCs的效果好。
【學位授予單位】:安徽醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2015
【分類號】:R684

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