本文選題：創(chuàng)傷性顱腦損傷 + 骨折愈合��； 參考：《蘭州大學(xué)》2017年碩士論文

【摘要】：目的:腦信號(hào)蛋白3A(Semaphorin3A,Sema3A)屬于信號(hào)素家族中Ⅲ型分泌型蛋白,參與神經(jīng)損傷后參與少突膠質(zhì)細(xì)胞的定向遷移和軸突再生。Sema3A在骨穩(wěn)態(tài)和骨重建方面的研究越來(lái)越多,大量研究顯示Sema3A在骨重建及骨骼發(fā)育疾病中發(fā)揮重要作用。神經(jīng)氈蛋白-1(neuropilin-1,Nrp-1)是一種跨膜糖蛋白,作為Sema3及VEGF家族受體,在神經(jīng)和血管系統(tǒng)中扮演重要角色。Sema3A/Nrp-1在調(diào)節(jié)骨的神經(jīng)支配、骨骼發(fā)育及骨重建等方面有重要作用;Nrp-1與VEGF-A165及VEGFR2結(jié)合,可增加細(xì)胞膜VEGFR2含量,增強(qiáng)此信號(hào)途徑。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)創(chuàng)建創(chuàng)傷性顱腦損傷(traumatic brain injury,TBI)合并脛骨骨折模型,探索Sema3A/Nrp-1信號(hào)通路在神經(jīng)損傷后骨折愈合中的表達(dá)變化及作用機(jī)制。方法:本實(shí)驗(yàn)取8-10周齡Wistar雌性大鼠192只,體重量220-250g,適應(yīng)性喂養(yǎng)2周,隨機(jī)分為對(duì)照組(C組)、脛骨骨折組(F組)、創(chuàng)傷性顱腦損傷組(TBI組)、創(chuàng)傷性顱腦損傷伴脛骨骨折組(TBI+F組),每組48只。F組制備單純右側(cè)脛骨骨折模型,TBI組采用改進(jìn)后的Feeney法自由落體顱腦損傷裝置制造TBI模型,TBI+F組制備TBI合并脛骨骨折模型,C組不作處理。分別于術(shù)后3、5、7、14、21及28d處死8只動(dòng)物,開(kāi)胸心臟取血及右側(cè)脛骨取材。行血清ELISA測(cè)定各組不同時(shí)間點(diǎn)血清Sema3A表達(dá);采用HE染色、免疫組織化學(xué)染色及Western blot法對(duì)骨痂組織中Sema3A、Nrp-1及VEGF進(jìn)行定位、定量檢測(cè),并進(jìn)行相關(guān)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果:經(jīng)ELISA測(cè)定各組不同時(shí)間點(diǎn)Sema3A在血清中的變化,可發(fā)現(xiàn)F組、TBI組、TBI+F組各個(gè)時(shí)間點(diǎn)血清Sema3A含量均較對(duì)照組增高,并且于傷后第3天升高達(dá)到最高值,此后呈逐漸降低趨勢(shì),7天時(shí)再次逐漸升高,F組于14天到達(dá)最高點(diǎn)后逐漸下降,28天時(shí)接近正常;TBI組、TBI+F于21天再次到達(dá)最高,但高峰較第3天較低,此后呈下降趨勢(shì),但仍高于對(duì)照組。HE染色示C組在各時(shí)間點(diǎn)未見(jiàn)明顯變化。術(shù)后3、5 d,F組、TBI+F組骨折斷端無(wú)明顯骨痂生長(zhǎng),可見(jiàn)炎性細(xì)胞及纖維組織填充;TBI組與C組無(wú)差異。7、14d,F組、TBI+F組纖維組織自骨膜下向斷端間隙生長(zhǎng),骨外膜軟骨細(xì)胞增生,逐漸向斷端生成軟骨痂,TBI+F組與F組相比骨外膜軟骨細(xì)胞體積大、排列疏松,類(lèi)骨質(zhì)多;TBI組與C組相比,骨膜稍紊亂,骨膜下骨質(zhì)輕度增生,骨小梁未見(jiàn)明顯差異。21、28d,F組、TBI+F組軟骨痂逐漸被新生骨小梁代替,TBI+F組與F組相比,骨小梁排列疏松、結(jié)構(gòu)紊亂、密度低,骨痂面積較大,殘存少量軟骨細(xì)胞及類(lèi)骨質(zhì);TBI組與C組比較無(wú)明顯差異。免疫組織化學(xué)檢測(cè)示,Sema3A、Nrp-1陽(yáng)性染色在TBI+F組軟骨細(xì)胞表達(dá)高于F組,尤其在7、14、21 d;Sema3A陽(yáng)性染色在F組新生骨小梁成骨細(xì)胞表達(dá)較TBI+F組高,尤其在14、21 d;差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。Western blot檢測(cè)示,Sema3A、Nrp-1及VEGF在F組、TBI+F組骨折愈合過(guò)程中表達(dá)趨勢(shì)相同,但在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)TBI+F組Sema3A、Nrp-1蛋白相對(duì)表達(dá)量高于F組(P0.05),下降緩慢;尤其在術(shù)后14、21和28 d。同時(shí)TBI+F組Sema3A/VEGF比率高于F組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),TBI組Sema3A蛋白相對(duì)表達(dá)量在術(shù)后7、14、21、28 d顯著高于C組(P0.05)。結(jié)論:神經(jīng)損傷后Sema3A/Nrp-1在骨折愈合過(guò)程中呈異常表達(dá),可能通過(guò)促進(jìn)軟骨細(xì)胞分化與增殖、阻止神經(jīng)纖維在軟骨痂的長(zhǎng)入、降低成骨細(xì)胞分化,參與了神經(jīng)損傷后病理性骨痂的形成。
[Abstract]:Objective : To investigate the effects of Sema3A / Nrp - 1 on bone remodeling and bone remodeling . The results showed that Sema3A / Nrp - 1 plays an important role in bone remodeling and bone remodeling . The results showed that Sema3A , Nrp - 1 and VEGF were significantly higher than those in group C ( P0.05 ) . The results showed that Sema3A , Nrp - 1 and VEGF were significantly higher than those in group C ( P0.05 ) .

【學(xué)位授予單位】：蘭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類(lèi)號(hào)】：R651.15

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6 徐q，

本文編號(hào)：1859173