骨性關(guān)節(jié)炎相關(guān)基因MCF2L可增加滑膜成纖維細(xì)胞凋亡及誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)
本文選題:骨性關(guān)節(jié)炎 切入點(diǎn):凋亡 出處:《基因組學(xué)與應(yīng)用生物學(xué)》2017年06期 論文類型:期刊論文
【摘要】:MCF2L基因突變?cè)诠顷P(guān)節(jié)炎的發(fā)生與發(fā)展過程中扮演重要作用,本研究使用ENSEMBL及COMSIC數(shù)據(jù)庫篩選MCF2L突變位點(diǎn),構(gòu)建質(zhì)粒及腺病毒載體;將小鼠原代滑膜成纖維細(xì)胞分為正常對(duì)照組,野生型重組腺病毒干預(yù)的MCF2L過表達(dá)組和突變型重組腺病毒的突變組,檢測(cè)細(xì)胞上清中IL-lβ、MMP-13、PGE2水平及細(xì)胞凋亡。通過數(shù)據(jù)庫檢測(cè)分析發(fā)現(xiàn)可將第11位精氨酸作為突變位點(diǎn);p Yr-ads-4-MCF2L重組質(zhì)粒及突變型和野生型重組腺病毒包裝成功;突變組MCF2L RNA表達(dá)是對(duì)照組的1.92倍,過表達(dá)組是對(duì)照組的1.85倍;突變組及過表達(dá)組MCF2L蛋白表達(dá)水平均顯著高于對(duì)照組;過表達(dá)組上清中PGE2、MMP-13、IL-lβ水平顯著低于對(duì)照組(p0.05),突變組上清中PGE2、MMP-13、IL-lβ水平顯著高于對(duì)照組(p0.05),且突變組上清中PGE2、MMP-13、IL-lβ水平明顯高于過表達(dá)組,且差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05);對(duì)照組及過表達(dá)組細(xì)胞凋亡不明顯,在1%至10%之間;突變組細(xì)胞凋亡率高于對(duì)照組及過表達(dá)組,凋亡率達(dá)60%;こ衫w維細(xì)胞使用MCF2L基因突變重組腺病毒感染后,PGE2、MMP-13、IL-lβ水平均明顯提高,細(xì)胞凋亡率明顯加大。本研究對(duì)MCF2L的單核苷酸多態(tài)性對(duì)滑膜成纖維細(xì)胞的炎癥因子及凋亡活性的影響進(jìn)行分析,探討骨性關(guān)節(jié)炎發(fā)病過程中MCF2L發(fā)揮的作用,探討MCF2L基因與骨關(guān)炎的關(guān)系,為臨床應(yīng)用提供依據(jù)。
[Abstract]:MCF2L gene mutation plays an important role in the occurrence and development of osteoarthritis. In this study, ENSEMBL and COMSIC databases were used to screen MCF2L mutation sites, construct plasmid and adenovirus vector, and divide mouse primary synovial fibroblasts into normal control group. The MCF2L overexpression group and mutant recombinant adenovirus mutation group were induced by wild type recombinant adenovirus. The level of IL-l 尾 -MMP-13, PGE2 and apoptosis in the supernatant were detected. The recombinant plasmid of IL-l 尾 -MMP-13 PGE2 and the recombinant adenovirus containing mutant and wild type adenovirus could be successfully packaged with arginine at the 11th position as the mutation site. The expression of MCF2L RNA in mutant group was 1.92 times higher than that in control group, and that in overexpression group was 1.85 times higher than that in control group, and the expression level of MCF2L protein in mutant group and overexpression group was significantly higher than that in control group. The level of IL-l 尾 in the supernatant of the overexpression group was significantly lower than that in the control group, and the level of IL-l 尾 in the supernatant of the mutant group was significantly higher than that in the control group, and the level of IL-l 尾 in the supernatant of the mutant group was significantly higher than that in the overexpression group. The apoptosis rate of the mutant group was higher than that of the control group and overexpression group, and the apoptotic rate of the mutant group was higher than that of the control group and overexpression group. The apoptosis rate was 60%. The levels of IL-l 尾 of PGE2MMP-13 and IL-l 尾 were significantly increased in synovial fibroblasts infected with recombinant adenovirus with MCF2L gene mutation. The effect of single nucleotide polymorphism (SNP) of MCF2L on inflammatory factors and apoptosis activity of synovial fibroblasts was analyzed, and the role of MCF2L in the pathogenesis of osteoarthritis was discussed. To explore the relationship between MCF2L gene and Guguan inflammation and to provide the basis for clinical application.
【作者單位】: 晉江市醫(yī)院骨一科;
【基金】:泉州市科技項(xiàng)目(非擴(kuò)髓帶鎖髓內(nèi)釘在脛骨開放性骨折的臨床應(yīng)用,No.201101SH01)資助
【分類號(hào)】:R684.3
【參考文獻(xiàn)】
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,本文編號(hào):1616115
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