本文選題：富血小板血漿　切入點(diǎn)：兔坐骨神經(jīng)斷裂　出處：《西南醫(yī)科大學(xué)》2017年碩士論文　論文類(lèi)型：學(xué)位論文

【摘要】：目的:通過(guò)對(duì)周?chē)窠?jīng)斷裂動(dòng)物模型的建立,用制備的自體富血小板血漿(platelet-rich plasma,PRP)在不同時(shí)間點(diǎn)種植于損傷的周?chē)窠?jīng)局部,研究PRP對(duì)周?chē)窠?jīng)斷裂縫合后局部微環(huán)境變化的影響。分析周?chē)窠?jīng)再生修復(fù)與局部微環(huán)境參數(shù)VEG、IGF-1等是否存在量變關(guān)系,觀察不同時(shí)段分次局部給予PRP對(duì)周?chē)窠?jīng)的再生修復(fù)是否會(huì)產(chǎn)生持續(xù)的誘導(dǎo)、促進(jìn)作用,并用宏觀、微觀及生化等指標(biāo)驗(yàn)證PRP對(duì)治療周?chē)窠?jīng)損傷的可行性,分析其可能存在的原理及機(jī)制。為周?chē)窠?jīng)損傷尋找一種合理、經(jīng)濟(jì)、有效、操作便利的治療方法。方法:1.選取同產(chǎn)地、月齡與體重相當(dāng)?shù)男挛魈m大白兔48只,雌雄不限。隨機(jī)分成四組,A組(假手術(shù)組)、B組(NS組)、C組(S-PRP組)、D組(T-PRP組)。2.動(dòng)物模型建立:2.1先C、D兩組每只實(shí)驗(yàn)大白兔用帶抗凝劑的注射器抽取耳緣靜脈血,用Landesberg兩次離心法制備PRP,進(jìn)行血小板檢測(cè)。2.2全部實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:無(wú)菌操作,實(shí)驗(yàn)兔解剖坐骨神經(jīng),A組只做暴露,B、C、D組于梨狀肌下緣約1.5cm完全切斷,再用8-0顯微縫線均勻縫合4針。2.3 B組在神經(jīng)縫合斷端及周?chē)⑷肷睇}水(NS)0.4ml,C、D組在神經(jīng)縫合斷端及周?chē)⑷隤RP 0.4ml(C、D組于手術(shù)前同上述方法制備PRP備用),縫合術(shù)口。術(shù)后大白兔非實(shí)驗(yàn)側(cè)臀部肌注抗生素預(yù)防感染處理3天,限制部分活動(dòng),相同生存環(huán)境及飼養(yǎng)方法。3.分別術(shù)后每周相同時(shí)間,在超聲引導(dǎo)下,B組在坐骨神經(jīng)縫合口周緣注射0.4ml NS,D組在坐骨神經(jīng)縫合口周緣注射0.4ml PRP(其中D組均術(shù)前抽取全血,制備PRP待用)。4.觀察指標(biāo):4.1術(shù)后12周,同造模方法解剖所有動(dòng)物坐骨神經(jīng),進(jìn)行電生理檢測(cè)。4.2電生理測(cè)量完畢,切取坐骨神經(jīng)斷裂縫合處神經(jīng)段,縱行剖開(kāi),其中1/2做標(biāo)本固定、包埋,制作切片,光鏡觀察神經(jīng)軸突再生情況;并做免疫組化染色,觀察S-100蛋白表達(dá)情況,記錄施旺細(xì)胞活性。4.3另外1/2神經(jīng)段做Western Blot記錄VEGF、IGF-1表達(dá)結(jié)果。4.4手術(shù)分離腓腸肌,切取約0.1g肌肉組織進(jìn)行ACh E含量檢測(cè)。5.SPSS 24.0統(tǒng)計(jì)軟件包對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。6.實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)參考國(guó)際或國(guó)內(nèi)權(quán)威機(jī)構(gòu)的相關(guān)文書(shū)。結(jié)果:1.靜脈全血中血小板平均濃度為304.87×109/L,PRP中平均血小板濃度為1336.42×109/L,PRP中血小板計(jì)數(shù)為全血中的4.38倍。2.術(shù)后12周坐骨神經(jīng)動(dòng)作電位(CNAP)在T-PRP組恢復(fù)優(yōu)于NS組和S-PRP組,且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。3.在術(shù)后12周神經(jīng)縫合處的細(xì)胞因子VEGF和IGF-1在各組均為陽(yáng)性,統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示VEGF和IGF-1積分光密度值在T-PRP組明顯高于其他三組,且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。4.術(shù)后12周,假手術(shù)組及T-PRP組坐骨神經(jīng)斷裂側(cè)腓腸肌中ACh E含量明顯高于NS組和S-PRP組,有非常顯著性差異(P0.01);NS組與S-PRP組無(wú)顯著性差異(P0.05);T-PRP組明顯高于NS組,組間具有顯著性差異(P0.01)。5.術(shù)后12周坐骨神經(jīng)組織中,假手術(shù)組、NS組和S-PRP組神經(jīng)組織內(nèi)S-100蛋白含量明顯低于T-PRP組,有非常顯著性差異(P0.01);NS組與S-PRP組無(wú)顯著性差異(P0.05)。結(jié)論:1.在兔坐骨神經(jīng)斷裂局部時(shí)間點(diǎn)多次應(yīng)用PRP可增加坐骨神經(jīng)局部微環(huán)境參數(shù)VEGF、IGF-1的含量,以及促進(jìn)施旺細(xì)胞的分裂增殖。2.多頻次神經(jīng)斷裂區(qū)注射PRP,能促進(jìn)膽堿能神經(jīng)遞質(zhì)ACh的合成和釋放,可增強(qiáng)周?chē)窠?jīng)損傷后運(yùn)動(dòng)終板的修復(fù),有利于周?chē)窠?jīng)的再生修復(fù)及功能恢復(fù)。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：西南醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類(lèi)號(hào)】：R651.3

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1616258