本文選題：臍血干細(xì)胞移植　切入點：核心結(jié)合因子α亞基　出處：《中國組織工程研究》2017年09期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：背景:Runx2在成骨分化的信號途徑中起核心作用,在誘導(dǎo)干細(xì)胞成骨分化及促進(jìn)骨愈合方面具有重要的研究意義。目的:觀察Runx2基因高表達(dá)對臍血間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化的影響。方法:(1)擴(kuò)增Runx2基因,利用腺病毒載體構(gòu)建Runx2重組腺病毒(pA d-Runx2),檢測病毒滴度后用重組腺病毒感染臍血間充質(zhì)干細(xì)胞,并于熒光顯微鏡下觀察熒光表達(dá)變化;(2)感染后1,3,7,14 d采用實時熒光定量PCR及Western blot檢測臍血間充質(zhì)干細(xì)胞Runx2、BMP-2、OCN、ALP的mRNA和蛋白表達(dá)。結(jié)果與結(jié)論:(1)成功制備pA d-Runx2重組腺病毒,病毒滴度為1.7×10~(10)pfu/L;(2)Runx2重組腺病毒感染臍血間充質(zhì)干細(xì)胞后細(xì)胞形態(tài)呈成骨樣細(xì)胞改變,對照組細(xì)胞無明顯變化;(3)感染組細(xì)胞Runx2、BMP-2、OCN、ALP mRNA和蛋白的表達(dá)量隨感染時間的增加均有不同程度的上調(diào);(4)結(jié)果表明,高表達(dá)Runx2基因腺病毒感染臍血間充質(zhì)干細(xì)胞,能夠上調(diào)BMP-2、OCN、ALP基因的表達(dá),從而促進(jìn)臍血間充質(zhì)干細(xì)胞的成骨分化。
[Abstract]:Background: Runx2 plays a central role in the signaling pathway of osteogenic differentiation. It has important significance in inducing osteogenic differentiation of stem cells and promoting bone healing. Objective: to observe the effect of high expression of Runx2 gene on osteogenic differentiation of umbilical cord blood mesenchymal stem cells. Adenovirus vector was used to construct Runx2 recombinant adenovirus pAd-Runx2. After detecting the titer of the recombinant adenovirus, mesenchymal stem cells were infected with recombinant adenovirus, and the recombinant adenovirus was used to infect umbilical cord blood mesenchymal stem cells. The expression of mRNA and protein in umbilical cord blood mesenchymal stem cells Runx2BMP-2OCN-ALP was detected by real-time quantitative PCR and Western blot on the 14th day after infection. Results and conclusion the recombinant adenovirus pAd-Runx2 was successfully prepared. The titer of the virus was 1.7 脳 10 ~ (10) pfup / L ~ (2 +) rrrrrx2 recombinant adenovirus infected umbilical cord blood mesenchymal stem cells with osteoblast-like changes in morphology. The results showed that the expression of mRNA and protein of Runx2BMP-2OCNP in infected cells were up-regulated in varying degrees with the time of infection. The results showed that adenovirus with high expression of Runx2 gene was infected with mesenchymal stem cells of umbilical cord blood. It can up-regulate the expression of BMP-2 OCN-ALP gene and promote the osteogenic differentiation of umbilical cord blood mesenchymal stem cells.
【作者單位】： 新鄉(xiāng)市中心醫(yī)院脊柱外科;鄭州大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院;
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項目(U1404313),課題名稱:HDAC1雙向調(diào)控在臍帶MSCs向神經(jīng)元樣細(xì)胞定向分化過程中的作用和機制研究~~
【分類號】：R68

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本文編號：1631865