本文選題：SCAP + 軟骨細(xì)胞��； 參考：《重慶醫(yī)科大學(xué)》2016年碩士論文

【摘要】：目的構(gòu)建固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白裂解激活蛋白(SREBP cleavage activating protein,SCAP)腺病毒,探討其對ATDC5軟骨干細(xì)胞增殖及凋亡的影響。為進(jìn)一步研究SCAP基因的生物學(xué)功能奠定基礎(chǔ),也為探討SCAP介導(dǎo)的脂代謝與骨關(guān)節(jié)炎的關(guān)系提供一定的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)和理論依據(jù)。方法應(yīng)用AdEasyTM腺病毒載體系統(tǒng),構(gòu)建并包裝Ad-SCAP和靶向SCAP的siRNA腺病毒siSCAP1和siSCAP2,RT-PCR和Western blot法檢測其在ATDC5細(xì)胞中的表達(dá)。FCM檢測SCAP重組腺病毒對ATDC5細(xì)胞增殖和凋亡的影響;Western blot檢測SCAP重組腺病毒感染ATDC5細(xì)胞時(shí),凋亡相關(guān)蛋白Cleaved Caspase-3,p-JNK的表達(dá)。結(jié)果成功構(gòu)建重組腺病毒Ad-SCAP和Ad-siSCAP;Ad-SCAP處理組ATDC5細(xì)胞凋亡率明顯增加(P0.05),增殖率明顯降低(P0.05);Ad-si SCAP處理組ATDC5細(xì)胞增殖率明顯增加(P0.05),凋亡率明顯降低(P0.05)。結(jié)論ATDC5細(xì)胞中,過表達(dá)SCAP能促進(jìn)其凋亡抑制增殖而減少SCAP的表達(dá)則抑制ATDC5細(xì)胞的凋亡、促進(jìn)增殖。
[Abstract]:Objective to construct a steroid regulatory element binding protein lysation-activating protein (SREBP cleavage activating protein) adenovirus and to investigate its effect on proliferation and apoptosis of ATDC5 chondrocyte stem cells. It will lay a foundation for further study of the biological function of SCAP gene and provide a certain experimental and theoretical basis for the study of the relationship between lipid metabolism mediated by SCAP and osteoarthritis. Methods AdEasyTM adenovirus vector system was used. Construction and packaging of Ad-SCAP and siRNA adenovirus siSCAP1 and siSCAP2mRNA targeting SCAP were used to detect the expression of SCAP in ATDC5 cells by RT-PCR and Western blot. The effects of SCAP recombinant adenovirus on the proliferation and apoptosis of ATDC5 cells were detected. Western blot was used to detect SCAP recombinant adenovirus infection on ATDC5 cells. Expression of apoptosis-related protein Cleaved Caspase-3, p-JNK. Results the apoptosis rate of ATDC5 cells was significantly increased in the recombinant adenovirus Ad-SCAP and Ad-SCAP treated with Ad-SCAP, and the proliferation rate was significantly decreased in the ATDC5 cells treated with P0.05 and Ad-si SCAP. Conclusion overexpression of SCAP can promote apoptosis and inhibit proliferation of ATDC5 cells, while decreasing the expression of SCAP can inhibit apoptosis and promote proliferation of ATDC5 cells.
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R684.3

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本文編號：1983846