【摘要】：目的探討在軟骨細(xì)胞模型中成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子通路對(duì)長(zhǎng)鏈非編碼RNA(long noncoding RNA,LncRNA)Malat1的調(diào)控作用。方法采用Ⅰ型成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體(fibroblast growth factor receptor 1,Fgfr1)組織特異性敲除小鼠和Ⅲ型成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體(fibroblast growth factor receptor 3,Fgfr3)敲除小鼠的原代軟骨,以及利用軟骨細(xì)胞系培養(yǎng)充當(dāng)軟骨細(xì)胞模型,成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子2(fibroblast growth factor 2,FGF2)及下游細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶(extracellular regulated protein kinases,ERK)通路阻斷劑U0126處理細(xì)胞,利用熒光定量PCR檢測(cè)Malat1的表達(dá)變化。在ATDC5細(xì)胞模型中通過(guò)siRNA轉(zhuǎn)染干擾Malat1或Fgfr1,質(zhì)粒轉(zhuǎn)染過(guò)表達(dá)Fgfr1,利用熒光定量PCR檢測(cè)Malat1的表達(dá),細(xì)胞計(jì)數(shù)檢測(cè)細(xì)胞增殖變化。結(jié)果 Malat1被干擾24、36、48、60 h后,ATDC5細(xì)胞增殖速度顯著減慢(P0.05),FGF2處理ATDC5細(xì)胞24 h后Malat1表達(dá)顯著下降(P0.05),且ERK通路抑制劑U0126處理細(xì)胞后FGF2對(duì)Malat1的抑制作用消失。Fgfr1條件性敲除或si-Fgfr1干擾后Malat1表達(dá)顯著升高(P0.05),且FGF2對(duì)Malat1的抑制作用消失,Fgfr1在ATDC5細(xì)胞中過(guò)表達(dá)后Malat1表達(dá)與對(duì)照組相比顯著降低(P0.05)。結(jié)論軟骨細(xì)胞中FGF2可能通過(guò)Fgfr1激活下游ERK通路,抑制了Malat1的表達(dá),從而影響軟骨細(xì)胞增殖。
【圖文】：

竅赴銃?C28I2以及人骨肉瘤細(xì)胞系SW1353均在傳代后48h收取，小鼠原代細(xì)胞于分離接種后72h收齲以NIH3T3細(xì)胞中Malat1的表達(dá)水平作為參照，結(jié)果表明，Malat1在小鼠原代軟骨細(xì)胞、小鼠軟骨前體細(xì)胞系A(chǔ)TDC5、人正常軟骨細(xì)胞系C28I2以及人骨肉瘤細(xì)胞系SW1353中均呈高豐度表達(dá)。以SW1353細(xì)胞中的表達(dá)豐度最高，其余幾種細(xì)胞中Malat1的表達(dá)豐度與NIH3T3中Malat1的表達(dá)豐度基本相等(圖1)。4.03.53.02.52.01.51.00.50Malat，

本文編號(hào)：2566161