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miR-155-5p通過調(diào)節(jié)SOX1的表達(dá)促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞系MCF-7的侵襲與遷移

發(fā)布時(shí)間:2018-05-03 02:03

  本文選題:乳腺癌 + MCF- ; 參考:《華中科技大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版)》2017年05期


【摘要】:目的研究腫瘤相關(guān)微小RNA(microRNA,miRNA)miR-155-5p在乳腺癌細(xì)胞系MCF-7中調(diào)控性別決定區(qū)Y框蛋白1(sex determining region Y-box 1,SOX1)蛋白表達(dá)的機(jī)制,探討其對MCF-7侵襲轉(zhuǎn)移能力的影響。方法在乳腺癌細(xì)胞系MCF-7中上調(diào)或下調(diào)miR-155-5p的表達(dá),采用小室遷移實(shí)驗(yàn)(Transwell)檢測細(xì)胞的遷移、侵襲能力的改變;realtime PCR及Western blot法分別檢測SOX1mRNA及蛋白表達(dá)水平;免疫熒光檢測SOX1蛋白的分布及表達(dá)水平;雙熒光素酶報(bào)告實(shí)驗(yàn)檢測miR-155-5p與SOX1mRNA的3'-UTR結(jié)合情況。結(jié)果上調(diào)miR-155-5p,MCF-7細(xì)胞的侵襲與遷移能力增強(qiáng),SOX1mRNA及蛋白表達(dá)水平下降(均P0.05);反之,抑制miR-155-5p,細(xì)胞的侵襲與遷移能力減弱,SOX1表達(dá)上升(均P0.05)。隨后的雙熒光素酶報(bào)告實(shí)驗(yàn)表明,miR-155-5p可與SOX1mRNA 3′-UTR端的特定序列結(jié)合,調(diào)控SOX1表達(dá)轉(zhuǎn)錄后水平。結(jié)論 miR-155-5p通過抑制SOX1的表達(dá)來促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞系MCF-7的侵襲與遷移。
[Abstract]:Objective to investigate the mechanism of microRNA-miRNA-miR-155-5p associated with tumor in regulating the expression of sex-determining Y frame protein (1(sex determining region Y-box 1) in breast cancer cell line MCF-7, and to explore its effect on the invasion and metastasis of MCF-7. Methods the expression of miR-155-5p was up-regulated or down-regulated in breast cancer cell line MCF-7. Cell migration was detected by transwell assay. The expression of SOX1mRNA and protein were detected by realtime PCR and Western blot respectively. The distribution and expression of SOX1 protein were detected by immunofluorescence, and the 3'-UTR binding between miR-155-5p and SOX1mRNA was detected by double luciferase report assay. Results upregulation of invasion and migration of miR-155-5pMCF7 cells enhanced the expression of SOX1 mRNA and protein (all P0.05A), whereas inhibition of miR-155-5p decreased the ability of invasion and migration of MCF-7 cells to decrease the expression of SOX1 (all P0.05A). The subsequent double luciferase report showed that miR-155-5p could bind to the specific sequence of SOX1mRNA 3'-UTR terminal and regulate the post-transcriptional level of SOX1 expression. Conclusion miR-155-5p can promote the invasion and migration of breast cancer cell line MCF-7 by inhibiting the expression of SOX1.
【作者單位】: 北京協(xié)和醫(yī)院整形外科;華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬梨園醫(yī)院皮膚美容科;華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬同濟(jì)醫(yī)院核醫(yī)學(xué)科;
【分類號】:R737.9

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本文編號:1836466

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