胎盤羊膜對(duì)兔膽道損傷后早期修復(fù)過(guò)程中α-SMA表達(dá)的影響
本文選題:膽管損傷 切入點(diǎn):炎癥 出處:《遵義醫(yī)學(xué)院》2017年碩士論文
【摘要】:目的:研究脫細(xì)胞羊膜對(duì)兔膽管損傷早期修復(fù)過(guò)程中α-SMA表達(dá)的影響以推斷脫細(xì)胞羊膜是否在膽道瘢痕的修復(fù)方面有促進(jìn)作用,并與丹參干預(yù)效果進(jìn)行比較。方法:取新鮮胎盤羊膜,經(jīng)過(guò)清洗、分離、浸泡等脫細(xì)胞處理后用于實(shí)驗(yàn)組干預(yù)。將52只兔使用隨機(jī)數(shù)字表法分成4組:假手術(shù)組(A組),模型組(B組),陽(yáng)性對(duì)照組(C組)及實(shí)驗(yàn)組(D組)。A組兔開腹后游離膽管,關(guān)腹。B、C、D組使用鉗夾法建立兔膽管損傷模型,B組、C組關(guān)腹,脫細(xì)胞羊膜覆蓋D組膽管損傷處,C組術(shù)后第2日開始經(jīng)靜脈注射丹參注射液,每日1次,連續(xù)1周。B組、D組術(shù)后第2日開始經(jīng)靜脈注射同體積的生理鹽水,每日1次,持續(xù)1周。在干預(yù)完成后2周、4周、8周、12周四個(gè)時(shí)間點(diǎn)分別取材,使用HE染色法觀察膽管損傷處組織的炎癥反應(yīng)輕重及組織形態(tài)變化情況;通過(guò)免疫組化法、Western Blot法檢測(cè)4組在四個(gè)不同時(shí)間點(diǎn)α-SMA的表達(dá)量。結(jié)果:1.大體和鏡下觀察:A組:無(wú)膽管狹窄,可見組織粘連,局部有炎癥細(xì)胞浸潤(rùn),B、C組造模后均出現(xiàn):膽管損傷處下端狹窄、上端膽管擴(kuò)張,周圍組織粘連,局部組織結(jié)構(gòu)破壞、細(xì)胞壞死、炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)、組織增生等情況,D組:膽管損傷處下端狹窄、上端膽管擴(kuò)張及組織粘連較輕,有局部組織結(jié)構(gòu)破壞、細(xì)胞壞死、炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)、組織增生。在同一時(shí)間點(diǎn),D組的炎癥反應(yīng)程度較B組輕。2.在蛋白水平檢驗(yàn)?zāi)懝軗p傷組織中α-SMA的表達(dá):在相同時(shí)間點(diǎn)下,D組的α-SMA表達(dá)水平低于C組(P0.05),C組α-SMA表達(dá)水平低于B組(P0.05);A組α-SMA的表達(dá)水平無(wú)明顯變化(P0.05);B、C、D各組α-SMA的表達(dá)水平隨時(shí)間推移而增加(P0.05)。結(jié)論:1.在膽管損傷后早期瘢痕修復(fù)過(guò)程中,α-SMA表達(dá)水平隨時(shí)間推移而增加;2.脫細(xì)胞羊膜固定覆蓋受損膽管處可以降低損傷處炎癥反應(yīng)程度及α-SMA的表達(dá)水平;3.相對(duì)于丹參,脫細(xì)胞羊膜對(duì)瘢痕形成的干預(yù)效果更佳
[Abstract]:Aim: to study the effect of acellular amniotic membrane on 偽 -SMA expression during early repair of bile duct injury in rabbits, and to infer whether acellular amniotic membrane can promote the repair of bile duct scar, and to compare the effect of acellular amniotic membrane with Salvia miltiorrhiza.Methods: the fresh placenta amniotic membrane was washed, separated and soaked.52 rabbits were randomly divided into 4 groups: sham operation group (group A), model group (group B), positive control group (group C) and experimental group D group (group A).The model of bile duct injury in rabbits was established by clamp method. The amniotic membrane was used to cover the bile duct injury in group D on the 2nd day after operation, the injection of Salvia miltiorrhiza was injected intravenously, once a day.Group D received intravenously the same volume of normal saline once a day for 1 week.After 2 weeks, 4 weeks, 8 weeks and 12 days, samples were collected, and the severity of inflammatory reaction and the changes of tissue morphology were observed by HE staining.The expression of 偽 -SMA in 4 groups was detected by immunohistochemical method and Western Blot method at four different time points.The result is 1: 1.Gross and microscopic observation in group A: no bile duct stricture, visible tissue adhesion, local inflammatory cell infiltration. All the models appeared in group C: stricture at the lower end of bile duct injury, dilatation of upper bile duct, adhesion of surrounding tissue, destruction of local tissue structure.Cell necrosis, inflammatory cell infiltration and tissue proliferation were found in group D: stricture at the lower end of bile duct injury, slight dilatation and adhesion of upper bile duct, destruction of local tissue structure, necrosis of cells, infiltration of inflammatory cells, and tissue proliferation.The degree of inflammation in group D was lighter than that in group B at the same time.The expression of 偽 -SMA in bile duct injury tissue was detected at the same time: the expression level of 偽 -SMA in group D was lower than that in group C (P 0.05) and group C was lower than that in group B (P 0.05). There was no significant change in the expression of 偽 -SMA in group A (P 0.05).The level of P0. 05% increased with time.Conclusion 1.During the early scar repair after bile duct injury, 偽 -SMA expression increased with time.Acellular amniotic membrane fixation covering the damaged bile duct could reduce the degree of inflammation and the expression level of 偽 -SMA.Compared with Salvia miltiorrhiza, the effect of acellular amniotic membrane on scar formation is better.
【學(xué)位授予單位】:遵義醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類號(hào)】:R657.4
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本文編號(hào):1693253
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