發(fā)布時間：2018-03-13 03:27

  本文選題：骨關節(jié)炎　切入點：Notch　出處：《四川醫(yī)科大學》2015年碩士論文　論文類型：學位論文

【摘要】：目的:檢測Notch信號通路在激活和失活狀態(tài)下,鼠膝骨關節(jié)軟骨細胞中Notch1、Bax和Bcl-2基因的表達情況,初步探討Notch信號通路對實驗性大鼠膝骨關節(jié)炎軟骨細胞凋亡的作用機制。方法:第一部分:選取32只SD大鼠,使用Hulth方法制造右膝骨關節(jié)炎模型,于造模后4周隨機處死2只大鼠,觀察右膝關節(jié)軟骨大體形態(tài)學改變并行右膝關節(jié)軟骨病理組織學檢查,顯示大鼠骨關節(jié)炎模型造模成功。余下30只隨機分成三組,繼續(xù)同前飼養(yǎng),于每周星期2、5分兩次行SD大鼠膝關節(jié)腔注射。激活組(向關節(jié)腔注射Notch信號通路特異性激活劑Jagged1蛋白25ng/kg);抑制組(向關節(jié)腔內(nèi)注射Notch信號通路特異性抑制劑DAPT100ng/kg);空白對照組(向關節(jié)腔內(nèi)注射同體積PBS液)。第二部分:關節(jié)腔注射第8周后全部處死大鼠,取右膝股骨髁關節(jié)骨軟骨標本,大體觀察三組大鼠膝關節(jié)軟骨的退變程度,行光鏡下組織形態(tài)學觀察及Mankin評分,并采用免疫組化檢測各組軟骨細胞中Notch1、Bax和Bcl-2的表達情況。結果:(1)肉眼觀察:激活組關節(jié)腫脹,脛骨平臺及股骨髁軟骨面不平整,失去光澤,關節(jié)軟骨破壞較重,有潰瘍及裂紋,部分區(qū)域關節(jié)軟骨剝脫,露出軟骨下骨,邊緣有骨贅形成;抑制組關節(jié)軟骨表面較光滑,關節(jié)無腫脹,關節(jié)軟骨較完整,可見少量軟化灶,無潰瘍及裂紋形成,無骨贅形成;空白對照組關節(jié)軟骨面欠光滑,關節(jié)軟骨破壞較輕,有少量骨贅形成,部分軟骨有裂紋,甚至有細小潰瘍出現(xiàn)。(2)HE染色:激活組關節(jié)軟骨細胞數(shù)目大量減少,軟骨細胞排列不整齊,細胞層次比較紊亂,表層有較大的缺損區(qū)出現(xiàn),潮線部分或完全消失,部分區(qū)域軟骨細胞有局灶增生;抑制組關節(jié)軟骨結構破壞較輕,能清晰辨認軟骨的4層結構,關節(jié)軟骨表面較光滑,未出現(xiàn)缺損區(qū),軟骨細胞排列整齊,層次清晰,潮線完整;空白對照組尚可辨認關節(jié)軟骨的4層結構,關節(jié)軟骨面較粗糙,失去原有的平整性,在部分的軟骨表層可見細胞缺失,深層無明顯改變,潮線出現(xiàn)模糊不清晰,關節(jié)軟骨細胞出現(xiàn)彌漫性增生現(xiàn)象。激活組mankin評分高于空白對照組,組間比較差異有統(tǒng)計學意義(p0.05);抑制組mankin評分低于空白對照組,組間比較差異有統(tǒng)計學意義(p0.05);激活組mankin評分高于抑制組,組間比較差異有統(tǒng)計學意義(p0.05)。(3)免疫組化染色:激活組膝關節(jié)軟骨細胞notch1、bax陽性率高于空白對照組,組間比較差異有統(tǒng)計學意義(p0.05);抑制組膝關節(jié)軟骨細胞notch1、bax陽性率低于空白對照組,組間比較差異有統(tǒng)計學意義(p0.05);激活組膝關節(jié)軟骨細胞notch1、bax陽性率高于抑制組,組間比較差異有統(tǒng)計學意義(p0.05)。激活組膝關節(jié)軟骨細胞bcl-2陽性率低于空白對照組,組間比較差異有統(tǒng)計學意義(p0.05);抑制組膝關節(jié)軟骨細胞bcl-2陽性率高于空白對照組,組間比較差異有統(tǒng)計學意義(p0.05);激活組膝關節(jié)軟骨細胞bcl-2陽性率低于抑制組,組間比較差異有統(tǒng)計學意義(p0.05)。(4)bcl-2/bax比值:激活組bcl-2/bax比值低于空白對照組,組間比較差異有統(tǒng)計學意義;抑制組bcl-2/bax比值高于空白對照組,組間比較差異有統(tǒng)計學意義;激活組bcl-2/bax比值低于抑制組,組間比較差異有統(tǒng)計學意義。結論:激活notch信號通路可以加重骨關節(jié)炎,抑制notch信號通路可以減輕骨關節(jié)炎,Notch信號通路可能與OA發(fā)生發(fā)展有關;Notch信號通路激活后可能通過凋亡途徑上調(diào)Bax蛋白,下調(diào)Bcl-2蛋白,從而促進軟骨細胞凋亡,加重骨關節(jié)炎;Notch信號通路抑制后可能通過凋亡途徑下調(diào)Bax蛋白,上調(diào)Bcl-2蛋白,從而抑制軟骨細胞凋亡,減輕骨關節(jié)炎。
[Abstract]:......
【學位授予單位】：四川醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R684

【參考文獻】

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1 劉偉國,楊小鋒,李谷;鹽酸納洛酮對嚴重顱腦損傷后神經(jīng)細胞凋亡及相關基因Bcl-2、Bax表達影響的研究[J];中華神經(jīng)外科雜志;2004年02期

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本文編號：1604613