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軟骨內(nèi)骨化過程中的血管侵入和軟骨細(xì)胞的分化

發(fā)布時間:2019-04-27 15:40
【摘要】:研究目的:在骨發(fā)育和骨折愈合中血管新生和骨形成是相耦合的。盡管人們已早有了解,但具體關(guān)系還沒有深入的探究。本研究通過檢測CD31、Ⅱ型膠原、Fas在軟骨內(nèi)骨化過程中的表達(dá)變化,探討血管侵入和軟骨骨化的關(guān)系,以及軟骨細(xì)胞的退變?nèi)ハ虻纳飳W(xué)機制。研究方法:取1到19天內(nèi)奇數(shù)天小鼠雙側(cè)股骨,斷頸法處死,常規(guī)包埋,固定,切片。采用HE染色法觀察軟骨的形態(tài)學(xué)變化和血管侵入情況;采用免疫組織化學(xué)方法觀察CD31、Ⅱ型膠原蛋白、Fas的表達(dá)情況;采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)法檢測CD31m RNA、Ⅱ型膠原m RNA的表達(dá)情況。研究結(jié)果:HE染色發(fā)現(xiàn),前5天內(nèi)血管侵入較少,7到13天血管侵入大量增加,15到19天內(nèi),鼠股骨內(nèi)的軟骨基質(zhì)開始鈣化,血管減少。免疫組化染色結(jié)果發(fā)現(xiàn):CD31主要在肥大軟骨細(xì)胞和成骨區(qū)內(nèi)表達(dá);Ⅱ型膠原蛋白主要在軟骨增生期和肥大軟骨細(xì)胞內(nèi)表達(dá);Fas主要在肥大軟骨細(xì)胞和成骨區(qū)內(nèi)表達(dá)。RT-PCR結(jié)果發(fā)現(xiàn):CD31m RNA、Ⅱ型膠原m RNA在1到19天的仔鼠股骨中均有表達(dá)。隨著骨發(fā)育的加快,血管侵入增多,CD31m RNA的表達(dá)均隨日齡的增加而增加,骨發(fā)育進(jìn)程減緩,CD31m RNA的表達(dá)下降。CD31m RNA的表達(dá)的峰值出現(xiàn)在第13天。Ⅱ型膠原m RNA的表達(dá)的峰值出現(xiàn)在第17天。研究結(jié)論: 1)骨骺板生長區(qū)和次級骨化中心具有不同的成骨方式,骨次級骨化中心軟骨細(xì)胞無增生期分化。股骨內(nèi)骨化過程中,血管侵入與骨發(fā)育相互協(xié)調(diào),共同促進(jìn)軟骨內(nèi)骨化;2)在骺軟骨板的關(guān)節(jié)方向,存在一個骨化面,形成并列骨板;3)肥大軟骨細(xì)胞不是終末細(xì)胞,具有內(nèi)皮表型,并可能轉(zhuǎn)分化為血管內(nèi)皮細(xì)胞,參與血管的構(gòu)建,促進(jìn)血管的入侵。
[Abstract]:Objective: angiogenesis and bone formation are coupled during bone development and fracture healing. Although people have long known, but the specific relationship has not been in-depth exploration. In this study, we examined the expression of CD31, type 鈪,

本文編號:2467096

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