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基于原子力顯微鏡力示蹤技術(shù)研究硅納米粒子的跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)

發(fā)布時(shí)間:2020-05-10 14:58
【摘要】:硅納米結(jié)構(gòu)的獨(dú)特性質(zhì)導(dǎo)致其納入了廣泛的生物醫(yī)學(xué)應(yīng)用。硅納米結(jié)構(gòu)會(huì)產(chǎn)生有趣的光學(xué)和光電效應(yīng),例如光致發(fā)光,這對(duì)生物成像應(yīng)用非常有利。硅納米結(jié)構(gòu)的量子限制有利于高靈敏度生物傳感器的設(shè)計(jì)。隨著尺寸的減小,這些材料的相對(duì)表面積與體積比也增加。這種大的表面積,尤其是多孔形式表現(xiàn)出來(lái),有利于藥物和基因的負(fù)載。這種材料的生物相容性已經(jīng)被證明適用于多種納米結(jié)構(gòu)形式,包括薄膜,纖維,棒和顆粒,以及更復(fù)雜的結(jié)構(gòu)。其中,熒光硅納米粒子(SiNPs)由于其優(yōu)異的生物相容性和相對(duì)強(qiáng)的熒光以及超高光穩(wěn)定性,已經(jīng)在從電子學(xué)到生物醫(yī)學(xué)的廣泛應(yīng)用中獲得了相當(dāng)大的關(guān)注。迄今為止,熒光SiNPs在其各種生物學(xué)應(yīng)用方面已經(jīng)取得了很大進(jìn)展,包括生物成像,生物傳感器,基因轉(zhuǎn)染和藥物遞送。此外,作為多功能藥物載體,具有強(qiáng)熒光的SiNP成功用于光學(xué)成像引導(dǎo)的體外和體內(nèi)癌癥治療。然而,作為藥物載體,其進(jìn)入細(xì)胞這一過(guò)程對(duì)藥物載體來(lái)說(shuō)至關(guān)重要,但其跨膜過(guò)程由于研究手段的限制并不清楚。因此,我們基于單分子技術(shù)——力示蹤技術(shù),對(duì)單個(gè)熒光SiNPs的跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程進(jìn)行了詳細(xì)的研究。本研究主要集中在熒光SiNPs的內(nèi)吞過(guò)程上,并為這一過(guò)程提供了有用的信息。這對(duì)設(shè)計(jì)理想的藥物載體提供了非常有價(jià)值的參考,以及對(duì)醫(yī)學(xué)和生物學(xué)領(lǐng)域的研究也具有重大的意義。主要研究?jī)?nèi)容包括:1.運(yùn)用力示蹤技術(shù)實(shí)時(shí)記錄熒光SiNPs在非洲綠猴腎(Verda reno,Vero,正常的體細(xì)胞)細(xì)胞和宮頸癌(Human cervical cancer cell,HeLa,癌細(xì)胞)細(xì)胞膜上的跨膜過(guò)程,并得到相應(yīng)的跨膜動(dòng)力學(xué)參數(shù),如跨膜時(shí)間,跨膜力,跨膜位移和跨膜速率。同時(shí),與體細(xì)胞相比,我們得到癌細(xì)胞對(duì)熒光SiNPs的攝取需要更小的力,但具有更快的攝取速率。2.運(yùn)用力示蹤技術(shù)和熒光成像技術(shù)研究了Vero細(xì)胞攝取熒光SiNPs的機(jī)制。通過(guò)多種抑制劑與Vero細(xì)胞共孵育,運(yùn)用力示蹤實(shí)驗(yàn),我們得到網(wǎng)格蛋白依賴性內(nèi)吞,小窩蛋白依賴性內(nèi)吞和大胞飲都參與了Vero細(xì)胞對(duì)熒光SiNPs的攝取。同時(shí),熒光成像得到的結(jié)論與力示蹤實(shí)驗(yàn)得到的結(jié)論一致。
【圖文】:

示意圖,示意圖


AFM設(shè)備的示意圖

探針,反饋控制系統(tǒng)


2圖 1.2AFM 探針[8]3)數(shù)據(jù)處理和顯示系統(tǒng),,用來(lái)控制探頭和壓電掃描器的操作參數(shù),還示和分析結(jié)果。4)反饋控制系統(tǒng),反饋控制系統(tǒng)用來(lái)維持微懸臂振幅恒定。實(shí)際過(guò)程時(shí)得到的振幅值 Ai與一個(gè)參考值 Asp(稱為設(shè)定振幅),使得光電探振蕩信號(hào)的均方根大小維持恒定。反饋系統(tǒng)實(shí)際上是使振幅誤差信號(hào)(小,該誤差信號(hào)被送到比例-積分-微分(Proportional-interal-differenti輸出一個(gè)電壓信號(hào)給 Z 方向的壓電陶瓷,控制其伸長(zhǎng)或縮短從而使誤差
【學(xué)位授予單位】:長(zhǎng)春工業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類(lèi)號(hào)】:R318.08;O657.3;TQ460.1

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本文編號(hào):2657479

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