發(fā)布時(shí)間：2018-03-13 03:27

  本文選題：骨關(guān)節(jié)炎　切入點(diǎn)：Notch　出處：《四川醫(yī)科大學(xué)》2015年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：目的:檢測(cè)Notch信號(hào)通路在激活和失活狀態(tài)下,鼠膝骨關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞中Notch1、Bax和Bcl-2基因的表達(dá)情況,初步探討Notch信號(hào)通路對(duì)實(shí)驗(yàn)性大鼠膝骨關(guān)節(jié)炎軟骨細(xì)胞凋亡的作用機(jī)制。方法:第一部分:選取32只SD大鼠,使用Hulth方法制造右膝骨關(guān)節(jié)炎模型,于造模后4周隨機(jī)處死2只大鼠,觀察右膝關(guān)節(jié)軟骨大體形態(tài)學(xué)改變并行右膝關(guān)節(jié)軟骨病理組織學(xué)檢查,顯示大鼠骨關(guān)節(jié)炎模型造模成功。余下30只隨機(jī)分成三組,繼續(xù)同前飼養(yǎng),于每周星期2、5分兩次行SD大鼠膝關(guān)節(jié)腔注射。激活組(向關(guān)節(jié)腔注射Notch信號(hào)通路特異性激活劑Jagged1蛋白25ng/kg);抑制組(向關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射Notch信號(hào)通路特異性抑制劑DAPT100ng/kg);空白對(duì)照組(向關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射同體積PBS液)。第二部分:關(guān)節(jié)腔注射第8周后全部處死大鼠,取右膝股骨髁關(guān)節(jié)骨軟骨標(biāo)本,大體觀察三組大鼠膝關(guān)節(jié)軟骨的退變程度,行光鏡下組織形態(tài)學(xué)觀察及Mankin評(píng)分,并采用免疫組化檢測(cè)各組軟骨細(xì)胞中Notch1、Bax和Bcl-2的表達(dá)情況。結(jié)果:(1)肉眼觀察:激活組關(guān)節(jié)腫脹,脛骨平臺(tái)及股骨髁軟骨面不平整,失去光澤,關(guān)節(jié)軟骨破壞較重,有潰瘍及裂紋,部分區(qū)域關(guān)節(jié)軟骨剝脫,露出軟骨下骨,邊緣有骨贅形成;抑制組關(guān)節(jié)軟骨表面較光滑,關(guān)節(jié)無腫脹,關(guān)節(jié)軟骨較完整,可見少量軟化灶,無潰瘍及裂紋形成,無骨贅形成;空白對(duì)照組關(guān)節(jié)軟骨面欠光滑,關(guān)節(jié)軟骨破壞較輕,有少量骨贅形成,部分軟骨有裂紋,甚至有細(xì)小潰瘍出現(xiàn)。(2)HE染色:激活組關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞數(shù)目大量減少,軟骨細(xì)胞排列不整齊,細(xì)胞層次比較紊亂,表層有較大的缺損區(qū)出現(xiàn),潮線部分或完全消失,部分區(qū)域軟骨細(xì)胞有局灶增生;抑制組關(guān)節(jié)軟骨結(jié)構(gòu)破壞較輕,能清晰辨認(rèn)軟骨的4層結(jié)構(gòu),關(guān)節(jié)軟骨表面較光滑,未出現(xiàn)缺損區(qū),軟骨細(xì)胞排列整齊,層次清晰,潮線完整;空白對(duì)照組尚可辨認(rèn)關(guān)節(jié)軟骨的4層結(jié)構(gòu),關(guān)節(jié)軟骨面較粗糙,失去原有的平整性,在部分的軟骨表層可見細(xì)胞缺失,深層無明顯改變,潮線出現(xiàn)模糊不清晰,關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞出現(xiàn)彌漫性增生現(xiàn)象。激活組mankin評(píng)分高于空白對(duì)照組,組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05);抑制組mankin評(píng)分低于空白對(duì)照組,組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05);激活組mankin評(píng)分高于抑制組,組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。(3)免疫組化染色:激活組膝關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞notch1、bax陽性率高于空白對(duì)照組,組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05);抑制組膝關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞notch1、bax陽性率低于空白對(duì)照組,組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05);激活組膝關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞notch1、bax陽性率高于抑制組,組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。激活組膝關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞bcl-2陽性率低于空白對(duì)照組,組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05);抑制組膝關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞bcl-2陽性率高于空白對(duì)照組,組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05);激活組膝關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞bcl-2陽性率低于抑制組,組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。(4)bcl-2/bax比值:激活組bcl-2/bax比值低于空白對(duì)照組,組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;抑制組bcl-2/bax比值高于空白對(duì)照組,組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;激活組bcl-2/bax比值低于抑制組,組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論:激活notch信號(hào)通路可以加重骨關(guān)節(jié)炎,抑制notch信號(hào)通路可以減輕骨關(guān)節(jié)炎,Notch信號(hào)通路可能與OA發(fā)生發(fā)展有關(guān);Notch信號(hào)通路激活后可能通過凋亡途徑上調(diào)Bax蛋白,下調(diào)Bcl-2蛋白,從而促進(jìn)軟骨細(xì)胞凋亡,加重骨關(guān)節(jié)炎;Notch信號(hào)通路抑制后可能通過凋亡途徑下調(diào)Bax蛋白,上調(diào)Bcl-2蛋白,從而抑制軟骨細(xì)胞凋亡,減輕骨關(guān)節(jié)炎。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：四川醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R684

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 劉偉國(guó),楊小鋒,李谷;鹽酸納洛酮對(duì)嚴(yán)重顱腦損傷后神經(jīng)細(xì)胞凋亡及相關(guān)基因Bcl-2、Bax表達(dá)影響的研究[J];中華神經(jīng)外科雜志;2004年02期

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本文編號(hào)：1604613