目的:研制并探討新型國產(chǎn)骨小梁模擬多孔鉭支架的生物相容性和骨誘導性能,并驗證其骨缺損修復效應(yīng)。材料和方法:設(shè)計和制造了新型的三維多尺度互連（跨尺度—獨立但彼此聯(lián)通）多孔鉭支架。使用掃描電子顯微鏡（SEM）和工業(yè)計算機斷層掃描（CT）觀察了新型多孔鉭的形貌。使用SEM觀察人臍帶間充質(zhì)干細胞（HUC-MSCs）在支架材料上的粘附及增殖,MTT法評價多孔鉭的細胞毒性和對細胞增殖的影響。用茜素紅染色法觀察多孔鉭材料對人間充質(zhì)干細胞鈣鹽沉積的影響。建立犬股骨干骨缺損模型,運用新型多孔鉭棒修復骨缺損,運用硬組織切片觀察骨長入和骨誘導性能。運用推出試驗評估多孔鉭骨整合情況。結(jié)果:成功研制出骨小梁模擬的多孔鉭支架材料,該材料具有三維,多尺度,相互連接的特點。MSCs附著在鉭表面并隨時間增殖,多孔鉭浸提液對MSCs無細胞毒性作用,并且對細胞增殖沒有影響。茜素紅染色顯示新型多孔鉭不影響體外成骨誘導效應(yīng)。在骨缺損模型中,多孔鉭棒與宿主骨緊密連接,在植入后的3個月和6個月后,在鉭-宿主骨界面上均觀察到新骨。在鉭棒的中央觀察到新生骨小梁生長。推出試驗表明,與正常股骨干骨組織相比,推出鉭棒所需的力量在3個月和6個... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學重慶市

【文章頁數(shù)】：40 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

新型多孔鉭材料的表觀形貌及微孔觀察Figure1:Structuralcharacterizationofnovelporoustantalumscaffold

重慶醫(yī)科大學碩士研究生學位論文15高的放大倍數(shù)下，我們發(fā)現(xiàn)細胞被拉伸，細胞質(zhì)向外延伸形成突起（圖2Ab）。在第5天，與第3天相比，細胞數(shù)量增加，表明細胞增殖。細胞相互融合并相互連接，平鋪在多孔鉭支架的表面上（圖2Bc）。在更高的放大倍率下（圖2Bd），我們檢測到細胞長入了材料的內(nèi)側(cè)，向材料表面和內(nèi)側(cè)伸出偽足，并形成了相互連接的突起。結(jié)果表明人間充質(zhì)干細胞在新型多孔鉭支架上可以正常生長，并且可以相互連接覆蓋材料表面。新型多孔鉭材料的生物相容性良好。圖2：人間充質(zhì)干細胞在新型多孔鉭材料上的粘附生長（A：第三天；B：第五天）Figure2:Adherentgrowthofhumanmesenchymalstemcellsonanovelporoustantalummaterial(A:Thethirdday;B:Thefifthday)2.3MTT法檢測新型多孔鉭對人間充質(zhì)干細胞增殖毒性的影響取生長狀態(tài)良好的UC-MSC細胞，將其接種至96孔板中。材料組為實驗組，無多孔鉭材料的單純UC-MSC細胞為空白對照組。培養(yǎng)至指定時間點后用酶標儀檢測孔板中各孔的吸光度（OD值）。測得的OD值顯示，在各個時間點，實驗組的細胞數(shù)量與對照組沒有明顯差異，兩組細胞在第5天生長達到峰值。統(tǒng)計學分

重慶醫(yī)科大學碩士研究生學位論文16析結(jié)果顯示：在培養(yǎng)過程中，實驗組和空白對照組之間沒有統(tǒng)計學差異（P>0.05，圖3）。結(jié)果表明新型多孔鉭材料對人間充質(zhì)干細胞的增殖生長沒有影響，沒有細胞毒性。圖3：MTT法檢測新型多孔鉭對人間充質(zhì)干細胞增殖毒性影響Figure3:MTTmethodtodetecttheeffectofnewporoustantalumontheproliferationtoxicityofhumanmesenchymalstemcells2.4茜素紅染色法觀察新型多孔鉭對人間充質(zhì)干細胞體外成骨效應(yīng)影響茜素紅染色觀察發(fā)現(xiàn)：人間充質(zhì)干細胞可以在新型多孔鉭材料周圍正常生長并分化為成骨細胞（圖4A）。和對照組（圖4B）相比，材料組的細胞分化并無特殊差異。結(jié)果表明新型多孔鉭材料組細胞正常生長且可見到明顯的鈣鹽沉積，與對照組相比無明顯差異，提示新型多孔鉭材料對間充質(zhì)干細胞的成骨分化無明顯影響。

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3451317