發(fā)布時間：2018-04-13 09:43

  本文選題：miR-181b + 核轉(zhuǎn)錄因子κB��； 參考：《昆明醫(yī)科大學(xué)》2017年碩士論文

【摘要】：深靜脈血栓形成是心血管系統(tǒng)的常見疾病,其發(fā)病率高,并發(fā)癥肺栓塞可嚴重威脅患者的生命,因此危害極大。然而,深靜脈血栓形成的機制尚未研究清楚,目前最具有代表性學(xué)說為Virchow所提出提出的靜脈血栓形三大主要因素,包括血流淤滯、血管內(nèi)皮障礙及血液高凝狀態(tài)。導(dǎo)致血管內(nèi)皮障礙的常見原因有炎癥、氧化應(yīng)激、局部機械刺激等。本課題主要就miR-181b、NF-κB、粘附分子(VCAM-1、ICAM-1、E-selectin)等標志物在深靜脈血栓形成過程中的作用及相互關(guān)系進行試驗研究。通過動物造模試驗及細胞檢測等手段,就上述標志物與深靜脈血栓形成的相關(guān)機理進行深入探討。[目的]1、選用SFP級C57BL/6小鼠進行狹窄法造模,分別通過小鼠造模后的成栓率、血栓直徑、血栓長度、血栓濕重等指標對比觀察miR-181b過表達或抑制組、DVT組腔靜脈血栓模型構(gòu)建后腔靜脈血栓形成的變化情況;2、通過實時定量PCR實驗檢測法檢測觀察靜脈內(nèi)皮VCAM-1、E-selectin、ICAM-1等粘附分子的表達變化情況,檢測觀察靜脈內(nèi)皮P65表達變化;3、探討miR-181b對DVT形成的影響及可能的其影響機制。[方法]1、選用SPF級C57BL/6小鼠,體重約18-22g,雌雄不限,隨機分為6組,每組各20只:正常對照組(Normal組,n=20)、單純造模組(DVT組,n=20)、miR-181b 過表達組(181b-m, n=20)、miR-181b 抑制組(181b-i, n=20)、miRNA過表達組(NS-m, n=20)、miRNA 抑制組(NS-i, n=20), Normal組及 DVT 組于造模前24h尾靜脈注射0.2ml生理鹽水;NS-m組于造模前24小時尾靜脈注射miRNA mimics 1nmol,NS-i組于造模前24小時尾靜脈注射miRNA inhibitor 1nmol,181b-m 組于造模前 24 小時尾靜脈注射 miR-181b-1 mimics 1nmol,181b-i組于造模前 24 小時尾靜脈注射 miR-181b-1 inhibitor 1 nmol。miRNA mimics、miRNA inhibitor、miR-181b-1 mimics、miR-181b-1 inhibitor 均用 Lipofectamine 2000溶液配制為0.2ml混合液體。2、參考本課題組歷年研究經(jīng)驗及相關(guān)經(jīng)典文獻報道,采用infrarenal vena cava (IVC)狹窄法構(gòu)建小鼠腔靜脈血栓模型,于造模后24h對小鼠進行解剖,觀察小鼠血栓形成情況,留取腔靜脈血栓部位靜脈壁組織,采用實時定量PCR方法檢測靜脈內(nèi)皮miR-181b表達情況,檢測P65表達情況,檢測VCAM-1、E-selectin、ICAM-1等粘附分子的表達變化情況;3、采用SPSS 22.0統(tǒng)計學(xué)軟件分析實驗數(shù)據(jù),綜合分析討論miR-181b對深靜脈血栓形成的影響及其可能的具體影響機制。[結(jié)果]1、miR-181b過表達后小鼠的腔靜脈血栓成栓率、血栓直徑、血栓長度、血栓濕重等指標較DVT組降低;而miR-181b的表達被抑制后小鼠的成栓率、血栓直徑、血栓長度、血栓濕重等指標較DVT組明顯升高。其差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。2、miR-181b過表達后小鼠腔靜脈內(nèi)皮VCAM-1、E-selectin、ICAM-1等粘附分子的表達較DVT組明顯降低,而miR-181b的表達被抑制后VCAM-1、E-selectin、ICAM-1等粘附分子表達較DVT組明顯升高。其差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。3、miR-181b過表達后小鼠血栓靜脈內(nèi)皮P65的表達較DVT組減少,而miR-181b的表達被抑制后靜脈內(nèi)皮P65的表達較DVT組明顯增加。其差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。[結(jié)論]1、miR-181b可以抑制小鼠靜脈血栓模型的成栓效應(yīng)。2、miR-181b可以抑制靜脈內(nèi)皮ICAM-1、VCAM-1、E-selectin等粘附分子的表達。3、miR-181b可以抑制靜脈內(nèi)皮P65的表達。4、miR-181b可能通過抑制NF- κ B信號通路的激活及內(nèi)皮細胞粘附分子的表達來抑制DVT的形成。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：昆明醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R68;R543.6

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前2條

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2 李幼生;粘附分子單克隆抗體在器官移植排斥治療中的應(yīng)用[J];細胞與分子免疫學(xué)雜志;1997年01期

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本文編號：1743955